Туберкулезный аллерген

Аллерген туберкулезный очищенный жидкий

Раствор для внутрикожного введения по 10 или 30 доз в ампулах, по 10 ампул в картонной пачке.
Раствор для внутрикожного введения по 1мл в ампуле, в картонной пачке 1 ампула в комплекте с 5 стерильными шприцами и 5 иглами.

Аллерген туберкулезный очищенный жидкий в стандартном разведении содержит аллерген туберкулопротеин, который вызывает развитие у инфицированных или вакцинированных людей специфическую реакцию при проведении внутрикожной пробы.

Аллерген туберкулезный очищенный жидкий в стандартном разведении применяют для проведения внутрикожной туберкулиновой пробы Манту, в частности при отборе пациентов для ревакцинации БЦЖ и для определения наличия туберкулеза у людей различного возраста.

Перед проведением инъекции препарата Аллерген туберкулезный очищенный жидкий в стандартном разведении необходимо проведение медицинского осмотра с целью выявления возможных противопоказаний.

0,2мл раствора вводят внутрикожно (по Манту) в асептических условиях.
Препарат Аллерген туберкулезный очищенный жидкий в стандартном разведении применяют только в медицинских учреждениях, проводить инъекцию и оценивать результаты пробы должен только квалифицированный специалист.

Запрещено проведение пробы Манту при таких состояниях (а также в течение 1 месяца после исчезновения симптомов, перечисленных заболеваний):
— хронические соматические и инфекционные заболевания в период обострения, острые инфекционные и соматические заболевания;
— дерматологические заболевания, различной этиологии и локализации;
— аллергические заболевания, в том числе идиосинкразия с выраженными дерматологическими проявлениями, острая и подострая фаза ревматизма, бронхиальная астма;
— эпилепсия.
Не следует проводить пробу Манту при наличии карантина по инфекционным заболеваниям в детском коллективе, а также в течение месяца после окончания карантина.

При отсутствии состояния специфической реактивности не отмечается развития общих и местных нежелательных явлений (отрицательная реакция на туберкулин).
При поствакцинальной аллергии или инфицировании отмечается развитие местной реакции в виде инфильтрата и гиперемии. У пациентов с высокой степенью аллергии местные реакции могут сопровождаться развитием лимфангоитов и лимфаденитов.
Кроме того, при применении препарата Аллерген туберкулезный очищенный жидкий в стандартном разведении для внутрикожного применения возможно развитие боли в месте введения, слабости, гипертермии, головной боли, кожных аллергических реакций и анафилактического шока.

Не следует проводить пробу Манту в течение 1 месяца до или после проведения профилактической прививки.
Проведение плановой вакцинации допускается не ранее, чем через 72 часа после проведения пробы Манту.

Раствор для внутрикожных инъекций годен в течение 1 года при условии хранения в помещениях с температурой от 2 до 8 градусов Цельсия.
Вскрытую ампулу допускается хранить в течение 2 часов в асептических условиях при температуре от 2 до 8 градусов Цельсия.
Запрещено замораживать и нагревать раствор.
Не следует использовать препарат при повреждении упаковки во время хранения или при несоблюдении условий хранения.

ФС.3.3.1.0023.15 Туберкулин очищенный (ППД) (аллерген туберкулезный очищенный)

Содержимое (Table of Contents)

ФС.3.3.1.0023.15 Туберкулин очищенный (ППД) (аллерген туберкулезный очищенный)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Туберкулин очищенный (ППД) ФС.3.3.1.0023.15

(аллерген туберкулезный очищенный) Взамен ГФ Х, ст. 705,

ФС 42-3302-96,

ФС 42-3303-96

Настоящая фармакопейная статья распространяется на туберкулин очищенный (аллерген туберкулезный очищенный), который представляет собой очищенный туберкулопротеин ППД (PPD — purified protein derivative), полученный из инактивированных нагреванием фильтратов культур микобактерий туберкулеза (МБТ) человеческого и бычьего типов, очищенных ультрафильтрацией или другим адекватным методом от бактериальных клеток, с последующим осаждением трихлоруксусной кислотой (ТХУ). Внутрикожное введение туберкулина (проба Манту) выявляет наличие гиперчувствительности замедленного типа, которая является следствием сенсибилизации организма при вакцинации БЦЖ или заражении микобактериями туберкулеза. Препарат предназначен для диагностики туберкулеза, определения инфицированности населения микобактериями туберкулеза и отбора контингентов для вакцинации и ревакцинации против туберкулеза.

ПРОИЗВОДСТВО

Работа с микобактериями должна проводиться в помещениях, оборудованных автономной приточно-вытяжной вентиляцией, изолированных от помещений, где наличие микобактерий не допускается. Питательные среды перед посевом микобактерий должны быть проверены на стерильность. Выросшие на поверхности жидкой синтетической среды в виде складчатых пленок культуры микобактерий инактивируют автоклавированием при температуре 121 °С в течение не менее 30 мин или текучим паром при температуре 100 °С в течение 1 ч, фильтруют и концентрируют ультрафильтрацией.

Осаждение туберкулопротеина проводят 50 % раствором ТХУ; осадок отмывают убывающими концентрациями ТХУ, обрабатывают спиртом и эфиром, сушат, проверяют на стерильность и подлинность. После получения положительных результатов сводят в единую серию порошка-полуфабриката (субстанцию). Последующее сведение таких серий в единую серию субстанции является одним из методов получения стандартного препарата длительного срока хранения (20 и более лет). Субстанцию используют для производства туберкулина очищенного в стандартном разведении (2 ТЕ в 0,1 мл), предназначенного для массовой туберкулинодиагностики, или туберкулина очищенного, лиофилизата, предназначенного для индивидуальной туберкулинодиагностики (в ампуле 50000 ТЕ).

Предварительно серию субстанции тестируют на стерильность, отсутствие сенсибилизирующих свойств, специфическую безопасность (отсутствие живых микобактерий туберкулеза), специфическую активность – определение дозы-навески, содержащей 50000 ТЕ. Специфическую активность туберкулинов выражают в туберкулиновых единицах (ТЕ), эквивалентных международным туберкулиновым единицам (TU).

Емкость со смесью порошков (субстанцией) хранят в эксикаторе в темном сухом месте. Каждые 5 лет субстанция подлежит повторному испытанию на стерильность и специфическую активность на животных (подтверждение дозы-навески).

ИСПЫТАНИЯ СУБСТАНЦИИ

Стерильность

Субстанция должна быть стерильной. Субстанцию растворяют в 0,9 % растворе натрия хлорида из расчета 1 мг в 1 мл. Определение проводят в соответствии с ОФС «Стерильность».

Содержание белка

Должно быть не ниже 75 %. Определение проводят колориметрическим методом в соответствии с ОФС «Определение общего азота с реактивом Несслера в иммунобиологических лекарственных препаратах».

Специфическая активность

Установление дозы-навески субстанции ППД, содержащей 50000 ТЕ. Определение проводят на 18 сенсибилизированных морских свинках путем сопоставления активности разведений навесок порошка (субстанции) с активностью стандартного образца (СО) ППД (СО специфической биологической активности очищенного туберкулина). Сенсибилизируют животных внутрикожным введением в область живота (в 2 – 4 места) вакцины БЦЖ или убитых нагреванием микобактерий туберкулеза в неполном адьюванте Фрейнда (0,5 – 1 мг микобактерий на 1 животное).

Три навески исследуемой субстанции ППД, массой не менее 50 мг каждая, растворяют в фосфатном буферном растворе, рН (7,4 ± 0,05) таким образом, чтобы в 1 мл субстанции ППД содержалось на 20 % ниже и выше дозы навески СО ППД (получают 3 основных раствора). Сравнивают специфическую активность основного раствора с СО ППД, проводя испытание на 6 сенсибилизированных морских свинках. Для этого из основного раствора готовят разведения 1:40; 1:200 и 1:1000 и титруют относительно 5; 25 и 125 ТЕ СО, вводя внутрикожно по 0,1 мл каждого разведения сенсибилизированным морским свинкам в группе по методу случайной выборки (например, метод латинских квадратов). Ответные реакции учитывают через 24 ч. Статистический анализ основан на том, что зависимость lg «доза – эффект» имеет линейный характер. Вычисляют средний угол наклона линий и подсчитывают логарифм относительной активности (lg R) — расстояние между параллельными линиями зависимости доза – эффект. Относительная активность (R) должна быть равна (1,0 ± 0,2) при доверительных границах в пределах от 75 до 130 % (Р = 0,95). За доверительные границы принимают ± 2 стандартные ошибки логарифма относительной активности. Если бóльшая испытуемая навеска имеет по сравнению с СО ППД меньшую величину, следует увеличить навески и провести титрование. Если на меньшую навеску реакции будут с большей величиной, по сравнению с СО ППД, то следует провести титрование, используя уменьшенные навески порошка испытуемой субстанции.

Специфическая безвредность

Отсутствие живых микобактерий туберкулеза определяют на морских свинках, содержащихся в условиях, исключающих их контаминацию живыми микобактериями туберкулеза. Раствор субстанции, содержащей 50000 ТЕ/мл в фосфатном буфере без консерванта и стабилизатора, в объеме 10 мл центрифугируют при 3000 об/мин в течение 30 мин. Верхний слой надосадочной жидкости (около 8 мл) удаляют, осадок ресуспендируют и вводят внутрибрюшинно по 1 мл 2 морским свинкам массой 250 – 300 г, за которыми наблюдают 42 сут. Животные должны оставаться здоровыми. Через 42 сут морских свинок вскрывают и проводят макроскопическое, гистологическое и бактериологическое исследование внутренних органов (селезенки, легких, печени и лимфатических узлов). При макроскопическом и микроскопическом исследовании не должно быть обнаружено патологических признаков, характерных для туберкулезной инфекции. Для бактериологического (культурального) исследования тщательно гомогенизируют лимфатические узлы (все вместе), селезенку, ¼ часть печени и одно легкое. Гомогенизаты обрабатывают в течение 10 мин 5 % раствором серной кислоты, центрифугируют при 3000 об/мин в течение 15 мин, ресуспендируют в 0,9 % растворе натрия хлорида и засевают на яичную среду Левенштейна-Йенсена (не менее 5 пробирок для каждого органа). Посевы выдерживают в течение 45 сут при температуре 37 °С. Рост колоний микобактерий на поверхности среды должен отсутствовать.

Сенсибилизирующие свойства

Должны отсутствовать. Морским свинкам (3 особи) массой 300 – 350 г вводят внутрикожно трехкратно с интервалом 5 сут по 125 ТЕ в 0,1 мл разведения субстанции. Спустя 15 сут этим и 3 интактным морским свинкам вводят внутрикожно по 500 ТЕ в 0,1 мл испытуемой субстанции. Разведения 125 и 500 ТЕ готовят из основного раствора субстанции, используя 0,9 % раствор натрия хлорида. Ответную реакцию учитывают через 24 ч, измеряя 2 взаимно перпендикулярных диаметра эритемы. Реакции у первых 3 морских свинок не должны отличаться от реакций у контрольных животных (p > 05). Животных содержат в условиях, исключающих контаминацию микобактериями.

ИСПЫТАНИЕ ТУБЕРКУЛИНА

Описание

Туберкулин очищенный в стандартном разведении – бесцветная прозрачная жидкость без посторонних включений. Туберкулин очищенный (лиофилизат) – пористая масса или аморфный порошок серовато-белого или кремового цвета, который для проведения испытаний разводят в 1 мл прилагаемого растворителя.

Подлинность

Вызывает при внутрикожном введении морским свинкам, сенсибилизированным вакциной БЦЖ, 12 – 16-суточной культурой БЦЖ или убитыми Mycobacterium tuberculosis, положительные реакции (как описано в разделе «Специфическая активность»).

Прозрачность

Должен быть прозрачным. Определение проводят визуально в соответствии с ОФС «Прозрачность и степень мутности жидкостей».

Цветность

Должен быть бесцветным. Определение проводят визуально в соответствии с ОФС «Степень окраски жидкостей».

рН

От 7,35 до 7,45. Определение проводят потенциометрическим методом в соответствии с ОФС «Ионометрия».

Стерильность

Должен быть стерильным. Определение проводят в соответствии с ОФС «Стерильность» методом прямого посева или мембранной фильтрации.

Аномальная токсичность

Должен быть нетоксичным. Определение проводят в соответствии с ОФС «Аномальная токсичность». Вводят внутрибрюшинно 5 белым мышам массой 17 — 20 г тест-дозу в объеме 0,5 мл; покожно 2 морским свинкам массой 250 – 300 г тест-дозу в объеме 1 мл. Период наблюдения за животными составляет 7 сут.

Специфическая активность

Индекс специфической активности (I) туберкулина очищенного в стандартном разведении (отношение суммы реакций на испытуемый препарат к сумме реакций на СО ППД должен находиться в пределах от 0,95 до 1,05 при отсутствии достоверных различий между средними реакциями на стандартный и испытуемый образцы. Испытание проводят на 6 морских свинках, белокожих или альбиносах, массой (350 ± 50) г, сенсибилизированных, как описано выше, для определения дозы-навески субстанции. На каждом боку ставят по 4 пробы (отдельными шприцами) с 2 ТЕ в 0,1 мл испытуемой серии и 2 ТЕ СО ППД, чередуя предварительно закодированные по методу случайной выборки 8 шприцев с препаратами. Реакции регистрируют через 24 ч.

Относительная активность ( R) очищенного туберкулина, лиофилизата, должна быть равна (1,0 ± 0,2) при доверительных границах в пределах от 75 до 130 % (Р = 0,95). Из основного разведения испытуемой серии, содержащего 50000 ТЕ в 1 мл (в ампулу добавляют 1 мл прилагаемого растворителя), готовят 3 разведения: 5; 25 и 125 ТЕ в 0,1 мл, используя для этой цели 0,9 % раствор натрия хлорида. Определение проводят по разделу «Специфическая активность — определение дозы навески субстанции», используя 5; 25 и 125 ТЕ в 0,1 мл СО ППД.

Если результат испытания выходит за допустимые пределы, испытание повторяют. Результаты первого и повторного испытаний усредняют.

Производственные штаммы

Для приготовления применяют туберкулиногенные штаммы микобактерий туберкулеза M. tuberculosis Dt/Strain, и/или Т-3480 и M. bovis “Vallee” из Государственной коллекции ПБА. Используют не более 2 пассажей на плотной питательной среде для выращивания микобактерий, не более 2 пассажей на жидкой картофельной среде и не более 8 пассажей на синтетической среде Линниковой-Могилевского.

Упаковка и маркировка

В соответствии сОФС «Иммунобиологические лекарственные препараты». На упаковке очищенного туберкулина, лиофилизата, должна быть надпись: «Только для специализированных медицинских учреждений».

Транспортирование и хранение

При температуре от 2 до 8 о С в условиях, исключающих замораживание.

Туберкулезный аллерген

Каталог оборудования Siemens и Viking, с изображениями и подробным описанием.

Вакцины

Каталог вакцин. Здесь вы можете узнать всё о вакцинах, растворах, иммуноглобулинах. Их подробное описание, показания к применению и противопоказания.

Контакты

Способы связи с нами.

Новости

Новостной блог для тех, кто следит за своим здоровьем.

  • Главная ►
  • Вакцины ►
  • Туберкулёз ►
  • Аллерген туберкулезный очищенный

Аллерген туберкулезный очищенный

Действующее вещество

Аллергены бактерий

Состав и форма выпуска

Препарат выпускают в ампулах по 3 мл (30 доз), 2 мл (20 доз) или 1 мл (10 доз) по 2 ТЕ в 0,1 мл.
Ампулы зафасованы в картонные коробки или пачки из картона. В одной коробке-10 ампул, инструкция по применению препарата и нож для вскрытия ампул.

Фармакологическое действие

Показания препарата

Препарат предназначен для массовой туберкулинодиагностики, с целью:

  • с целью отбора контингента для ревакцинации БЦЖ, а также перед первичной вакцинацией детей в возрасте 2 месяца и более.
  • для диагностики туберкулеза, в том числе для раннего выявления начальных и локальных форм туберкулеза у детей и подростков.
  • для определения инфицирования микобактериями туберкулеза.

Противопоказания

Распространенные кожные заболевания, эпилепсия, острые, хронические инфекционные и соматические заболевания в период обострения, аллергические состояния (ревматизм в острой и подострой фазах, бронхиальная астма, идиосинкразии с выраженными кожными проявлениями в период обострений). Проба Манту ставится череэ 1 месяц после исчезновения всех клинических симптомов или сразу после снятия карантина. Не допускается проведение пробы Манту в тех детских коллективах, где имеется карантин по детским инфекциям. Профилактические прививки могут повлиять на чувствительность к туберкулину. Исходя из этого, туберкупинодиагностику необходимо планировать до проведения профилактических прививок против различных инфекций. В случае, если профилактическая прививка была проведена, то туберкулинодиагностика должна осуществляться не ранее, чем через 1 месяц после прививки.
С целью выявления противопокаэаний врач (медицинская сестра) в день постановки туберкулиновых проб проводят опрос и осмотр подвергаемых пробе лиц.

Применение при беременности/кормлении грудью

Противопоказан к применению при беременности.

Побочные действия

Находится в зависимости от уровня специфической реактивности организма.
У отдельных лиц с высокой степенью гиперчувствительности замедленного типа к туберкулину, местные реакции могут сопровождаться лимфангоитами и лимфаденитами. Кроме того, иногда наблюдают общую реакцию: недомогание, головная боль, повышение температуры.

Здоровым лицам, с сомнительной или положительной реакцией на пробу Манту и детям с отрицательной реакцией на туберкулин, но не подлежащим вакцинации БЦЖ, все профилактические прививки можно проводить непосредственно после оценки результатов пробы Манту.

Способ применения и дозы

Применяют для постановки внутрикожной пробы Манту Препарат вводят строго внутрикожно. Пробу Манту ставят пациентам обязательно в положении сидя, т.к. у эмоционально лабильных лиц инъекция может стать причиной обморока. Для проведения внутрикожной пробы применяют однограммовые туберкулиновые шприцы разового использования с короткими тонкими иглами.

Что следует знать о вакцинации?

Вакцинация не защищает на сто процентов от инфекционных болезней, но позволяет значительно снизить риск заболевания, особенно у детей первого года жизни. Это очень важно — чем меньше ребенок, тем слабее его иммунная система. Если же человек все-таки заболеет, то сделанная заранее прививка поспособствует протеканию болезни в более легкой форме, также исключаются тяжелые осложнения и последствия. Тотальная вакцинация (охват более 92% населения страны) позволяет избежать эпидемий в национальном масштабе.
До сих пор распространено убеждение, что прививка — это разовая процедура. Главное — ее сделать. Это не верно: необходимо убедиться, что в ответ на введение вакцины у человека возникает адекватный иммунитет. Поэтому схема вакцинации должна быть такой:

  • Подготовка к вакцинации.
  • Курс вакцинации.

Проверка эффективности вакцинации, например, с помощью анализа крови на антитела. Читать полностью

Туберкулезный аллерген

МНН: Аллергены бактерий.

Раствор для внутрикожного введения.

Препарат предназначен для диагностики туберкулеза:
1. Для массовой диагностики туберкулеза у детей с 12 месячного возраста до 7 лет включительно, в том числе для раннего выявления начальных и локальных форм туберкулеза;
2. В целях отбора контингентов для ревакцинации БЦЖ, а также перед первичной вакцинацией детей в возрасте от 2 месяцев;
3. Для определения инфицированности населения туберкулезом (или состояния повышенной чувствительности к туберкулину, если наличие поствакцинальной аллергии в данном контингенте не позволяет судить об инфицированности).

Активное вещество — аллерген туберкулопротеин.

Срок годности:
2 года при температуре от 2-8 0 С.

Форма выпуска:
— Комплект: 1 ампула по 1 мл (10 доз), 2 ТЕ/доза, 5 туберкулиновых шприцов.
— Упаковка: 10 ампул по 1 мл (100 доз в упаковке), 2 ТЕ/доза.

Производитель:
ФГУП «СПбНИИВС» ФМБА России.

Очищенный туберкулезный аллерген для проведения реакции Манту

Выбор эффективного препарата для проведения реакции Манту является важным аспектом диагностики заболевания, вызываемого палочкой Коха. Аллерген туберкулёзный очищенный в стандартном разведении – это одно из наиболее распространённых средств в данном случае. Для того чтобы разобраться в целесообразности его применения, стоит изучить механизм действия препарата, иммунологические и биологические свойства, основные противопоказания, а также возможные побочные эффекты.

Понятие о средстве

Туберкулёзный аллерген является смесью белков убитых посредством температурного воздействия на культуры возбудителя нескольких штаммов. Средство очищено при помощи фильтрации, хлоруксусной кислоты, обработки этиловым спиртом, стабилизирующего растворителя, а также наркозного эфира. Одна доза средства составляет 0,1 мл препарата и содержит в своём составе две туберкулиновые единицы белковой вытяжки умерших микобактерий, а также вспомогательные вещества.

Форма выпуска средства – ампула, каждая из которых содержит 3 мл средства. Оно предназначено для проведения массовой туберкулиновой диагностики путём введения препарата внутрь кожи. Препарат не имеет цвета и не содержит в себе осадочных и посторонних факторов.

Главным активным веществом средства является туберкулин. При проведении противотуберкулёзного обследования у детей, которые подверглись инфицированию или вакцинации, он способен вызывать воспалительные процессы в виде развития покраснений и уплотнения.

Рекомбинантный очищенный туберкулёзный предназначен не только для обнаружения людей, поражённых палочками Коха.

Он также используется при наличии определённых факторов:

  • ревакцинация БЦЖ по истечении срока действия препарата, который наступает каждые 6-7 лет;
  • первичное введение противотуберкулёзных прививок детям от двух месяцев;
  • своевременное обнаружение очагов инфекции для предотвращения заражения других людей, а также для сохранения здоровья ребёнку.

Препарат используется массово при выполнении реакции Манту во всех учебных заведениях в начале учебного года, обычно в сентябре.

Также провести процедуру можно индивидуально при наличии подозрений на туберкулёз или дифференциальной диагностике с другими инфекционными заболеваниями дыхательной системы.

Нюансы применения, оценка результатов

Очищенный туберкулёзный аллерген применяется для проведения внутрикожной реакции Манту. Средство разрешается вводить только этим путём, поскольку в других случаях оно может вызывать различные побочные эффекты, которые опасны для здоровья ребёнка. Проводить процедуру обязательно нужно в сидячем положении, поскольку эмоционально лабильные дети могут упасть в обморок.

При проведении противотуберкулёзной диагностики с использованием туберкулиновых препаратов используются специальные однограммовые шприцы для разового применения, которые имеют короткие тонкие иглы. Нельзя осуществлять реакцию Манту при помощи приборов с истекшим сроком годности, а также инсулиновыми шприцами.

Перед использованием ампулу с аллергеном нужно тщательно обтереть при помощи марли, которая смочена в 70% растворе этилового спирта. После этого от шейки сосуда избавляются при помощи специального ампульного ножа. В туберкулиновый шприц с иглой №0845 набирается 0,2 мл туберкулёзного аллергена, что составляет две одиночных дозировки, а потом выпускают содержимое до 0,1 мл в кусок ваты. Хранение ампулы после того, как она была вскрыта, допустимо в асептической среде не более 3 часов.

Препарат вводится в область средней трети предплечья. Перед этим участок кожных покровов обрабатывается при помощи 70% этилового спирта и просушивается ватным тампоном. Врач производит фиксацию кожи ребёнка двумя пальцами. Игла вводится срезом кверху параллельно поверхности кожных покровов. После этого из шприца вводится 0,1 мл очищенного аллергена туберкулёзного, что составляет 2 туберкулиновые единицы. При правильном введении на коже образуется уплотнение белого оттенка, которое напоминает лимонную корочку, размером 4-5 мм в радиусе.

Реакция Манту ставится специально обученным человеком, который имеет документ, подтверждающий квалификацию по проведению туберкулиновой диагностики.

Оценкой результатов должен заниматься исключительно врач. Это происходит путём измерения размера уплотнения спустя трое суток при помощи прозрачной линейки с точной градуировкой. Регистрируется диаметринфильтрата. Покраснения учитываются в случаях отсутствия уплотнений.

Туберкулиновая проба может иметь несколько результатов:

  1. Отрицательный. При этом папула и покраснения отсутствуют. Возможно присутствие реакции на укол, размер которой не превышает 1 мм.
  2. Сомнительный. В этом случае наблюдается уплотнение диаметром 3-5 мм или покраснения различных размеров без присутствия инфильтратов. При наличии этого результата врач может провести пробу Манту повторно для получения более конкретного ответа.
  3. Положительный. Наличие данного результата говорит о том, что размер папулы более 5 мм. Это свидетельствует о контакте организма ребёнка с микобактериями возбудителя. Для подтверждения диагностики могут использоваться дополнительные методы исследования, на основании которых ставится диагноз.
  4. Гиперэргический. Диаметр инфильтрата у детей в этом случае больше 15 мм, а у взрослых – более 21 мм. При этом наблюдаются везикулярные некротические процессы вместе с лимфангоитом, наличие которых не зависит от размера папулы.

Реакции на попадание очищенного туберкулёзного антигена в организм ребёнка относится к процессам гиперчувствительности замедленного типа. Пик процессов наблюдаетсяспустя 2-3 дня. После этого клинические признаки местных проявлений исчезают.

Проводить пробу Манту может только опытный специалист при наличии соответствующих условий. Это поможет сделать противотуберкулёзную диагностику комфортной и безопасной для здоровья ребёнка.

Противопоказания, побочные эффекты при исследовании

К ним относятся:

  • острые инфекционные болезни;
  • хронические патологии в стадии обострения;
  • соматические заболевания;
  • наличие аллергических процессов;
  • индивидуальная непереносимость компонентов препарата;
  • бронхиальная астма;
  • ревматизм;
  • эпилептический анамнез.

Проведение туберкулиновой реакции разрешается спустя один месяц после устранения всей клинической картины заболеваний. Не разрешается использование туберкулиновой реакции в учебных заведениях, где введён карантин при инфекционных заболеваниях. Введение профилактических прививок также может негативно сказаться на чувствительности организма к действующему веществу препарата.

Диагностику против туберкулёза стоит планировать до проведения вакцинации к различным заболеваниям. В ситуациях, когда профилактическое введение прививок было осуществлено, проба Манту переносится не менее чем на месяц.

Для выявления наличия противопоказания врач перед постановкой реакции проводит сбор анамнеза у детей, которые подлежат пробе. Это даст возможность избежать тяжёлых последствий.

Введение очищенного туберкулёзного аллергена может сопровождаться развитием побочных эффектов. Среди них наиболее распространёнными являются общая слабость, мигрени, головокружения, повышение температуры до 38 и более градусов по Цельсию. У некоторых исследуемых с повышенным уровнем ГЗТ к очищенной инъекции аллергена может быть в комплексе с лимфаденитом.

Детям, которые после проведения реакции Манту получили отрицательный результат, разрешается введение профилактических вакцинспустя суткипосле оценки полученных результатов. В ином случае нужно выждать определённое время, которое обычно составляет от 4 до 6 недель.

Цена препарата варьируется от 500 до 1500 рублей в зависимости от того, какой у него производитель. Поскольку препарат относится к группе ЖНВЛП, то купить его можно во всех аптеках по предварительному заказу. В каждой пачке с ампулами находится инструкция по правилам использования и хранения.

Чтобы предотвратить развитие осложнений, нужно придерживаться всех правил хранения препарата и проведения пробы. Это поможет сделать противотуберкулёзную диагностику с использованием очищенного туберкулёзного антигена комфортно и безопасной для здоровья ребёнка.

Туберкулёзная аллергия

О туберкулёзе, аллергии и их последствиях…

вторник, 3 октября 2020 г.

ТУБЕРКУЛЕЗНАЯ АЛЛЕРГИЯ

Констатируется присутствие туберкулёзной палочки в организме у практически здорового человека наличием положительной реакции на кожные туберкулиновые пробы Манту или Пирке. В ответ на внедрение этой инфекции организм настораживается (сенсибилизируется), повышает свой иммунитет. Эта защитная реакция сенсибилизации относительно мала, индивидуальна и классифицируется по кожным проявлениям в месте укола как норм-эргическая, гипо-эргическая или гипер-эргическая в зависимости от активности инфекции и защитных возможностей нервной системы организма в данное время. Повышенный, гиперэргический вариант ответа в быту принято называть аллергическим (греч. аллос-иной).
Обычный анализ крови не отражает наличия сенсибилизации и остаётся нормальным. Состояние сенсибилизации не имеет клинических проявлений и обнаруживается лишь в случаях возникновения аллергической РЕАКЦИИ (болезненных симптомов) при действии разрешающего фактора (см. «Кое что об аллергии» на нашем сайте).
В зарубежной литературе состояние сенсибилизации к туберкулёзной палочке входит составной частью в понятие «латентный туберкулёз».

Сенсибилизация (повышенная чувствительность) к туберкулину после заражения туберкулёзной микобактерией и закономерность возникновения в части случаев на её фоне аллергической РЕАКЦИИ, то есть «аллергической болезни» хорошо изучена. Все закономерности реакций сенсибилизированного инфекционным агентом организма, то есть условия появления аллергических реакций, сроки их появления и значение интенсивности сенсибилизации, роль стойкости инфекции, роль разрешающего фактора, направленность лечения инфекционно-аллергических реакций (болезней) описаны в классических трудах Сиротинина, Здродовского, Крайпа (Criep) и других [1,2,27]. Туберкулёз служит модельной инфекцией, вся теория инфекционной аллергии построена исключительно на примере туберкулёзной аллергии [1,2,27]. Там же приведены принципиальные отличия туберкулёзной аллергии как реакции ЗАМЕДЛЕННОГО типа от аллергических реакций НЕМЕДЛЕННОГО типа (анафилаксии). См. «Кое что об аллергии» на нашем сайте.

Является ли нормой положительная проба Манту у практически здорового человека ,то есть сенсибилизация туберкулёзной палочкой? Как часто она встречается?
Положительная туберкулиновая проба подтверждает факт инфицированности (не заболевания!) туберкулёзной палочкой в результате прививки вакциной БЦЖ или бытового заражения. Наличие туберкулёзной сенсибилизации (положительной пробы Манту) в настоящее время является нормой для взрослого инфицированного человека.

НЕ является желательной нормой крайне высокая частота и степень инфицированности людей и окружающей их внешней среды туберкулёзной микобактерией.

По данным ВОЗ (Всемирной Организации Здравоохранения) во всём мире наблюдается рост числа людей, инфицированных туберкулезом. Дети начинают свой путь свободными от этой инфекции. По данным 50-х годов уже к 7–8 годам были инфицированы (не больны!) более 16% детей, а к возрасту в 30-40 лет уже инфицировано 70-90% населения. По материалам Института туберкулёза АМН СССР [26] в 1955г, т.е. ДО введения обязательных прививок БЦЖ в нашей стране, инфицированность населения колебалась в широких пределах, в сельской местности она меньше (первая цифра), в городах – больше (вторая цифра). Наиболее типичными показателями (по пробе Пирке) считались для раннего возраста 3–8%, для дошкольного – 10-20%, для детей 7-14 лет – 20-35%, для подростков 15-18 лет — 40-60%, для студентов (21г. и старше) нескольких московских ВУЗов – 90,4% по пробе Пирке и 98,1% по пробе Манту. В те же годы были получены ВОЗ похожие данные инфицированности по Австралии: для детей 8-14 лет в среднем – 45,7%, для людей старше 45 лет -80,8%. Инфицированность населения в Париже старше 40 лет составляла в те же годы почти 90% [26]. Таким образом, основная масса населения разных стран инфицируется туберкулёзной микобактерией уже в зрелом возрасте.

В настоящее время считается, что ЧИСЛО инфицированных и заболевших среди населения увеличилось (вместе с ростом численности населения Земли). Служба фтизиатрии в С.-Петербурге является одной из лучших в России, показатели заболеваемости и смертности от туберкулёза там значительно ниже общероссийских. По их данным инфицированность населения к возрасту в 20-25 лет достигает 80%, а заболеваемость – 49,1 случая на 100 000 населения [3] Это очень хорошие показатели, близкие к западноевропейским, восточно-европейские и по России – значительно хуже. ИНФИЦИРОВАННОСТЬ (не заболеваемость!) населения по России после 35-40 лет в городах не менее 90%. В 2002-2007 г. в медицинских учебных заведениях на Урале на старших курсах инфицированность (не заболеваемость!) более 80%. По данным 14 зарубежных авторов 1966-78 годов инфицированность (не заболеваемость!) взрослых на Западе 80-90% (цит. по В.Ю.Мишину 2007). В 2003г. ЗАБОЛЕВАЕМОСТЬ туберкулёзом в среднем по России составляла 90,7 случаев на 100 000 населения, т.е. 0,09% [4]. Сейчас уже много меньше. При анализе этих данных необходимо учитывать наличие строгого БЦЖирования в род-домах России. Регулярный контроль инфицированности населения (скрининг) туберкулиновыми пробами в СССР был организован лучше, чем в других странах.

Как следует из приведенных статистических данных, абсолютное большинство взрослого населения инфицировано микобактерией туберкулёза и сенсибилизировано ею. Та малая часть из них, у кого сенсибилизация оказалась велика или возникший разрешающий фактор (см.«Кое что об аллергии») оказался для них слишком значителен, заболевают инфекционно-аллергическими болезнями и приходят к нам, терапевтам общего профиля, за помощью. Ни врач, ни больной не подозревают настоящего виновника болезни, то есть туберкулёзную палочку, так как теоретически все «практически здоровы» от туберкулёза. На самом деле, в этом случае имеется усиление аллергической реакции организма, сенсибилизированного туберкулёзной палочкой, не только на повторное попадание в организм ослабленной или малой дозы туберкулёзной палочки, но и, возможно, на действия другого сильного фактора, ослабившего защитные силы организма, в первую очередь — его нервную систему.

Инфицированность, то есть зараженность («латентный туберкулёз» по западной терминологии), выявляется по наличию положительной туберкулиновой кожной пробы (Манту, Пирке). Самый факт попадания туберкулёзных микобактерий в организм человека означает только заражение микробным агентом, но не заболевание [16,37]. Согласно приведенной выше статистике, ежегодно заболевают много менее 0,09% из обследованных людей. Вот этими малыми процентами занимается служба фтизиатрии. Все остальные люди с положительной пробой Манту считаются практически здоровыми, свободными от ЗАБОЛЕВАНИЯ туберкулёзом.

Что такое «практически здоровы»? Свободны ли они от туберкулёзной палочки? Нет, не свободны. Если есть положительная проба Манту, то есть и очаг (очажок) инфекции. Он может быть мал, незаметен, не болеть, но он есть. Он возник, вызвав настороженность защитных сил организма и проявляет себя повышенной чувствительностью (сенсибилизацией) к повторной встрече с туберкулёзной палочкой или её аллергеном. Каждый человек, дающий реакцию на пробу Манту имеет такую туберкулёзную настороженность (ГЗТ т.е. Гиперэргию Замедленного Типа). При этом он может оставаться практически здоровым. Возникновение аллергической РЕАКЦИИ, то есть БОЛЕЗНЬ, происходит лишь при воздействии разрешающего фактора.

Может ли просто «носительство» туберкулёзной палочки вызвать сенсибилизацию, т.е. положительную пробу Манту? Нет, не может. Сенсибилизация является защитной (иммунной) реакцией организма. «Носительством» обозначаются те случаи, когда инфекция не проникает во внутреннюю среду организма человека и, следовательно, не вызывает никакой иммунной реакции, туберкулиновые пробы отрицательны.

Таким образом, наличие сенсибилизации (повышенной чувствительности) после вакцинации или заражения туберкулёзной палочкой является закономерностью и, до определённых пределов, даже положительным фактором, так как свидетельствует о наличии приобретенного противо-туберкулёзного иммунитета в дополнение к врождённому.

Туберкулёзную сенсибилизацию нужно воспринимать, как бочку с порохом, она может простоять спокойно много лет, даже всю жизнь, в одних условиях, но может и взорваться при случае.

Если к врачу обратился больной с одним из инфекционно-аллергических заболеваний, то нужно помнить, что термин «инфекционная аллергия» указывает на какую-то ИНФЕКЦИЮ КАК ПРИЧИНУ возникновения болезни в каждом случае. Какую же инфекцию нужно считать причиной реакции (болезни) — ту, которая вызвала сенсибилизацию давно или ту, которая явилась разрешающим фактором и вызвала реакцию (болезнь) через 24-72 часа после её воздействия? Безусловно, лечить надо от той инфекции, которая МНОГО РАНЕЕ ВЫЗВАЛА СЕНСИБИЛИЗАЦИЮ. Это доказано в многочисленных экспериментах многими учеными. См. «Как выявить виновную инфекцию» на нашем сайте.

Разрешающим фактором может служить не только повторное попадание в организм туберкулёзной палочки, но и любое биологически значимое воздействие, напр. интеркурентная инфекция (ангина, ОРЗ), влажный холод, роды, травма, стресс и др., читайте «Кое что об аллергии» на нашем сайте. Излечение от интеркурентной инфекции не приводит к излечению от возникшей инфекционно-аллергической болезни (нефрита, бронхиальной астмы, полиартрита и др.). В таких случаях поможет только специфическое лечение против инфекции, вызвавшей сенсибилизацию, т.е. туберкулёзной микобактерии.

В больницу попадают сенсибилизированные люди после воздействия РАЗРЕШАЮЩЕГО ФАКТОРА с возникшей аллергической РЕАКЦИЕЙ, то есть с более или менее тяжелыми инфекционно-аллергическими заболеваниями, такими, как ГЛОМЕРУЛОНЕФРИТ, ПОЛИАРТРИТ, ПЛЕВРИТ, ПОЛИСЕРОЗИТ, МИОКАРДИТ, БРОНХИАЛЬНАЯ АСТМА, ПОЛИНЕВРИТЫ, БОЛЕЗНИ КРОВИ, СЕРДЦА, СОСУДОВ, ГЛАЗ, КОЖИ, МОЧЕПОЛОВОЙ СИСТЕМЫ и многими другими. Чаще всего это больные уже хронические, безуспешно леченные, часто с имеющимся указанием на микробный аллерген в анамнезе (положительная реакция Манту в детском саду, в школе, при поступлении на работу, при проф. осмотрах и т.п.). Нужно иметь в виду, что туберкулёзная сенсибилизация очень стойкая, не исчезает со временем и прямо указывает на туберкулёзную палочку, как на возможную причину текущей болезни.

Нас, терапевтов общего профиля, должен интересовать начальный, аллергический, «ДО-ДИСПАНСЕРНЫЙ» период туберкулёза, когда сенсибилизация велика, а первичный очаг инфекции явно незаметен, ничем не проявляет себя, кроме сенсибилизации.

В нашей эпидемиологической ситуации на Земле и в стране каждую инфекционно-аллергическую болезнь надо примерять на туберкулёз. Если человек страдает какой либо инфекционно-аллергической болезнью и она плохо поддаётся обычному лечению, то наличие положительной туберкулиновой пробы любой интенсивности служит, в большинстве случаев, указанием на туберкулёзную палочку, как на возможную причину этой болезни.
Высокая специфичность туберкулиновых проб в настоящее время не вызывает сомнения, но отсутствие прямой зависимости между их интенсивностью и активностью туберкулёзного процесса в ЛЁГКИХ приводит фтизиатров (как правило — пульмонологов) к умалению роли этого теста (Е.А. Гинзбург 1964). Терапевтов, напротив, должна более интересовать интенсивность сенсибилизации, независимо от наличия выявленного (обычно ищут только в лёгких) первичного очага инфекции, и поэтому туберкулиновые пробы в терапевтической практике имеют большую ценность (см. «Маски туберкулёза» на нашем сайте). Чаще всего очаг находится в лимфатической железе.

Кожная реакция зараженного (не только больного !) туберкулёзом организма на туберкулин выражает аллергическую перестройку не только кожи, но и всех других органов и тканей, что доказали в экспериментах Ю.К.Вейсфеллер и Zinsser. Ю.К.Вейсфеллеру удалось еще в 1937 году убедительно доказать, что аллергическая реакция при туберкулёзе НЕ ЯВЛЯЕТСЯ РЕАКЦИЕЙ АНТИГЕН — АНТИТЕЛО. Полисахариды микробной клетки могут вызвать образование некоторого количества антител в сыворотке крови, но они не обладают сенсибилизирующими свойствами и не участвуют в формировании иммунитета.

Весьма важная роль в патогенезе аллергической реакции организма при туберкулёзе принадлежит нервной системе, что неоднократно было доказано как в экспериментах на животных, так и в клинике (А.Д.Сперанский, Л.М.Модель, Р.О.Драбкина, М.Р.Борок, В.А.Равич-Щербо, В.Л.Эйнис, М.Г.Иванова, А.Е.Рабухин, Moro). А.Е.Рабухин [6] подчеркивает тот факт, что после перерезки или резекции n.femоrale sapheni ischiadici, а также в результате периартериальной симпатэктомии конечности кролика, не удаётся вызвать у него кожных туберкулиновых реакций на соответствующей стороне, между тем, как на противоположной они хорошо выражены. Таким образом, ведущая роль нервной системы в генезе иммунитета и реакции Манту не подлежит сомнению.

Наша нервная система (мозг) первая замечает появление нежелательной инфекции в организме и защищает его нормальную деятельность, повышая порог чувствительности к этой инфекции клеток и органов. Таким образом, регулируя обменные процессы в организме, нервная система длительно может сохранять при этом функцию всех органов на уровне «практически здоров», то есть толерантность к этой инфекции. По реакции на туберкулин (т.е. туберкулиновые пробы) мы в какой-то степени можем судить о близости этого порога.

Действие раздражителя из очага воспаления воспринимается рецепторами в тканях и трансформируется в частоту импульсов, идущих в ЦНС. Между частотой поступающих импульсов и ответной реакцией органа или ткани имеется строго определённая зависимость. До тех пор, пока мозг в состоянии усваивать ритм падающих на него с периферии импульсов, его ответная, организующая защиту реакция будет адекватной, соответствующей ритму и силе раздражителя. В тех случаях, когда частота приложения раздражителя или его сила, длительность превышает функциональную подвижность органа или ткани (в первую очередь — нервной системы), наступает извращение иммунной реакции и ответ становится не адекватным, а уравнительным или парадоксальным (Н.Е.Введенский,1935). В тяжелых случаях — отрицательным (отрицательная анэргия).

Именно это положение использовал Н.А. Шмелёв [12], предложив при туберкулиновых пробах с различными разведениями туберкулина учитывать фазность кожной аллергической реакции на туберкулин (адекватную, уравнительную и парадоксальную фазы), так как аллергическая реакция больного туберкулёзом зависит от ФАЗОВЫХ СОСТОЯНИЙ ЕГО НЕРВНОЙ СИСТЕМЫ в борьбе с данной инфекцией. При сохранённых силах к сопротивлению, защите организма, ответная реакция будет адекватной, то есть соответствующей проценту концетрации туберкулина в пробе. В тяжелых случаях интенсивность кожной реакции на градуированные пробы может быть небольшой, а при уравнительном или парадоксальном варианте ответа часто — малой. Одиночные пробы в таких случаях слабо положительны или отрицательны. При улучшении состояния организма (напр. при лечении) интенсивность каждого ответа усиливается и фазы ответа наблюдаются в обратном порядке.

Кроме того, реакция на туберкулиновые пробы различается по степени сенсибилизации отдельных органов и организма в целом как местная (в месте введения, на коже), общая (самочувствие, температура, АД) и очаговая (реакция больного органа). В быту ОБЩУЮ и ОЧАГОВУЮ реакции часто называют «аллергией на туберкулин» (более подробно читай «О прививке БЦЖ» на нашем сайте). Особенно важную роль реакция Манту приобретает в случаях, когда ребёнок длительно «киснет» по непонятной причине (см. «Аллергическая фаза пеавичного туберкулёза»). Обострение болезненных симптомов через 48 (24-72) часов после постановки пробы Манту прямо указывает на туберкулёзную природу его болезни. Наиболее интенсивно отзывается уже заболевший орган или система (см. «О прививке БЦЖ» на нашем сайте).

Таким образом, реакция на туберкулин, как и на другие микробные аллергены, осуществляется через нервную систему и характеризует состояние защитных сил организма против ДАННОЙ конкретной инфекции [12]. Однако, при чрезмерной сенсибилизации превышаются возможности нервных механизмов защиты и становится возможным возникновение инфекционно-аллергических реакций, т.е. аллергических болезней (см. «Аллергическая фаза первичного туберкулёза» на нашем сайте).

Повторное или первичное поступление в организм больших доз ВЫСОКО ВИРУЛЕНТНОЙ туберкулёзной микобактерии ведёт к появлению типичных, КЛАССИЧЕСКИХ форм деструктивного туберкулёза и образованию «первичного очага», чаще всего — в лёгких. В таких случаях больной попадает сразу к фтизиатрам с установленным диагнозом туберкулёза.

Повторное поступление «ослабленной» [40], мало -вирулентной или L-форм туберкулёзной микобактерии ведёт к появлению иной, ВОСПАЛИТЕЛЬНОЙ ПАРАСПЕЦИФИЧЕСКОЙ, то есть «аллергической» формы туберкулёза. Она может проявляться в виде инфекционной аллергии. Такие больные попадают к нам, терапевтам общего профиля в виде не распознанных масок туберкулёза. См. «Маски туберкулёза» на нашем сайте.

При инфекционно-аллергических заболеваниях адекватный результат туберкулиновой пробы свидетельствует о сохраняющихся силах организма, его нервной системы, бороться с этой инфекцией. Уравнительный или парадоксальный ответ на градуированные туберкулиновые пробы (Пирке, Манту) указывает не только на туберкулёзное происхождение текущей болезни, но и на значительную её давность. Такой характер реакций свидетельствует также об «усталости», заторможенности защитных систем в борьбе с этой, уже ставшей хронической, болезнью [12,37]. В таких случаях общеукрепляющего лечения уже недостаточно, необходимы специфические противотуберкулёзные препараты и длительное лечение.

Туберкулёзная аллергическая реакция.(болезнь) наступает через 48 (24-72) часов после воздействия разрешающего фактора, иногда и через 5-6 дней, что соответствует теоретическим её срокам. При острых формах уже текущей болезни реакция может наступить много раньше, через 24 часа и даже после 6 часов (по Пиркет).
При наличии туберкулёзной аллергии («интоксикации»), протекающей явно или скрыто, РАЗРЕШАЮЩИМ ФАКТОРОМ могут стать:

Наиболее ярко туберкулёзная аллергия проявляется при первичном туберкулёзе. Термин «первичный» туберкулёз не определяет давность инфицирования, а лишь подчеркивает его клинические особенности, а именно склонность к локализации в основном в лимфатических узлах. Хронический первичный туберкулёз встречается чаще, чем острый и у взрослых чаще, чем у детей [6]. Практическое применение туберкулин-диагностики в терапевтической клинике подробно описано при нефрите [7] и, кратко — на нашем сайте в статье «Гломерулонефрит как проявление первичного туберкулёза», там же приведены результаты противотуберкулёзного лечения в тяжелых случаях и важность его длительного применения после исчезновения видимых симптомов болезни.

Начало аллергической болезни не всегда острое, нередко сначала заметны отдельные симптомы, которые относительно быстро формируют полную картину одной из инфекционно-аллергических болезней, на первый взгляд не связанных с туберкулёзом (заболевает тот орган, который был сильнее сенсибилизирован). В лёгких первичный очаг при этой форме туберкулёза обычно не формируется, в бронхиальных лимфоузлах можно заметить признаки воспаления.
Морфологически возникший очаг носит характер параспецифического туберкулёзного воспаления [5] по Струкову — без «бугорков» и без «палочек».

Если сенсибилизация не очень велика, а организм крепок, то возникшая аллергическая реакция, т.е. инфекционно-аллергическая болезнь, угаснет, излечится под защитой собственного врожденного иммунитета и общеукрепляющего лечения без специфической противотуберкулёзной помощи. Если же сенсибилизация велика и (или) разрешающий фактор биологически весьма значителен и ослабляет организм, то в большом проценте случаев эта возникшая аллергическая болезнь становится стойкой, плохо поддаётся обычному симптоматическому и общеукрепляющему лечению. В этот период затянувшейся болезни, даже при переходе её в хроническую, специфическое противотуберкулёзное лечение оказывает очень хороший эффект. Нужно лечиться непременно несколькими, не менее, чем тремя противотуберкулёзными препаратами одновременно, месяцами, без перерыва, до выздоровления. Достигается этот эффект несравненно легче, чем при классических, привычных деструктивных формах туберкулёза, напр. лёгких. Читайте «Гломерулонефрит как инфекционная аллергия» на нашем сайте.

Мы убедились, что при специфическом противотуберкулёзном лечении даже СНИЖЕНИЕ ИНТЕНСИВНОСТИ туберкулёзной сенсибилизации, а не полное её уничтожение, может давать хороший лечебный эффект при болезнях, возникших на фоне туберкулёзной аллергии. После излечения болезни проба Манту остаётся положительной.

Относительно полноценного лечения одновременно несколькими противотуберкулёзными препаратами хорошо бы посоветоваться с фтизиатрами, но они в нашем случае находятся в затруднительном положении: у вас нет выявленного классического очага туберкулёза, значит вы, как бы, «не их» больной. НО убедить их можно, пробное лечение входит в арсенал фтизиатрии [6].

Активными (источниками инфекции) могут быть даже кальцинаты, хорошо инкапсулированные очаги в лимфоузлах и лёгких. Такие благополучные, на взгляд рентгенологов «в пределах нормы», очаги являются собственным источником туберкулёзной сенсибилизации, которая в той или иной степени определяется не только у больных, но и у большинства практически здорового населения. По-видимому, эта массовость и повлекла за собой оценку туберкулёзной аллергии у взрослых, как нормального явления [28].

Академик А.Е. Рабухин еще в 1960г. писал, что «Туберкулёз характеризуется большим полиморфизмом как специфических, так и неспецифических повреждений различных органов и систем. Диапазон этих изменений значительно превосходит находки патологоанатомов прошлого и настоящего столетия. Обусловленные единой этиологической причиной, они, тем не менее, приобретают различный характер в зависимости от реактивности организма, массивности и вирулентности инфекции, влияния внешней среды и тех или иных лечебных факторов» [15].

ГДЕ ПРЯЧЕТСЯ ХРОНИЧЕСКАЯ ПЕРВИЧНАЯ ТУБЕРКУЛЁЗНАЯ ИНФЕКЦИЯ?

Насколько устойчив источник туберкулёзной сенсибилизации и где он находится у «практически здоровых» людей?

Высокая специфическая сенсибилизация свойственна первичному туберкулёзу. Термин «первичный туберкулёз» не определяет давность инфицирования, а лишь подчеркивает тип поражения и присущие ему тенденции развития [16]. Поражение лимфатических узлов является преобладающим, а иногда и единственным специфическим проявлением первичного туберкулёза у взрослых. Хронический первичный туберкулёз встречается чаще, чем острый [6]. Очень часто он протекает латентно.

Хронический первичный туберкулёзный процесс может протекать с минимально заметными специфическими очагами. Этими очагами обычно являются лимфатические узлы, один или несколько. На периферии они легко определяются (в норме они прощупываться не должны) на шее, подмышками, в паху, обычно безболезненные, различной плотности, в корнях лёгких, в мезентериальных железах. Они могут возникнуть первично, БЕЗ НАЛИЧИЯ ЛЁГОЧНОГО ПРОЦЕССА. Возникшие в корнях лёгких определяются на рентгене при множественном поражении (бронхаденит), в мезентериальных лимфоузлах (мезаденит) не определяются ни рентгеном, ни УЗИ, ни компьютерной томографией, их начинают выявлять лишь при обызвествлении или значительном уплотнении, но это случается очень поздно и редко. Такие лимфоузлы в большинстве случаев не склонны к казеозному расплавлению, а заживая, постепенно рассасываются или уплотняются, рентгенологи иногда принимают их за петрификаты. Такие «петрификаты» нередко рассасываются при настойчивом специфическом лечении. Выявляются они обычно поздно, после клинического излечения болезни и значительного уплотнения или, чаще, патологоанатомом на аутопсии при направленных поисках.

Таким образом, можно утверждать, что эта инфекция при хроническом первичном процессе чаще и надёжнее всего прячется в одном или нескольких лимфатических узлах. Эти узлы могут быть региональными по отношению к входным воротам инфекции, но могут быть и отдалёнными. В лимфоузлах корней лёгких её иногда находят рентгенологи, а в мезентериальных или забрюшинных – нет. Пока болезнь находится на стадии лимфаденита (воспалительный процесс), этот лимфатический узел относительно мало меняется по величине и плотности, он проявляет своё присутствие наличием реакции организма на туберкулиновые тесты. Наши приборы отличают его при значительном увеличении и уплотнении, или если в нём появляются специфические изменения, то есть творожистый некроз, кальцинация, тогда резко меняется величина и плотность, но это будет уже другая болезнь, не туберкулёзный лимфаденит (воспалительный процесс), а туберкулёз лимфатического узла (деструктивный процесс).

Первичный очаг или очажок, образовавшийся в железе после заражения туберкулёзом, очень стоек. При хороших условиях жизни, тем более при специфическом противотуберкулёзном лечении воспалительный инфильтрат в нём либо рассасывается и железа приобретает нормальный размер и плотность, либо заживление идёт уплотнением,замещением рубцовой тканью. Очажок в ткани как лимфоузла. так и лёгких у взрослых часто может протекать скрыто, латентно и заканчиваться самоизлечением, рассасыванием. Возникшая сенсибилизация сохраняется после излечения от болезни обычно всю оставшуюся жизнь.

Различие в тысячи раз между цифрами инфицированных и заболевших туберкулёзом показывает насколько крепок у нас врождённый иммунитет и сколько сенсибилизированных, но практически здоровых людей находятся постоянно в группе риска возникновения инфекционно-аллергических заболеваний. Возникшие на этом фоне туберкулёзной аллергии заболевания, например гломерулонефрит, теоретически должны иметь морфологическую картину воспалительных туберкулёзных тканевых изменений, характерных для первичного туберкулёза, описанных Струковым и Серовым [5]. В моей практике эта догадка полностью подтвердилась [7]. См. «Гломерулонефрит как проявление туберкулёза» на нашем сайте.

ТУБЕРКУЛИН Аллерген туберкулезный амп.50 ЕД №5

Назначение:

препарат предназначен для массовой туберкулинодиагностики.
Применяют для постановки внутрикожной пробы Манту.

Инструкция по применению.

Аллерген туберкулезный очищенный в стандартном разведении (очищенный туберкулин в стандартном разведении), раствор для внутрикожного введения.

Очищенный туберкулин в стандартном разведении представляет собой смесь фильтратов убитых нагреванием культур микобактерий туберкулеза человеческого и бычьего видов, очищенных путем ультрафильтрации, осажденных трихлоруксусной кислотой, обработанных этиловым спиртом и эфиром для наркоза, растворенную в стабилизирующем растворителе. Одна доза (0,1 мл) препарата содержит: активное вещество — аллерген туберкулопротеин — 2 ТЕ (туберкулиновые единицы); вспомогательные вещества — натрия гидрофосфата гептагидрат — 0,783 мг, натрия хлорид — 0,457 мг, калия дигидрофосфат — 0,063 мг, полисорбат — 80 (стабилизатор) — 0,005 мг, фенол (консервант) — 0,25 мг.

Препарат имеет вид бесцветной прозрачной жидкости, не содержащей осадка и посторонних примесей.

Фармакотерапевтическая группа.

Код АТХ. V01АА20.

Биологические и иммунологические свойства.

Активное вещество препарата аллерген – туберкулопротеин, вызывает при постановке внутрикожной туберкулиновой пробы у инфицированных или вакцинированных лиц специфическую реакцию гиперчувствительности замедленного типа в виде местной реакции — гиперемии и инфильтрата (папулы).

Назначение.

Препарат предназначен для массовой туберкулинодиагностики:

  • отбор лиц для ревакцинации БЦЖ, а также перед первичной вакцинацией детей в возрасте 2 мес и более;
  • диагностика туберкулеза, в там числе для раннего выявления начальных и локальных форм туберкулеза у детей и подростков;
  • определение инфицирования микобактериями туберкулеза.

Способ применения и дозировка.

Применяют для постановки внутрикожной пробы Манту. Препарат вводят строго внутрикожно. Пробу Манту ставят пациентам обязательно в положении сидя, т.к. у эмоционально лабильных лиц инъекция может стать причиной обморока. Для проведения внутрикожной пробы применяют однограммовые туберкулиновые шприцы разового использования с короткими тонкими иглами.

Запрещается применять для пробы Манту шприцы и иглы с истекшим сроком годности, инсулиновые шприцы.

Ампулу с препаратом тщательно обтирают марлей, смоченной 70° этиловым спиртом, затем шейку ампулы подпиливают ампульным ножом и отламывают. В шприц с иглой № 0845 набирают 0,2 мл, т. е. 2 дозы туберкулина, насаживают тонкую иглу, выпускают раствор до метки 0,1 мл в стерильный ватный тампон. Ампулу после вскрытия допускается хранить в асептических условиях не более 2 ч.

На внутренней поверхности средней трети предплечья участок кожи обрабатывают 70° этиловым спиртом и просушивают стерильной ватой. Медработник левой рукой фиксирует снизу кожу предплечья пациента так, чтобы на внутренней поверхности она была натянута. Тонкую иглу срезом вверх вводят в верхние слои кожи параллельно ее поверхности — внутрикожно. После введения иглы в кожу из шприца вводят строго по делению шкалы 0,1 мл препарата, т.е. 1 дозу (2 ТЕ). При правильной технике введения в коже образуется папула беловатого цвета в виде «лимонной корочки», размером 7 — 10 мм, в диаметре. Для каждого обследуемого употребляют отдельный стерильный шприц и иглу.

Пробу Манту ставит по назначению врача специально обученная медсестра, имеющая документ — допуск к проведению туберкулинодиагностики.

Учет результатов.

Результаты туберкулиновой пробы оценивает врач или специально обученная медсестра. Результат пробы Манту оценивают через 72 ч путем измерения размера инфильтрата (папулы) в мм. Прозрачной линейкой с миллиметровыми делениями измеряют и регистрируют поперечный (по отношению к оси предплечья) размер инфильтрата. Гиперемию учитывают только в случае отсутствия инфильтрата. Ответная реакция на пробу Манту считается:

  • отрицательной — при полном отсутствии инфильтрата (папулы) и гиперемии или при наличии уколочной реакции (до 1 мм);
  • сомнительной — при инфильтрате размером (2-4 мм) или только гиперемии любого размера без инфильтрата;
  • положительной — при наличии инфильтрата диаметром 5 мм и более;
  • гиперергической — у детей и подростков реакция с диаметром инфильтрата 17 мм и более, у взрослых — 21 мм и более, а также везикулонекротические реакции независимо от размера инфильтрата с лимфангоитом или без него.

Реакция на введение туберкулина.

Реакция гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ) зависит от уровня специфической реактивности организма. Пик ГЗТ наступает через 48-72 ч, к этому времени проявление местной реакции немедленного типа (гиперемия), исчезает.

Противопоказания для постановки туберкулиновой пробы:

Распространенные кожные заболевания, острые, хронические инфекционные и соматические заболевания в период обострения; аллергические состояния (ревматизм в острой и подострой фазах, бронхиальная астма, идиосинкразии с выраженными кожными проявлениями в период обострения), эпилепсия. Проба Манту ставится через 1 мес после исчезновения всех клинических симптомов или сразу после снятия карантина. Не допускается проведение пробы Манту в тех детских коллективах, где имеется карантин по детским инфекциям. Профилактические прививки могут повлиять на чувствительность к туберкулину. Исходя из этого, туберкулинодиагностику необходимо планировать до проведения профилактических прививок против различных инфекций. В случае, если профилактическая прививка была проведена, то туберкулинодиагностика должна осуществляться не ранее, чем через 1 мес после прививки.

С целью выявления противопоказаний врач (медицинская сестра) в день постановки туберкулиновых проб проводят опрос и осмотр лиц, подлежащих пробе.

Побочное действие.

Иногда отмечается недомогание, головная боль, повышение температуры тела. У отдельных лиц, с высокой степенью ГЗТ к туберкулину местная реакция может сопровождаться лимфаденитом.

Взаимодействие с другими лекарственными препаратами.

Здоровым лицам с сомнительной или положительной реакцией на пробу Манту и детям с отрицательной реакцией на туберкулин, но не подлежащим вакцинации БЦЖ, все профилактические прививки можно проводить непосредственно после оценки результатов пробы Манту.

Форма выпуска.

В ампулах по 3 мл (30 доз), 2 мл (20 доз), 1 мл (10 доз). 1 доза препарата составляет 2 ТЕ в 0,1 мл.

10 ампул в картонной коробке или пачке из картона с инструкцией по применению, ампульным ножом или скарификатором ампульным.

Срок годности.

Срок годности 1 год. Препарат с истекшим сроком годности применению не подлежит.

Очищенный туберкулезный аллерген для проведения реакции Манту

Выбор эффективного препарата для проведения реакции Манту является важным аспектом диагностики заболевания, вызываемого палочкой Коха. Аллерген туберкулёзный очищенный в стандартном разведении – это одно из наиболее распространённых средств в данном случае. Для того чтобы разобраться в целесообразности его применения, стоит изучить механизм действия препарата, иммунологические и биологические свойства, основные противопоказания, а также возможные побочные эффекты.

Понятие о средстве

Туберкулёзный аллерген является смесью белков убитых посредством температурного воздействия на культуры возбудителя нескольких штаммов. Средство очищено при помощи фильтрации, хлоруксусной кислоты, обработки этиловым спиртом, стабилизирующего растворителя, а также наркозного эфира. Одна доза средства составляет 0,1 мл препарата и содержит в своём составе две туберкулиновые единицы белковой вытяжки умерших микобактерий, а также вспомогательные вещества.

Форма выпуска средства – ампула, каждая из которых содержит 3 мл средства. Оно предназначено для проведения массовой туберкулиновой диагностики путём введения препарата внутрь кожи. Препарат не имеет цвета и не содержит в себе осадочных и посторонних факторов.

Главным активным веществом средства является туберкулин. При проведении противотуберкулёзного обследования у детей, которые подверглись инфицированию или вакцинации, он способен вызывать воспалительные процессы в виде развития покраснений и уплотнения.

Рекомбинантный очищенный туберкулёзный предназначен не только для обнаружения людей, поражённых палочками Коха.

Он также используется при наличии определённых факторов:

  • ревакцинация БЦЖ по истечении срока действия препарата, который наступает каждые 6-7 лет;
  • первичное введение противотуберкулёзных прививок детям от двух месяцев;
  • своевременное обнаружение очагов инфекции для предотвращения заражения других людей, а также для сохранения здоровья ребёнку.

Препарат используется массово при выполнении реакции Манту во всех учебных заведениях в начале учебного года, обычно в сентябре.

Также провести процедуру можно индивидуально при наличии подозрений на туберкулёз или дифференциальной диагностике с другими инфекционными заболеваниями дыхательной системы.

Нюансы применения, оценка результатов

Очищенный туберкулёзный аллерген применяется для проведения внутрикожной реакции Манту. Средство разрешается вводить только этим путём, поскольку в других случаях оно может вызывать различные побочные эффекты, которые опасны для здоровья ребёнка. Проводить процедуру обязательно нужно в сидячем положении, поскольку эмоционально лабильные дети могут упасть в обморок.

При проведении противотуберкулёзной диагностики с использованием туберкулиновых препаратов используются специальные однограммовые шприцы для разового применения, которые имеют короткие тонкие иглы. Нельзя осуществлять реакцию Манту при помощи приборов с истекшим сроком годности, а также инсулиновыми шприцами.

Перед использованием ампулу с аллергеном нужно тщательно обтереть при помощи марли, которая смочена в 70% растворе этилового спирта. После этого от шейки сосуда избавляются при помощи специального ампульного ножа. В туберкулиновый шприц с иглой №0845 набирается 0,2 мл туберкулёзного аллергена, что составляет две одиночных дозировки, а потом выпускают содержимое до 0,1 мл в кусок ваты. Хранение ампулы после того, как она была вскрыта, допустимо в асептической среде не более 3 часов.

Препарат вводится в область средней трети предплечья. Перед этим участок кожных покровов обрабатывается при помощи 70% этилового спирта и просушивается ватным тампоном. Врач производит фиксацию кожи ребёнка двумя пальцами. Игла вводится срезом кверху параллельно поверхности кожных покровов. После этого из шприца вводится 0,1 мл очищенного аллергена туберкулёзного, что составляет 2 туберкулиновые единицы. При правильном введении на коже образуется уплотнение белого оттенка, которое напоминает лимонную корочку, размером 4-5 мм в радиусе.

Реакция Манту ставится специально обученным человеком, который имеет документ, подтверждающий квалификацию по проведению туберкулиновой диагностики.

Оценкой результатов должен заниматься исключительно врач. Это происходит путём измерения размера уплотнения спустя трое суток при помощи прозрачной линейки с точной градуировкой. Регистрируется диаметринфильтрата. Покраснения учитываются в случаях отсутствия уплотнений.

Туберкулиновая проба может иметь несколько результатов:

  1. Отрицательный. При этом папула и покраснения отсутствуют. Возможно присутствие реакции на укол, размер которой не превышает 1 мм.
  2. Сомнительный. В этом случае наблюдается уплотнение диаметром 3-5 мм или покраснения различных размеров без присутствия инфильтратов. При наличии этого результата врач может провести пробу Манту повторно для получения более конкретного ответа.
  3. Положительный. Наличие данного результата говорит о том, что размер папулы более 5 мм. Это свидетельствует о контакте организма ребёнка с микобактериями возбудителя. Для подтверждения диагностики могут использоваться дополнительные методы исследования, на основании которых ставится диагноз.
  4. Гиперэргический. Диаметр инфильтрата у детей в этом случае больше 15 мм, а у взрослых – более 21 мм. При этом наблюдаются везикулярные некротические процессы вместе с лимфангоитом, наличие которых не зависит от размера папулы.

Реакции на попадание очищенного туберкулёзного антигена в организм ребёнка относится к процессам гиперчувствительности замедленного типа. Пик процессов наблюдаетсяспустя 2-3 дня. После этого клинические признаки местных проявлений исчезают.

Проводить пробу Манту может только опытный специалист при наличии соответствующих условий. Это поможет сделать противотуберкулёзную диагностику комфортной и безопасной для здоровья ребёнка.

Противопоказания, побочные эффекты при исследовании

К ним относятся:

  • острые инфекционные болезни;
  • хронические патологии в стадии обострения;
  • соматические заболевания;
  • наличие аллергических процессов;
  • индивидуальная непереносимость компонентов препарата;
  • бронхиальная астма;
  • ревматизм;
  • эпилептический анамнез.

Проведение туберкулиновой реакции разрешается спустя один месяц после устранения всей клинической картины заболеваний. Не разрешается использование туберкулиновой реакции в учебных заведениях, где введён карантин при инфекционных заболеваниях. Введение профилактических прививок также может негативно сказаться на чувствительности организма к действующему веществу препарата.

Диагностику против туберкулёза стоит планировать до проведения вакцинации к различным заболеваниям. В ситуациях, когда профилактическое введение прививок было осуществлено, проба Манту переносится не менее чем на месяц.

Для выявления наличия противопоказания врач перед постановкой реакции проводит сбор анамнеза у детей, которые подлежат пробе. Это даст возможность избежать тяжёлых последствий.

Введение очищенного туберкулёзного аллергена может сопровождаться развитием побочных эффектов. Среди них наиболее распространёнными являются общая слабость, мигрени, головокружения, повышение температуры до 38 и более градусов по Цельсию. У некоторых исследуемых с повышенным уровнем ГЗТ к очищенной инъекции аллергена может быть в комплексе с лимфаденитом.

Детям, которые после проведения реакции Манту получили отрицательный результат, разрешается введение профилактических вакцинспустя суткипосле оценки полученных результатов. В ином случае нужно выждать определённое время, которое обычно составляет от 4 до 6 недель.

Цена препарата варьируется от 500 до 1500 рублей в зависимости от того, какой у него производитель. Поскольку препарат относится к группе ЖНВЛП, то купить его можно во всех аптеках по предварительному заказу. В каждой пачке с ампулами находится инструкция по правилам использования и хранения.

Чтобы предотвратить развитие осложнений, нужно придерживаться всех правил хранения препарата и проведения пробы. Это поможет сделать противотуберкулёзную диагностику с использованием очищенного туберкулёзного антигена комфортно и безопасной для здоровья ребёнка.

Аллерген туберкулезный очищенный жидкий (Allergenum tuberculosum depuratum fluidum)

Наименование: Аллерген туберкулезный очищенный жидкий (Allergenum tuberculosum depuratum fluidum)

Наименование

Аллерген туберкулезный очищенный жидкий (Allergenum tuberculosum depuratum fluidum)

Фармакологическое действие

Аллерген туберкулезный очищенный жидкий в стандартном разведении содержит аллерген туберкулопротеин, который вызывает развитие у инфицированных или вакцинированных людей специфическую реакцию при проведении внутрикожной пробы.

Показания к применению

Аллерген туберкулезный очищенный жидкий в стандартном разведении используют для проведения внутрикожной туберкулиновой пробы Манту, например при отборе пациентов для ревакцинации БЦЖ и для определения наличия туберкулеза у людей различного возраста.

Способ применения

Перед проведением инъекции лекарства Аллерген туберкулезный очищенный жидкий в стандартном разведении нужно проведение медицинского осмотра с целью выявления возможных противопоказаний.
0,2мл раствора вводят внутрикожно (по Манту) в асептических условиях.
Препарат Аллерген туберкулезный очищенный жидкий в стандартном разведении используют только в медицинских учреждениях, проводить инъекцию и оценивать результаты пробы должен только квалифицированный специалист.

Побочные действия

При отсутствии состояния специфической реактивности не отмечается развития общих и местных нежелательных явлений (отрицательная реакция на туберкулин).
При поствакцинальной аллергии или инфицировании отмечается развитие местной реакции в виде инфильтрата и гиперемии. У пациентов с высокой степенью аллергии местные реакции могут сопровождаться развитием лимфангоитов и лимфаденитов.
Кроме того, при использовании лекарства Аллерген туберкулезный очищенный жидкий в стандартном разведении для внутрикожного применения вероятно развитие боли в месте введения, слабости, гипертермии, головной боли, кожных аллергических реакций и анафилактического шока.

Противопоказания

Нельзя проведение пробы Манту при таких состояниях (а также в течение 1 месяца после исчезновения симптомов, перечисленных заболеваний):
— хронические соматические и инфекционные заболевания в период обострения, острые инфекционные и соматические заболевания;
— дерматологические заболевания, различной этиологии и локализации;
— аллергические заболевания, в том числе идиосинкразия с выраженными дерматологическими проявлениями, острая и подострая фаза ревматизма, бронхиальная астма;
— эпилепсия.
Не надлежит проводить пробу Манту при наличии карантина по инфекционным заболеваниям в детском коллективе, а также в течение месяца после окончания карантина.

Взаимодействие с другими лекарственными средствами

Не надлежит проводить пробу Манту в течение 1 месяца до или после проведения профилактической прививки.
Проведение плановой вакцинации разрешается не раньше, чем через 72 часа после проведения пробы Манту.

Передозировка

Сообщений о передозировке лекарства Аллерген туберкулезный очищенный жидкий в стандартном разведении для внутрикожного применения не поступало.

Форма выпуска

Раствор для внутрикожного введения по 10 или 30 доз в ампулах, по 10 ампул в картонной пачке.
Раствор для внутрикожного введения по 1мл в ампуле, в картонной пачке 1 ампула в комплекте с 5 стерильными шприцами и 5 иглами.

Условия хранения

Раствор для внутрикожных инъекций годен в течение 1 года при условии хранения в помещениях с температурой от 2 до 8 градусов Цельсия.
Вскрытую ампулу разрешается хранить в течение 2 часов в асептических условиях при температуре от 2 до 8 градусов Цельсия.
Нельзя замораживать и нагревать раствор.
Не надлежит применять препарат при повреждении упаковки во время хранения или при несоблюдении условий хранения.

Состав

1мл (10 доз) лекарства Аллерген туберкулезный очищенный жидкий в стандартном разведении для внутрикожного применения содержит:
Аллергена туберкулопротеина – 20 туберкулиновых единиц;
Дополнительные ингредиенты.
1 дозировка лекарства содержит 2 туберкулиновые единицы.

Предупреждение туберкулеза с помощью очищенного аллергена

Современный подход к предупреждению и лечению туберкулеза предполагает проведение профилактических мер в виде вакцинации БЦЖ и использования пробы Манту.

В последнем случае при ежегодных обследованиях пациентов применяют аллерген туберкулезный очищенный в стандартном разведении.

Этот препарат, представляющий собой жидкий прозрачный раствор, имеет в своем составе культуру убитых нагреванием бактерий туберкулеза, обработанных эфиром и этиловым спиртом. Выпускается в ампулах с разной дозировкой туберкулопротеина.

Используя действующее начало туберкулина, препарат применяют перед введением прививки от туберкулеза и при ревакцинации от данного заболевания. Данный аллерген является эффективным для диагностики и выявления туберкулеза на ранних стадиях у детей от 2 месяцев, подростков и взрослых пациентов.

Инструкция по использованию туберкулина

Препарат за счет наличия в нем аллергена туберкулина провоцирует при подкожном введении специфическую реакцию организма в виде появления гиперемии (замедленный вариант реакции) или появлении инфильтрата (гиперчувствительность к туберкулопротеину). Проводить пробу Манту, вводить очищенный туберкулезный аллерген и оценивать результаты можно исключительно в медицинских учреждениях. Методика проведения пробы отличается для взрослых пациентов и детей.

Правила проведения туберкулинодиагностики у детей и подростков:

  1. Если ребенок получил прививку от туберкулеза в роддоме, оценивать его иммунную систему можно спустя год после вакцинации БЦЖ.
  2. Пробу делают в один и тот же период ежегодно до достижения пациентом 14-летия.
  3. В день, когда выполняется проба Манту, не делают никаких других прививок.
  4. Диагностике предшествует общий осмотр педиатра, направленный на то, чтобы исключить противопоказания для проведения Манту.

Препарат вводят внутрикожно (0,2 мл. очищенного раствора) во внутреннюю сторону предплечья. За местом инъекции требуется уход:

  • Запрещено смачивать зону водой, наносить любые мази или крем.
  • Не позволительно заклеивать папулу пластырем.
  • Нельзя расчесывать гиперемированную зону.
  • Чтобы результаты были достоверными, следует исключить продукты аллергены из рациона.

Туберкулинодиагностика у взрослых

Проба Манту проводится у всего взрослого населения ежегодно, а также перед введением вакцины от туберкулеза. Используют препарат в дозе 0,2 мл очищенного туберкулина, который вводят внутрикожно в нижнюю треть предплечья с внутренней стороны.

Обязательной диагностика является для первично инфицированных больных, что позволяет выявить пациентов с локальной формой заболевания и предупредить его распространение.

Оценка результатов диагностики

После того, как был введен аллерген туберкулезный, фиксируют такие результаты:

  • Отсутствие любой реакции.
  • Сомнительная реакция (гиперемия 2-4 мм.).
  • Положительный результат – папула размером 5 мм и более.
  • Выраженная реакция – гиперемия 15 мм.
  • Гипераллергическая реакция – инфильтрат больше 16 мм. у детей и 20 мм. у взрослых.

Реакции на прививки Манту

При отсутствии реакции не наблюдается изменения в самочувствии пациента. При гиперреакции возможно повышение температуры тела, появлении слабости, головной боли. Окончательная постановка диагноза осуществляется в специализированных диспансерах.

Условия хранения аллергена туберкулезного очищенного:

Препарат выпускают в ампулах 1 -3 мл., в коробках по 10 шт. Срок годности – 12 месяцев при условии хранения в темном месте (холодильнике) и температуре плюс 2 — 8 градусов по Цельсию.

Проба Манту и прочая туберкулинодиагностика

Туберкулинодиагностику применяют при обследовании населения на туберкулез. Положительная реакция на введение туберкулина бывает только у инфицированных микобактериями туберкулеза или после вакцинации БЦЖ и БЦЖ-М. Виды туберкулиновых проб: накожные (пластырная, мазевая), внутрикожные (проба Манту), подкожные (проба Коха), скарификационные (градуированная проба Гринчара-Карпиловского), уколочные (проба Гиффа).

Туберкулин состоит из белков (туберкулопротеины), полисахаридов, липидной фракции и нуклеиновых кислот. Туберкулин относят к неполным антигенам — гаптенам. Он не способен вызвать заболевание или сформировать иммунитет к туберкулезу, но запускает специфическую ответную реакцию. Туберкулиновая аллергия начинает проявляться через 6-8 часов после инъекции и относится к реакциям гиперчувствительности замедленного типа (ГЧЗТ).

Туберкулин активирует специфические рецепторы на лимфоцитах, клеточные медиаторы вовлекают макрофаги в процесс разрушения антигена. В месте введения туберкулина в первые 24 часа появляется отек, экссудация всех слоев кожи, а в более поздние сроки (72 часа) — мононуклеарная реакция с большим числом гистиоцитов.

Виды реакций на введение туберкулина

  • Уколочная реакция — на коже в месте введения туберкулина проявляется инфильтрат и гиперемия, а при гиперергических реакциях — везикулы, буллы, лимфангит, некроз;
  • Общая реакция — головная боль, артралгии, повышение температуры тела, изменения в общем анализе крови и др.;
  • Очаговая реакция — при легочных процессах очаговая реакция может проявиться усилением кашля, увеличением количества отделяемой мокроты, кровохарканьем, рентгенологически — нарастанием воспалительных изменений в зоне поражения.

Препараты туберкулина

Очищенный туберкулин — purified protein derivative (PPD) — готовят из смеси убитых нагреванием фильтратов культуры МБТ человечьего и бычьего видов, очищенных ультрафильтрацией, осажденных трихлоруксусной кислотой, обработанных этиловым спиртом и эфиром.

ВОЗ в 1952 году в качестве международного стандарта утвердил очищенный туберкулин-Зейберт или стандарт-туберкулин — PPD-S. В России с 1954 года используют отечественный очищенный туберкулин Линниковой — ППД-Л. Активность туберкулинов выражается в туберкулиновых единицах (ТЕ) и сопоставляется с международным стандартом.

Для туберкулинодиагностики используют два вида очищенного туберкулина:

  • Аллерген туберкулезный очищенный жидкий (очищенный туберкулин в стандартном разведении);
  • Аллерген туберкулезный очищенный сухой (сухой очищенный туберкулин).

Аллерген туберкулезный очищенный жидкий (очищенный туберкулин в стандартном разведении) — готовые к употреблению растворы туберкулина. Препарат представляет собой раствор очищенного туберкулина в фосфатном буфере с твином-80 в качестве стабилизатора и фенолом в качестве консерванта. Бесцветная прозрачная жидкость. Препарат выпускается в ампулах в виде раствора, содержащего 2 ТЕ ППД-Л в 0,1 мл. Возможен выпуск 5 ТЕ, 10 ТЕ в 0,1 мл и других дозировок препарата. Выпуск готовых к употреблению разведений ППД-Л (модификация Линниковой) позволяет использовать для массовой туберкулинодиагностики стандартный по активности препарат и избежать ошибок при разведении туберкулина на местах его применения.

Аллерген туберкулезный очищенный сухой (сухой очищенный туберкулин) — это растворенный в фосфатном буфере с сахарозой лиофильно высушенный очищенный туберкулин. Препарат имеет вид сухой компактной массы или порошка белого (слегка сероватого или кремового) цвета, легко растворяющегося в прилагаемом растворителе — карболизированном изотоническом растворе натрия хлорида. Выпускается в ампулах, содержащих 50000 ТЕ. Сухой очищенный туберкулин используется для диагностики туберкулеза и туберкулинотерапии только в противотуберкулезных диспансерах или стационарах.

Туберкулиновые препараты для выявления антител к микобактериям туберкулеза используют при постановке диагноза и оценке эффективности лечения:

  • Диагностикум эритроцитарный туберкулезный антигенный сухой;
  • Тест-система иммуноферментная для определения антител к возбудителю туберкулеза.

Диагностикум эритроцитарный туберкулезный антигенный сухой из бараньих эритроцитов, сенсибилизированные фосфатным антигеном МБТ, пористая масса или порошок красновато-коричневого цвета. Предназначен для выявления в реакции непрямой гемагглютинации (РНГА) специфических антител МБТ.

Тест-система иммуноферментная для определения антител к возбудителю туберкулеза представляет собой набор ингредиентов для проведения иммуноферментного анализа на твердофазном носителе. Предназначена для выявления антител к возбудителю туберкулеза в сыворотке крови больных.

Массовая туберкулинодиагностика

При массовой туберкулинодиагностике применяют только единую внутрикожную туберкулиновую пробу Манту с 2 ТЕ ППД-Л.

Цели массовой туберкулинодиагностики у детей и подростков

  • Отбор на иммунизацию против туберкулеза;
  • Формирование групп риска по заболеванию туберкулезом;
  • Ранняя диагностика туберкулеза у детей и подростков;
  • Оценка и прогноз эпидемической ситуации по туберкулезу.

Плана проведения массовой туберкулинодиагностики

План туберкулинодиагностики в зоне обслуживания амбулаторно-поликлинических учреждений составляют главные врачи учреждений при участии противотуберкулезных диспансеров.

В план туберкулинодиагностики предусматривают:

  • Учет детей, подростков и взрослых, подлежащих ежегодной туберкулинодиагностике, с выделением возрастных групп, подлежащих ревакцинации;
  • Календарный план обследования контингентов;
  • Подготовка медицинского персонала для проведения туберкулинодиагностики;
  • Приобретение необходимого количества инструментария;
  • Расчет потребности в туберкулине.

Важно. Потребность в очищенном туберкулине в стандартном разведении (2 ТЕ ППД-Л) для проведения массовой туберкулинодиагностики исчисляют из расчета две дозы по 0,1 мл на каждого обследуемого. При этом необходимо учитывать, что в ампуле содержится 30 доз (3 мл), которые используют на постановку пробы 15-ти пациентам. Один литр туберкулина содержит 10000 доз, которые используют для обследования 5000 человек.

Перед проведением массовой туберкулинодиагностики

  • Уточнить списки детей, подлежащих туберкулинодиагностике: на организованных детей по группам и классам и на неорганизованных детей — по годам рождения;
  • Проверить наличие прививочных форм №063/у в соответствии со списочным составом;
  • Уточнить наличие медицинских отводов: учетные формы №063/у промаркировать в зависимости от сроков медицинских отводов, внести сведения о наличии медицинских отводов в списки, составленные по группам и классам;
  • Промаркировать форму №063/у на лиц, состоящих на учете в противотуберкулезном диспансере (ПТД) в целях углубленного анализа результатов туберкулинодиагностики и оперативной связи с ПТД.

Туберкулинодиагностика проводится специально обученным медицинским персоналом, имеющим справку-допуск. Справка-допуск на проведение пробы Манту должна обновляться ежегодно.

Бригадный метод проведения массовой туберкулинодиагностики в организованных коллективах является более предпочтительным. Формирование специальных бригад (2 медсестры и 1 врач) и графика их работы возлагается на детские поликлиники. Неорганизованным детям раннего и дошкольного возраста проба Манту ставят в детской поликлинике.

Противопоказания к пробе Манту

Абсолютные — индивидуальная непереносимость.

Относительные — кожные заболевания, острые и хронические инфекционные и соматические заболевания (в т.ч. эпилепсия) в период обострения; аллергические состояния (бронхиальная астма, идиосинкразии с выраженными кожными проявлениями) в период обострений; карантин по детским инфекциям. Пробу Манту ставят через 1 месяц после исчезновения клинических симптомов или сразу после снятия карантина.

Туберкулинодиагностику планируют до проведения профилактических прививок против различных инфекций. Здоровым детям и подросткам, инфицированным МБТ, а также с положительной (сомнительной) поствакцинальной туберкулиновой чувствительностью и детям с отрицательной реакцией на туберкулин, но не подлежащим ревакцинации БЦЖ, все профилактические прививки можно производить непосредственно после оценки результата пробы Манту. В случае установления «виража» туберкулиновых реакций, а также гиперергической или усиливающейся реакции на туберкулин профилактические прививки проводятся не ранее, чем через 6 месяцев. Если проведение профилактической прививки предшествовало туберкулинодиагностике, то проба Манту проводится через 1 месяц после прививки.

Техника проведения внутрикожной пробы Манту

Применяют только одноразовые однограммовые туберкулиновые шприцы с тонкими короткими иглами с коротким косым срезом.

Внимание. Использование инсулиновых шприцев для проведения туберкулинодиагностики запрещается.

Иглой №0845 из ампулы в шприц набирают 0,2 мл (2 дозы) туберкулина, насаживают иглу туберкулинового шприца, выпускают раствор до метки 0,1 мл (1 доза) в стерильный ватный тампон.

Место введения — внутренняя поверхность средней трети предплечья, четный год — правая рука, нечетный год — левая рука. Кожу обработать 70 градусным спиртом, просушить стерильной ватой.

При правильной технике введения в коже образуется папула беловатого цвета размером не менее 7-9 мм в диаметре.

Как оценивать пробу Манту

Результаты пробы Манту оценивают через 72 часа. Измеряют поперечный по отношению к предплечью размер инфильтрата, а при отсутствии инфильтрата измеряют размер гиперемии.

Проба Манту считается:

  • Отрицательная — инфильтрат и гиперемия полностью отсутствуют, имеется уколочная реакция 0-1 мм;
  • Сомнительная — инфильтрат 2-4 мм или только гиперемия любого размера;
  • Положительная — инфильтрат 5 мм и более.

По степени выраженности туберкулиновой чувствительности выделяют реакции:

  • Слабоположительные — размер инфильтрата 5-9 мм;
  • Средней интенсивности — размер инфильтрата 10-14 мм;
  • Выраженные — размер инфильтрата 15-16 мм;
  • Гиперергические — размер инфильтрата 17 мм и более, а также везикуло-некротические реакции независимо от размера инфильтрата с лимфангоитом или без него.

Таблица. Дифференцирования послевакцинной и инфекционной аллергии

Срок после прививки Прививочный рубчик Размер инфильтрата по пробе Манту с 2 ТЕ ППД-Л
Послевакцинная аллергия Аллергия неясного генеза Инфекционная аллергия
1 год 6-10 мм 5-15 мм 16 мм 17 мм
1 год 2-5 мм 5-11 мм 12-15 мм 16 мм
1 год нет сомнительная 5-11 мм 12 мм
2 года не имеет значения уменьшение инфильтрата увеличение инфильтрата на 2-5мм «вираж» — увеличение инфильтрата >6мм

Инфицированными МБТ следует считать лиц, у которых по пробе Манту с 2 ТЕ ППД-Л отмечают:

  • Впервые положительную реакцию (папула 5 мм и более) не связанную с иммунизацией вакциной БЦЖ («вираж»);
  • Стойко (на протяжении 4-5 лет) сохраняющуюся реакцию с инфильтратом 12 мм и более:
  • Резкое усиление чувствительности к туберкулину (на 6 мм и более) в течение одного года;
  • Постепенное, в течение нескольких лет, усиление чувствительности к туберкулину с образованием инфильтрата размерами 12 мм и более.

На консультацию к фтизиатру по результатам туберкулинодиагностики направляю:

  • С впервые положительной реакцией на пробу Манту (папула 5 мм и более), не связанной с иммунизацией вакциной БЦЖ.
  • С усиливающейся на 6 мм и более по сравнению с предыдущим годом чувствительностью к туберкулину. Диагноз: Инфицирование МБТ с нарастанием туберкулиновой чувствительности.
  • С гиперчувствительностью к туберкулину (папула 17 мм и более, а также везикуло-некротическая реакция или лимфангоит независимо от размера инфильтрата). Диагноз: Инфицирование МБТ с гиперергической чувствительностью к туберкулину.

Направляемые к фтизиатру дети должны иметь при себе сведения:

  1. О вакцинации (ревакцинации) против туберкулеза;
  2. О результатах туберкулиновых проб по годам;
  3. О контакте с больным туберкулезом;
  4. О флюорографическом обследовании окружения ребенка;
  5. О перенесенных хронических и аллергических заболеваниях;
  6. О предыдущих обследованиях у фтизиатра;
  7. Данные клинико-лабораторного обследования (общий анализ крови и мочи);
  8. Заключения соответствующих специалистов при наличии сопутствующей патологии.

Неадекватные реакции на введение туберкулина

  • Немедленная аллергическая реакция (отек Квинке, анафилактический шок);
  • Развитие аутоиммунных заболеваний (гломерулонефрит, тромбоцитопеническая пурпура и т. д.);
  • Общая реакция организма (туберкулиновый шок): недомогание, повышенная температура тела, нарушение сознания;
  • Наследственная гиперергическая чувствительность к туберкулину (генетически обусловленная повышенная чувствительность к туберкулину);
  • Усиление местной аллергической реакции у пациентов с соматическими и аллергическими заболеваниями (отек и зуд предплечья, усиление чувствительности к туберкулину);
  • Обострение существующих аллергических реакций (бронхоспазм у больных с бронхиальной астмой, кожные высыпания у больных аллергическими дерматозами, риноконъюнктивальный синдром и т.д.).

Важно!!! Факты индивидуальной непереносимости туберкулина и наследственной гиперергической чувствительности к туберкулину устанавливаются в специализированном учреждении после исключения туберкулеза органов дыхания и внелегочной локализации.

После проведения массовой туберкулинодиагностики

  • Внести результаты туберкулинодиагностики в медицинскую документацию: рабочий журнал, учетную форму №063/у, «Медицинскую карту ребенка» (форма №026/у), «Историю развития ребенка» (форма №112/у);
  • В перечисленные документы необходимо вписать: Предприятие-изготовитель туберкулина, номер серии, срок годности, дату проведения пробы, место введения препарата (левое или правое предплечье), результат пробы — размер инфильтрата (папулы) в мм, при отсутствии инфильтрата размер гиперемии (например: 5 мм пап., 7 мм гипер., отриц.);
  • Выбрать из картотеки учетные формы №063/у на лиц: отсутствовавших во время массовой туберкулинодиагностики для привлечения к ней в индивидуальном порядке; подлежащих дообследованию в ПТД по результатам туберкулинодиагностики; имеющих отрицательную туберкулиновую чувствительность для осуществления ревакцинации (в декретированных возрастах).

Индивидуальная туберкулинодиагностика

Цели индивидуальной туберкулинодиагностики

  • Дифференциальная диагностика поствакцинальной и инфекционной аллергии (ГЗТ);
  • Диагностика и дифференциальная диагностика туберкулеза и нетуберкулезных заболеваний;
  • Определение активности туберкулезного процесса;
  • Оценка эффективности лечения;
  • Определение «порога» индивидуальной чувствительности к туберкулину.

Индивидуальная туберкулинодиагностика применяется для диагностики локального туберкулеза по клиническим показаниям, независимо от срока постановки предшествующей пробы. Единственное противопоказание — индивидуальная непереносимость туберкулина. Диагностическую туберкулиновую пробу с использованием очищенного туберкулина можно проводить только в ПТД, туберкулезных стационарах и санаториях.

Рекомбинантный аллерген

ФС.3.3.1.0001.15 Аллерген туберкулезный рекомбинантный в стандартном разведении | Фармстудент

Ресурсы сайта (1449 работ)

ФС.3.3.1.0001.15 Аллерген туберкулезный рекомбинантный в стандартном разведении

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Аллерген туберкулезный ФС.3.3.1.0001.15

рекомбинантный в Взамен ГФ Х, ст. 706,

стандартном разведении ФС 42-19ВС-86

Настоящая фармакопейная статья распространяется на аллерген туберкулезный рекомбинантный, который представляет собой гибридный белок с молекулярной массой около 27 кДа, состоящий из 2 антигенов CFP10-ESAT6, продуцируемый генетически модифицированной культурой Еscherichia соli BL21(DE3)/pCFP-ESAT.

Аллерген туберкулезный рекомбинантный предназначен для диагностики туберкулеза.

ПРОИЗВОДСТВО

Производство препарата аллергена туберкулезного рекомбинантного должно осуществляться с соблюдением установленных правил организации производства и контроля качества генно-инженерных иммунобиологических лекарственных средств, гарантирующих качество и безопасность для человека.

Выращенную культуру клеток бактерий-продуцентов отделяют от среды и лизируют для высвобождения белка. Лизат клеток-продуцентов проходит стадии хроматографического выделения и очистки целевого белка-концентрата.

Очищенный концентрат – полуфабрикат (субстанция) аллергена туберкулезного подлежит проверке на стерильность, отсутствие сенсибилизирующих свойств, содержание белка, специфичность, специфическую активность, аномальную токсичность.

Стандартное разведение аллергена получают путем разведения концентрата изотоническим фосфатным буферным раствором до содержания 0,2 мкг гибридного белка в 0,1 мл.

ИСПЫТАНИЯ

Описание

Бесцветная прозрачная жидкость без посторонних примесей.

Подлинность

Препарат при внутрикожном введении морским свинкам, зараженным тест-штаммом Mycobacteriumtuberculosis, должен вызывать положительные кожные реакции, а у животных, иммунизированных вакциной БЦЖ, реакции должны отсутствовать (разделы «Специфическая активность», «Специфичность»).

Прозрачность

Должен быть прозрачным. Определение проводят визуально в соответствии с ОФС «Прозрачность и степень мутности жидкостей».

Цветность

Должен быть бесцветным. Определение проводят визуально в соответствии с ОФС «Степень окраски жидкостей».

Извлекаемый объем

Не менее номинального. Определение проводят в соответствии с ОФС «Извлекаемый объем лекарственных форм для парентерального применения».

рН

От 7,35 до 7,55. Определяют потенциометрическим методом в соответствии с ОФС «Ионометрия»» href=»http://pharmacopoeia.ru/ofs-1-2-1-0004-15-ionometriya/»>ОФС «Ионометрия».

Аномальная токсичность

Должен быть нетоксичным. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Аномальная токсичность»» href=»http://pharmacopoeia.ru/ofs-1-2-4-0004-15-anomalnaya-toksichnost/»>ОФС «Аномальная токсичность» на 5 мышах, тест-доза 0,5 мл.

Бактериальные эндотоксины

Не более 5 ЕЭ/мл. Определение проводят в соответствии с ОФС «Бактериальные эндотоксины».

Стерильность

Должен быть стерильным. Определение проводят в соответствии с ОФС «Стерильность»» href=»http://pharmacopoeia.ru/ofs-1-2-4-0003-15-sterilnost/»>ОФС «Стерильность» методом прямого посева или мембранной фильтрации.

Специфическая активность

В 0,1 мл препарата должно содержаться 0,2 мкг аллергена туберкулезного рекомбинантного. Индекс специфической активности должен быть равен (1,00 ± 0,05). Испытание проводят на морских свинках, зараженных живой культурой Mycobacterium tuberculosis.

Морских свинок (альбиносов или белокожих Hartley) массой (350±50) г содержат на постоянном пищевом рационе и в одинаковых условиях окружающей среды. Сенсибилизацию проводят путем заражения животных подкожно или аэрогенно вирулентным штаммом M.tuberculosis.

Используют третью генерацию тест-штамма с плотной среды для выращивания микобактерий. Морских свинок используют для постановки проб не более 2 раз в период от 30 до 120 сут после инфицирования с интервалом между постановками проб не менее 30 сут.

При повторном использовании животных пробы ставят на участках кожи, ранее не подвергавшихся воздействию препаратов.

За 24 ч до постановки туберкулиновых проб шерсть на спине или боках морских свинок удаляют сплошной полосой шириной 3-4 см.

Испытание препарата проводят на 6 зараженных микобактериями туберкулеза морских свинках. Заполняют 4 шприца испытуемым образцом и 4 шприца разведенным (0,2 мкг/0,1 мл) стандартным образцом (СО) аллергена туберкулезного рекомбинантного.

Каждой морской свинке по методу случайных чисел вводят по 0,1 мл внутрикожно 4 пробы испытуемого образца и 4 пробы СО. Реакцию учитывают через 24 ч, измеряя 2 взаимно перпендикулярных диаметра эритемы в мм. Подсчитывают суммы реакций на испытуемый препарат и на СО.

Специфическую активность оценивают по индексу специфической активности (I) – отношению суммы реакций на испытуемый препарат к сумме реакций на разведенный СО при отсутствии достоверных различий между средними реакциями на испытуемый препарат и СО.

Если полученные результаты выходят за указанные пределы, испытание повторяют. Результаты 2 испытаний усредняют.

Специфичность

Морские свинки, иммунизированные вакциной БЦЖ, не должны реагировать на внутрикожное введение 0,2 мкг в 0,1 мл испытуемого аллергена туберкулезного рекомбинантного и давать положительные реакции – папулы диаметром не менее 5 мм на 2 ТЕ в 0,1 мл СО очищенного туберкулина. Испытание проводят на 3 морских свинках не ранее чем через 30 дней после введения им по 0,5 мг вакцины БЦЖ.

Фенол

От 0,20 до 0,30 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Количественное определение фенола спектрофотометрическим методом в иммунобиологических лекарственных препаратах».

Производственные штаммы

Рекомбинантный штамм Escherichia coli BL21(DE3)/pCFP-ESAT — прототрофный штамм E.

coli В (депонирован в ИБХ РАН), который обладает рядом характеристик, отличающих его от штамма предшественника: быстрый рост на минимальной среде, способность к синхронизации, устойчивый рост культуры в условиях биосинтеза белка и недостатка питательных веществ, дефектность системы рестрикции ДНК В-типа.

Штамм несет оригинальную плазмиду pCFP10-ESAT6, содержащую генетическую конструкцию из 2 генов M.tuberculosis –cfp10 и esat 6и ген устойчивости к ампициллину (bla). Штамм устойчив к ампициллину (100 – 150 мкг/мл) и чувствителен к остальным антибиотикам.

Для контроля качества препарата используют тест-штаммы M.tuberculosis (вирулентный) и M. bovis BCG — 1 из Государственной коллекции патогенных микроорганизмов.

Упаковка и маркировка

В соответствии с ОФС «Иммунобиологические лекарственные препараты».

Транспортирование

При температуре от 2 до 8 оС в условиях, исключающих замораживание. Допускается транспортирование при температуре не выше 18 °С в течение 15 дней.

Хранение

При температуре от 2 до 8 °С. Не замораживать!

Новые возможности с рекомбинантными аллергенами › Клиника – Форпост

В составе специфических аллергенов, сейчас возможно также выделить наиболее активные белковые компоненты, которые вызывают выработку IgE антител и аллергические симптомы.

Например, проводя обычный тест на аллергию, выявлена сенсибилизация к аллергену пыльцы березы. Но этот аллерген включает несколько аллергенных компонентов. Это и есть рекомбинантные аллергены.

Рекомбинантные аллергены – это аллергенные молекулы, полученные методом генной инженерии, первоначально выделенные из аллергенного экстракта.

Большинство существующих рекомбинантных аллергенов экспрессированы в клетке Esherichia coli, и по своим структурным и иммунологическим свойствам полностью соответствуют натуральным протеинам. Другие высокотехнологические системы основаны на воспроизведении

рекомбинантных аллергенов в дрожжевой, бактериальной или инсектной клетке.

Рекомбинантные аллергены обладают тем же специфичным свойством к индукции IgE-антител, что и компоненты натуральных экстрактов и обычно демонстрируют высокую чувствительность и специфичность в тестах in vitro и in vivo.

Сегодня множество аллергенных молекул из различных натуральных источников аллергенов могут быть клонированы, секвинированы и экспрессированы как рекомбинантные аллергены.

Использование рекомбинантных аллергенов позволяет выявить сенсибилизацию к компонентам ( специфичным белкам).

Таким образом, использование рекомбинантных аллергенов – это важная информация о триггерных стимулах на молекулярном уровне. Исследование реактивности к рекомбинантным аллергенам дает возможность изучать более сложные популяционные явления, такие как географические различия в IgE-опосредованной чувствительности и перекрестные реакции между различными аллергенами.

• В случае, когда в натуральном экстракте содержание аллергенных компонентов низкое, дополнение основного рекомбинантного белка к экстракту улучшает клиническую чувствительность и количественную постановку теста.

• Рекомбинантные аллергены могут быть объединены для формирования композиции, содержащей оптимальное соотношение основных аллергенных компонентов из натурального экстракта, и исключающих компоненты, имеющие малое диагностическое значение. Это открывает интересные возможности для улучшения качества тестов в будущем.

• Использование тестов на отдельные аллергенные компоненты дополняют традиционные тесты на IgE антитела с целью получения более детальной информации. Возможность исследовать чувствительность к отдельным компонентам аллергена может пролить свет на необъяснимые явления.

• Тестирование с отдельными компонентами используется для более подробного исследования и объяснения аллергической реактивности, а также для определения перекрестной реактивности к различным аллергенам.

Что такое перекрестная аллергия и для чего это нужно

Для пациентов, у которых появляются симптомы после употребления в пищу яблока или других фруктов, обычный тест, основанный на применении экстракта, будет выявлять причиннозначимый аллерген, такой как яблоко, персик, груша. Однако истинной причиной может быть сенсибилизация к пыльце деревьев или трав, перекрестная реакция между компонентами аллергенов, имеющими одинаковую структуру и представленными в пыльце растений и пищевых белках.

Тесты на отдельные аллергеные компоненты могут быть использованы для получения большей информации о причине сенсибилизации на молекулярном уровне, например, к молекулам пыльцы, LTPs или профилинам, и делает возможным сделать выводы врачам о клинических проявлениях.

Так как у пациентов, реагирующих на пыльцу, симптомы проявляются только в определенный сезон, то симптоматическое лечение в период цветения может быть эффективно, а для пациентов чувствительных к LTP еще обязательно необходима элиминационная диета.

К тому же у этих пациентов, вероятно, разовьются более тяжелые симптомы.

Вот объяснение почему ребенок у которого была аллергия к латексной соске со временем дал реакцию на банан или авокадо – наличие рекомбинатных аллергенов ( перекрестная чувствительность, один и тот же по структуре белок аллерген)

Более точный ответ нужна ли СИТ

Рекомбинантные аллергены дают возможность высокоспецифической диагностики, с помощью которой возможно определить объективные критерии для назначения специфической иммунотерапии (СИТ).

Тесты с рекомбинантными аллергенами открывают новые возможности прогнозирования, будет ли назначение СИТ эффективным или нет, и назначения адекватной терапии.

Если аллергические реакции у пациента обусловлены сенсибилизацией к основному компоненту аллергена.

С высокой степенью вероятности можно прогнозировать высокий терапевтический эффект от СИТ с экстрактом пыльцы березы, который будет содержать высокую концентрацию этого компонента.

С другой стороны, если пациент чувствителен к другому, не к главному компоненту аллергена иммунотерапия с экстрактом, возможно будет недостаточно эффективной. Есть также опасения, что СИТ с аллергенными компонентами, к которым пациент не чувствителен, может вызвать развитие новой сенсибилизации, что скорее ухудшит симптомы, чем устранит их.

Иммунологический эффект от проведения СИТ может быть прослежен периодически

по уровню IgE- и IgG – антител к основным рекомбинантным аллергенам. Более того, проведение мониторинга может отследить развитие сенсибилизации к минорным

перекрестно –реагирующим компонентам экстракта.

Компонентная аллергодиагностика – новые подходы

Рекомбинантные аллергены открывают большие перспективы диагностики к молекулярным компонентам. С их помощью возможно определение сенсибилизации пациента к полному аллергенному профилю, включающему как аллергенные

компоненты, вызывающие заболевание, так и перекрестно-реагирующие. Компонентная аллергодиагностика – революционное направление аллергологии.

Разработки в области исследования реактивности к рекомбинантным аллергенам, проводились в компании Phadia в течение многих лет. В испытаниях использовали,

как очищенные натуральные аллергенные компоненты, так и рекомбинантные аллергены. Более 10 лет назад были запущены исследования с первыми рекомбинантными

аллергенами, после чего количество компонентов для диагностики in vitro неуклонно растет. Ученые активно разрабатывают новые рекомбинантные аллерготесты, исследуют их клиническую значимость и ищут пути их применения.

Аллерген туберкулезный рекомбинантный в стандартном разведении – Аллергия – симптомы и лечение

(в ред. Приказа Минздравсоцразвития РФ от 29. 10. 2009 N 855)

Аллерген туберкулезный рекомбинантный в стандартном разведении (далее – препарат) представляет собой рекомбинантный белок, продуцируемый генетически модифицированной культурой Escherichia coli BL21(DE3) /pCFP-ESAT. Препарат содержит два связанных между собой антигена – CFP10 и ESAT6, присутствующие в вирулентных штаммах микобактерий туберкулеза, в том числе M.tuberculosis и M.bovis.

Эти антигены отсутствуют в штаммах БЦЖ M.bovis, из которого готовятся вакцины туберкулезные – БЦЖ и БЦЖ-М.

Одна доза (0, 1 мл) препарата содержит: рекомбинантный белок CFP10-ESAT6 (0, 2 мкг) , фенол (0, 25 мг) в качестве консерванта, полисорбат 80 (твин 80) в качестве стабилизатора, натрий фосфорно-кислый двузамещенный 2-водный, натрия хлорид, калий фосфорно-кислый однозамещенный, воду для инъекций – до 0, 1 мл.

Биологические и иммунологические свойства.

Препарат предназначен для повышения качества диагностики туберкулезной инфекции. Действие препарата основано на выявлении клеточного иммунного ответа на специфические для микобактерий туберкулеза (далее – МБТ) антигены.

Препарат не обладает сенсибилизирующим действием, не токсичен. При внутрикожном введении вызывает у лиц с туберкулезной инфекцией специфическую кожную реакцию гиперчувствительности замедленного типа (далее – ГЗТ) .

По результатам проведенных исследований установлено, что чувствительность (частота положительных ответных реакций у лиц с активной туберкулезной инфекцией) внутрикожной пробы с препаратом сопоставима с чувствительностью туберкулиновой пробы, а его специфичность (частота отсутствия реакции на препарат у здоровых лиц) выше, чем у туберкулина, так как в отличие от туберкулина у вакцинированных БЦЖ, но не инфицированных МБТ лиц препарат не вызывает ответную реакцию ГЗТ. В связи с тем, что препарат не вызывает реакцию ГЗТ, связанную с вакцинацией БЦЖ, проба с препаратом не может быть использована вместо туберкулинового теста для отбора лиц на первичную вакцинацию и ревакцинацию БЦЖ.

Препарат используется во всех возрастных группах с целью:

1) диагностики туберкулеза и оценки активности процесса;

2) дифференциальной диагностики туберкулеза;

3) дифференциальной диагностики поствакцинальной и инфекционной аллергии (гиперчувствительности замедленного типа) ;

4) наблюдения за эффективностью лечения в комплексе с другими методами.

Для практического использования внутрикожную пробу с препаратом применяют в противотуберкулезных учреждениях или, при отсутствии таковых, по назначению врача-фтизиатра и при его методическом обеспечении.

Для раннего выявления туберкулеза внутрикожную пробу с препаратом проводят:

лицам, направленным в противотуберкулезное учреждение для дообследования на наличие туберкулезного процесса;

лицам, относящимся к группам высокого риска по заболеванию туберкулезом с учетом эпидемиологических, медицинских и социальных факторов риска;

лицам, направленным к фтизиатру по результатам массовой туберкулинодиагностики.

Факторами высокого риска заболевания туберкулезом являются:

1) эпидемиологические (контакт с больным туберкулезом человеком или животным) ;

сахарный диабет, язвенная болезнь, психоневрологическая патология, частые ОРВИ в анамнезе;

хронические заболевания различных органов и систем при торпидном, волнообразном течении и неэффективности традиционных методов лечения;

длительный прием (более месяца) цитостатических, глюкокортикоидных препаратов, иммунодепрессантов;

ВИЧ-инфекция, перинатальный контакт у детей по ВИЧ-инфекции;

алкоголизм, наркомания, пребывание в местах лишения свободы, безработица;

беспризорность детей и подростков, попадание детей в детские приюты, детские дома, социальные центры и т.д.;

Для дифференциальной диагностики туберкулеза и других заболеваний внутрикожную пробу с препаратом проводят в комплексе с клинико-лабораторным и рентгенологическим обследованием в условиях противотуберкулезного учреждения.

Для наблюдения за пациентами, состоящими на учете у фтизиатра с различными проявлениями туберкулезной инфекции, в условиях противотуберкулезного учреждения (все контингенты ПТД) внутрикожную пробу с препаратом проводят при контрольном обследовании во всех группах диспансерного учета с интервалом 3 – 6 месяцев.

Способ применения и дозировка.

Назначение и методическое руководство проведением пробы осуществляет врач-фтизиатр. Проба проводится детям, подросткам и взрослым специально обученной медицинской сестрой, имеющей допуск к проведению внутрикожных тестов. Препарат вводят строго внутрикожно.

Для проведения пробы применяют только туберкулиновые шприцы и тонкие короткие иглы с косым срезом. Перед употреблением необходимо проверить дату их выпуска и срок годности. Запрещается применять шприцы, предназначенные для инъекций инсулина.

Резиновую пробку флакона с препаратом обрабатывают 70% этиловым спиртом. Для забора препарата из флакона используется тот же шприц, который будет использован для инъекции (СП 3. 3. 2342-08 от 03. 03.

Если туберкулиновые шприцы имеют съемные иглы, пробку флакона прокалывают отдельной иглой для подкожных или внутримышечных инъекций, которую после каждого забора препарата в шприц оставляют в пробке, накрыв стерильной салфеткой.

Туберкулиновым шприцем набирают 0, 2 мл (две дозы) препарата и выпускают раствор до метки 0, 1 мл в стерильный ватный тампон. Флакон с препаратом после вскрытия допускается хранить не более 2 часов в защищенном от света месте.

Пробу проводят обследуемым в положении сидя. После обработки участка кожи на внутренней поверхности средней трети предплечья 70% этиловым спиртом в верхние слои натянутой кожи, параллельно ее поверхности, вводят 0, 1 мл препарата.

При постановке пробы, как правило, в коже образуется папула в виде “лимонной корочки” беловатого цвета диаметром 7 – 10 мм. Если на одном предплечье ставилась проба с туберкулином, препарат вводят в другое предплечье.

Лицам, у которых в анамнезе имелись проявления неспецифической аллергии, пробу рекомендуется проводить на фоне приема десенсибилизирующих препаратов в течение 7 дней (5 дней до постановки пробы и 2 дня после нее) .

Учет и интерпретация результатов.

В учетных документах после постановки пробы с препаратом отмечают:

а) название препарата;

б) предприятие-изготовитель, номер серии, срок годности;

в) дату проведения пробы;

г) результат – реакция на пробу.

Результат пробы оценивает врач или обученная медсестра через 72 часа с момента ее проведения путем измерения поперечного (по отношении к оси предплечья) размера гиперемии и инфильтрата (папулы) в миллиметрах прозрачной линейкой. Гиперемию учитывают только в случае отсутствия инфильтрата.

Ответная реакция на пробу считается:

отрицательной – при полном отсутствии инфильтрата и гиперемии или при наличии “уколочной реакции”;

сомнительной – при наличии гиперемии без инфильтрата;

положительной – при наличии инфильтрата (папулы) любого размера.

Условно различают следующие ответные кожные реакции на препарат:

слабо выраженная – при наличии инфильтрата размером до 5 мм;

умеренно выраженная – при размере инфильтрата 5 – 9 мм;

выраженная – при размере инфильтрата 10 мм и более;

гиперергическая – при размере инфильтрата 15 мм и более, при везикуло-некротических изменениях и (или) лимфангоите, лимфадените независимо от размера инфильтрата.

В отличие от реакции ГЗТ кожные проявления неспецифической аллергии (в основном гиперемия) на препарат, как правило, наблюдаются сразу после постановки пробы и через 48 – 72 ч обычно исчезают.

Отрицательная реакция на пробу.

Кожная ГЗТ к препарату, как правило, отсутствует:

1) у лиц, не инфицированных МБТ;

2) у лиц, ранее инфицированных МБТ с неактивной туберкулезной инфекцией;

3) у больных туберкулезом в период завершения инволюции туберкулезных изменений при отсутствии клинических, рентгено-томографических, инструментальных и лабораторных признаков активности процесса;

4) у лиц, излечившихся от туберкулеза.

Одновременно проба с препаратом может быть отрицательной у больных туберкулезом с выраженными иммунопатологическими нарушениями, обусловленными тяжелым течением туберкулезного процесса, у лиц на ранних стадиях инфицирования МБТ, на ранних стадиях туберкулезного процесса, у лиц, имеющих сопутствующие заболевания, сопровождающиеся иммунодефицитным состоянием. В связи с этим при наличии характерных клинико-рентгенологических признаков туберкулеза отрицательная реакция на препарат не должна препятствовать проведению дальнейших мероприятий по диагностике туберкулезной инфекции.

Лица с сомнительной и положительной реакцией на препарат подлежат обследованию на туберкулез.

Лица старше 18 лет, у которых впервые установлена сомнительная или положительная проба с препаратом, подлежат полному клинико-рентгенологическому обследованию в противотуберкулезном диспансере.

По итогам обследования, при отсутствии у указанной группы лиц признаков локального туберкулеза, им показано наблюдение у фтизиатра по “0” группе диспансерного учета с проведением лечебно-профилактических мероприятий (по показаниям) .

Детям и подросткам при наличии сомнительной или положительной реакции на препарат показано полное обследование на туберкулез с последующим лечением и наблюдением в соответствующей группе диспансерного учета. При отрицательном результате реакции на препарат лечение по поводу туберкулезной инфекции не показано. Повторная постановка пробы – через 2 месяца.

Противопоказания для постановки пробы:

1) острые и хронические (в период обострения) инфекционные заболевания, за исключением случаев, подозрительных на туберкулез;

2) соматические и др. заболевания в период обострения;

3) распространенные кожные заболевания;

В детских коллективах, где имеется карантин по детским инфекциям, проба проводится только после снятия карантина.

В случаях дифференциальной диагностики локального туберкулеза и других заболеваний, кроме индивидуальной непереносимости туберкулина, противопоказаний для постановки пробы с препаратом не имеется.

У отдельных лиц, как и при проведении туберкулинодиагностики, могут наблюдаться кратковременные признаки общей неспецифической реакции: недомогание, головная боль, повышение температуры тела.

Взаимодействие с другими лекарственными препаратами.

Здоровым лицам с отрицательным результатом пробы профилактические прививки (кроме БЦЖ) можно проводить непосредственно после оценки и учета результата пробы.

Если профилактические прививки уже проведены, то пробу с препаратом осуществляют не ранее чем 1 месяц после прививки.

Приложение N 5 от 21 марта 2003 г. N 109

Аллергокомпонент t215 – Береза rBet v1 PR-10, IgE (ImmunoCAP)

Количественное определение в крови специфических антител класса иммуноглобулинов E к главному («мажорному») аллергену пыльцы березы – Betv1 белку PR-10, выявление которых позволяет диагностировать истинную аллергию к пыльце березы, оценить перекрестную реактивность с аллергенами других растений и пищевых продуктов, прогнозировать эффективность аллергенспецифической иммунотерапии.

Синонимы русские
Специфические иммуноглобулины класса Е к мажорному аллергену пыльцы березы Betv1 PR-10.

Синонимы английские
ImmunoCAP t215 (Birch, rBet v1 PR-10), IgE; Silver Birch recombinant (rBet v1 PR-10) IgE Ab in Serum; Silver Birch (rBet v1 PR-10) IgE.

Метод исследования

Реакция иммунофлюоресценции на трехмерной пористой твердой фазе, ИФЛ (ImmunoCAP).

Единицы измерения

kU/l (килоединица на литр).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную или капиллярную кровь.

Аллерген – это вещество, вызывающее аллергическую реакцию. При атопических заболеваниях аллергены стимулируют образование антител класса IgE и являются причинными факторами развития клинических симптомов аллергических заболеваний.

Выявление в крови специфических иммуноглобулинов Е к определенному аллергену подтверждает его роль в развитии аллергической реакции I типа (реагиновой), а значит, позволяет определить возможного «виновника» аллергии и назначить соответствующие лечебные и профилактические мероприятия.

Однако в состав аллергенного вещества входит не один, а несколько белковых структур, которые могут выступать аллергенами. Одни являются «мажорными» -основными аллергенами, другие «минорными» – второстепенными. Определение антител к рекомбинантным аллергенам позволяет выявить ведущий компонент в составе сложных аллергенов на уровне молекулярной аллергологии.

Это позволяет дифференцировать истинную и перекрестную аллергию.

Применение рекомбинантных аллергенов представляет собой новый инструмент в диагностике аллергических реакций I типа, который позволяет получить подробную информацию о сенсибилизации пациента, перекрестной реактивности с другими аллергенами, обосновать целесообразность и прогнозировать эффективность аллергенспецифической иммунотерапии (АСИТ).

Пыльца березы является основным и наиболее распространенным триггером аллергических реакций в весенний период, которые проявляются аллергическим ринитом, конъюнктивитом, обострениями бронхиальной астмы и атопического дерматита, симптомами орального аллергического синдрома.

При аллергологическом тестировании обычно определяется сенсибилизация к пыльце березы, как сложному аллергену, который одновременно включает в себя несколько аллергенных компонентов (Betv 1, Betv 2, Betv 3, Betv 4, Betv 5, Betv 6, Betv 7).

Определение специфических антител IgE к отдельным аллергенным молекулам, рекомбинантным аллергенам, полученным методом генной инженерии позволяет дифференцировать истинную сенсибилизацию и перекрестную реактивность.

Особенно важно учитывать это при планировании АСИТ с аллергенами пыльцы березы, поскольку она может быть эффективной только при истинной аллергии.

Истинная аллергия к пыльце березы подтверждается наличием в крови специфических антител IgE к аллергокомпоненту Betv1 – белку PR-10, рибонуклеазе, патогенетически связанному с развитием сенсибилизации к пыльце березы протеину. IgE-антитела к аллергену Betv1 выявляются у более 95% пациентов, сенсибилизированных к пыльце березы.

PR-10 – термолабильный белок, аллергенные свойства которого снижаются после термической обработки, а также при распаде в пищеварительном тракте.

Структура PR-10 гомологична белкам пыльцы других деревьев из семейств Березовых, Буковых, Ореховых и таксономически связанных фруктов (яблоки, абрикосы, персики, черешня), овощей (морковь, сельдерей) и специй.

В виду вышеуказанного, у лиц, сенсибилизированных к белку PR-10, кроме респираторных симптомов на пыльцу нередко при употреблении в пищу фруктов, некоторых овощей, орехов наблюдаются локальные проявления аллергии – оральный аллергический синдром в виде зуда, жжения, отека, покраснения в ротовой полости.

Целью данного исследования является определение специфических IgE к рекомбинантному аллергену пыльцы березы rBetv1 методом ImmunoCAP.

Аллергодиагностика технологией ImmunoCAP характеризуется высокой точностью и специфичностью, что достигается обнаружением в очень малом количестве крови пациента низких концентраций IgE-антител.

Исследование основано на иммунофлюоресцентном методе, что позволяет увеличить чувствительность в несколько раз по сравнению с другими диагностическими методами. Во всем мире до 80% определений специфических иммуноглобулинов IgE выполняется данным методом.

Всемирная Организация Здравоохранения и Всемирная Организация Аллергологов признают диагностику с использованием ImmunoCAP как «золотой стандарт», так как эта методика доказала свою точность и стабильность результатов в независимых исследованиях.

Для чего используется исследование?

  • дифференциальная диагностика истинной аллергии к пыльце березы и аллергических реакций, обусловленных перекрестной реактивности с другими аллергенами растительного происхождения;
  • выявление сенсибилизации к главному аллергену пыльцы березы у пациентов с аллергией на пыльцу деревьев и трав и/или поливалентной сенсибилизацией;
  • определение возможных причин перекрестной реактивности между аллергенами различных растений и продуктов растительного происхождения;
  • решение вопроса о целесообразности проведения и прогнозирование эффективности аллергенспецифической терапии (АСИТ) с аллергенами пыльцы березы.

Когда назначается исследование?

  • при обследовании пациентов, сенсибилизированных к пыльце березы и других деревьев;
  • при обследовании пациентов с поливалентной сенсибилизацией к аллергенам растительного происхождения;
  • при планировании АСИТ с аллергенами пыльцы березы.

Что означают результаты?

Значение показателякЕдА/л Класс Уровень аллергенспецифических антител IgE
0 – 0,35 Отсутствует
0,351 – 0,69 1 Низкий
0,70 – 3,49 2 Средний
3,5 – 17,49 3 Высокий
17,5 – 49,99 4 Очень высокий
50,0 – 100,0 5 Насыщенно высокий
Больше 100,0 6 Крайне высокий

Причины положительного результата:

  • сенсибилизация к главному аллергену пыльцы березы.

При выявлении сенсибилизации к аллергену Betv1 и отсутствием IgE-антител к аллергенам Betv2 и Betv4 высокая вероятность успешной АСИТ.

У пациентов с истинной аллергией на пыльцу березы (наличием IgE-антител к Betv1) и одновременной сенсибилизацией к минорным аллергенам Betv2 и Betv4 вероятность успешной АСИТ снижается.

Причины отрицательного результата:

  • отсутствие сенсибилизации к данному аллергену;
  • длительное ограничение или исключение контакта с аллергеном;
  • успешное проведение АСИТ.

При отсутствии сенсибилизации к Betv 1 АСИТ с аллергенами пыльцы березы будет неэффективной.

Важные замечания

Выполнение данного исследования безопасно для пациента по сравнению с кожными тестами (invivo), так как исключает контакт пациента с аллергеном. Прием антигистаминных препаратов и возрастные особенности не влияют на качество и точность исследования.

Также рекомендуется

[02-029] Клинический анализ крови: общий анализ, лейкоцитарная формула, СОЭ (с микроскопией мазка крови при выявлении патологических изменений)

[08-017] Суммарные иммуноглобулины E (IgE) в сыворотке

[21-673] Аллергочип ImmunoCAP

[40-442] Аллергологическое обследование при астме/рините

[21-657] Аллерген t3 – береза бородавчатая, IgE (ImmunoCAP)

[21-665] Панель аллергенов деревьев tx5 (ImmunoCAP), IgE: ольха серая, лещина, вяз, ива, тополь

[21-664] Панель аллергенов злаковых трав gx1 (ImmunoCAP), IgE: ежа сборная, овсяница луговая, плевел, тимофеевка луговая, мятлик луговой

[21-670] Панель аллергенов сорных трав wx3 (ImmunoCAP), IgE: полынь, подорожник ланцетовидный, марь, золотарник, крапива двудомная

+ определение специфических иммуноглобулинов класса E к прочим аллергенам

Кто назначает исследование?

Аллерголог, пульмонолог, оториноларинголог, дерматолог, гастроэнтеролог, педиатр, терапевт, врач общей практики.

Литература

  1. Mothes N, Valenta R. Biology of tree pollen allergens. Curr Allergy Asthma Rep 2004;4(5):384-90
  2. Rossi RE, Monasterolo G, Monasterolo S. Detection of specific IgE antibodies in the sera of patients allergic to birch pollen using recombinant allergens Bet v 1, Bet v 2, Bet v 4: evaluation of different IgE reactivity profiles. Allergy 2003 ;58(9):929-32
  3. Kazemi-Shirazi L, Niederberger V, Linhart B, Lidholm J, Kraft D, Valenta R. Recombinant marker allergens: diagnostic gatekeepers for the treatment of allergy. Int Arch Allergy Immunol 2002;127(4):259-68
  4. Valenta R, Duchene M, Pettenburger K, Sillaber S, Valent P. Identification of profilin as a novel pollen allergen; IgE autoreactivity in sensitized individuals. Science 1991;253:557-60

AlkorBio Group. Рекомбинантные аллергены – расширение возможностей in vitro аллергодиагностики

Что это за разработка, способна ли эта инновация изменить подход к выявлению аллергии и почему сегодня ученые все чаще обращаются к теме аллергодиагностики, – об этом мы беседуем с руководителем лаборатории молекулярной диагностики компании «Вега» ГК Алкор Био Александром Павловым.

– Александр, я правильно понимаю, что вы первые в России приступили к разработке рекомбинантных аллергенов для широкого применения в лабораторной диагностике?

– Да, сегодня в России никто кроме нас не производит рекомбинантные аллергены для использования в составе тест-систем.

Наверняка в научных лабораториях такие разработки ведутся, но их применение не выходит за рамки лабораторных нужд.

Западные разработчики здесь на шаг впереди нас: существует, по крайней мере, четыре компании, в Швеции, Германии, Франции и США, которые производят рекомбинантные аллергены и предлагают их для in vitro аллергодиагностики.

– В настоящее время в Алкор Био производится 154 аллергенов, получаемых из природного сырья. Зачем вы начали разрабатывать синтетические аллергены?

– В нашей компании четыре года назад стартовал проект по созданию панели аллергенных экстрактов для применения в in vitro аллергодиагностике.

Способ получения экстрактов достаточно универсален для разного рода аллергенов, хотя, конечно, каждый аллерген требует своего собственного подхода. Этот способ заключается в тотальном экстрагировании из вещества всего содержащегося в нем белка, будь то пищевой, пыльцевой или бытовой аллерген.

На выходе мы получаем раствор, содержащий компоненты искомого вещества. При этом мы оцениваем компонентный состав, определяем общее содержание белка и иммунологические свойства.

Если иммунологические свойства, то есть эффективность выявления иммуноглобулинов класса Е (IgE) в крови у пациентов, страдающих от этого типа аллергии, достаточно высока, то данный экстракт может быть использован для диагностики аллергии.

Этот метод был разработан еще в 70-ых годах прошлого века и в настоящее время широко применяется в аллергодиагностике. С использованием таких экстрактов также проводятся так называемые кожные скарификационные и аппликационные тесты, аллергоспецифическая иммунотерапия.

Однако, по мере развития аллергодиагностики, оказалось, что специфичность этого метода, зачастую, несколько ниже, чем хотелось бы. И у данного явления есть несколько причин, одна из которых – вариабельность аллергенных экстрактов.

То есть, к примеру, пыльца деревьев раннего цветения, полученная в средней полосе России, отличается от таковой же, но полученной в южных широтах. Следовательно, есть вероятность, что не будет полного совпадения и у полученных из этого сырья экстрактов.

Кроме этого выделение экстрактов может происходить немного по-разному у разных производителей.

И третье – сам подход к выделению аллергенных экстрактов не дифференцирован по отношению к аллергенным компонентам, которые вызывают аллергию, а направлен на выделение как можно большего количества тотального белка.

– То есть в экстракте, выделенном из какого-то определенного сырья, может содержаться сразу несколько аллергенных компонентов?

– Да, во многих субстанциях аллергенные компоненты представлены не одним белком, а целым набором: двумя, тремя и даже десятью белками. И каждый из них сам по себе может вызывать реакцию. Причем, у разных людей спектр чувствительности в пределах одного аллергена может различаться. Например, рассмотрим такой распространенный аллерген, как пыльца березы.

Основной аллергенный компонент пыльцы березы вызывает аллергию в 95% случаев, когда у людей наблюдается аллергическая реакция на пыльцу березы, но есть и другие компоненты, у одних пациентов они могут вызывать аллергию, у других – нет.

Но нередко аллергенный компонент, который присутствует в растворе в очень небольших количествах, то есть является минором, вызывает довольно сильную аллергическую реакцию, то есть с точки зрения аллергодиагностики является мажором.

Может быть и такая ситуация, когда аллергены, не имеющие мажорных компонентов, с той или иной частотой вызывают аллергическую реакцию. И все эти особенности могут приводить к возникновению проблем при использовании аллергенных экстрактов недифференцированно.

Кроме этого все аллергены можно объединить в несколько так называемых суперсемейств. И внутри одного такого суперсемейства белки очень похожи. То есть это некие эволюционно консервативные структуры, белки, которые могут встречаться в широком спектре окружающих нас веществ.

Поэтому, например, такая проблема как неспецифичность и кросс-реактивность аллергенных компонентов часто бывает вызвана очень высокой степенью гомологии белков из разных природных источников.

Например, когда мы диагностируем аллергию к пыльце березы и, действительно, видим, что по результатам in vitrо теста у человека обнаруживается гиперчувствительность, это не означает на 100%, что мы поставим верный диагноз. Потому что основной компонент пыльцы березы встречается и во многих пищевых продуктах: в яблоке, груше, персике.

То есть человек уверен, что у него аллергия на березу, а оказывается, что у него аллергия, скажем, на яблоко. Потому что эти аллергены очень похожи. И таких примеров достаточно много.

Поэтому-то аллергия такое многофакторное заболевание: если у вас развился аллергический ответ на один из таких белков, то тут же может появиться ответ сразу на несколько других аллергенов.

При этом если аллерген определен не верно, нельзя назначать аллергоспецифическую терапию, когда пациенту проводят терапевтический курс инъекций аллергена, чтобы выработать невосприимчивость к нему. Эта процедура очень длительная, занимает, зачастую, несколько лет и стоимость ее – десятки тысяч рублей. А в случае, если диагноз поставлен неправильно – неправильно определен тип аллергии, неверно определен основной аллерген – это может вызвать совершенно противоположную реакцию. То есть у пациента появляется аллергическая реакция на то, на что ее прежде никогда не было.

Частичным решением вопроса может быть обогащение существующих экстрактов целевыми веществами, теми, которые мы хотим изучать, то есть аллергенными компонентами, либо использовать эти аллергенные компоненты независимо. Для того, чтобы более специфично и надежно поставить диагноз.

– Как это можно сделать? Как в процессе диагностирования аллергии избежать ошибок?

Первый подход самый простой, когда мы берем какое-то вещество и разделяем его на компоненты, то есть отсеиваем все неаллергенные и берем только аллергенные в большей концентрации. И затем каждый компонент используем независимо.

Такой подход имеет право на жизнь, к примеру, когда мы говорим о таком распространенном аллергене, как белок яйца. Здесь присутствуют такие вещества, как овальбумин и овомукоид, каждый из них является аллергеном, но нередко бывает, что одни аллергики реагируют только на овальбумин, а другие – только на овомукоид.

И овальбумин и овомукоид присутствуют в яйце в высокой концентрации. Поэтому мы можем при помощи нехитрых биохимических манипуляций выделить эти вещества в чистом виде и затем использовать в аллергодиагностике независимо друг от друга.

Но есть гораздо более сложные варианты, когда минорный компонент, то есть компонент, которого очень мало, является сильным аллергеном. Тогда для выделения этого компонента из природного источника приходится применять сложные селективные методы.

Например, если есть вещество, имеющее сродство к данному аллергенному компоненту, его добавляют к раствору аллергена, все это вместе отбирают и таким образом получают сильно обогащенную фракцию. То же самое можно сделать методом жидкостной хроматографии. Но далеко не к каждому аллергенному компоненту можно подобрать такое селектирующее вещество.

– И что делать в этом случае?

– Получить эти белки искусственно. Это и есть так называемая технология рекомбинантных белков. Ее суть заключается в том, что мы используем чужеродный организм для высокопроизводительной наработки интересующего нас вещества.

Например, если требуемый белок – растительный, можно использовать бактерию: внедрить в нее ген или участок гена, который отвечает за экспрессию, синтез необходимого нам белка. В этом случае мы говорим о технологии молекулярного клонирования, когда из генома растения вырезается определенный участок и затем вставляется в геном бактерии.

После чего мы заставляем бактерию этот белок производить. В настоящее время уже описано огромное количество аллергенных компонентов и участков геномов, которые ответственны за их синтез. То есть имеется достаточное количество информации для получения широкого спектра рекомбинантных белков.

Но здесь возникает другая проблема: да, белок при помощи этой технологии мы можем получать в неограниченных количествах, но прежде чем его использовать в аллергодиагностике, необходимо его протестировать на эффективность, а также верифицировать, то есть проверить, насколько этот белок обладает теми свойствами, которые мы от него ожидаем.

И это большой пласт работы, который следует сразу за получением искомого белка. Здесь применяется широкий спектр иммуноферментных методов, требуется большая выборка положительных и отрицательных сывороток, чтобы показать: вещество, которое мы получили – аналогично аллергенному экстракту, которое мы таким образом замещаем и/или дополняем.

В лаборатории аллергологии ГК Алкор Био была создана большая панель аллергенных экстрактов, а также тест-система для in vitrо аллергодиагностики, был собран большой банк сывороток крови пациентов и в настоящее время все эти наработки могут быть использованы для создания панели рекомбинантных белков.

Я уверен, что в дальнейшем панель аллергенов ГК Алкор Био будет расширяться, в том числе, и за счет рекомбинантных белков, хотя, конечно, процесс их получения трудоемкий и длительный.

В первую очередь имеет смысл начинать разработку белков, которые представляют наибольшую угрозу в плане получения ложных результатов, как, например, вышеупомянутый белок пыльцы березы rBetv1 – мажорный белок, проявляющий кросс-реактивность.

Использование рекомбинантных аллергенов позволит снизить вероятность ошибки при постановке диагноза, это – хорошее дополнение к панели аллергенных экстрактов, расширение которой в Группе компаний Алкор Био активно продолжается.

Аллерген туберкулезный очищенный жидкий. Владелец регистрационного удостоверения.

Аллерген туберкулезный очищенный в стандартном разведении (Туберкулин)

Очищенный туберкулин в стандартном разведении представляет собой смесь фильтратов убитых нагреванием культур микобактерий туберкулеза человеческого и бычьего видов, осажденных трихлоруксусной кислотой, обработанных этиловым спиртом и эфиром для наркоза, растворенных в фосфатно-буферном растворе с твином-80 в качестве стабилизатора и фенолом в качестве консерванта.

Препарат имеет вид бесцветной прозрачной жидкости.

Выпускается в ампулах в виде раствора, содержащего в 0,1 мл 2 туберкулиновые единицы (ТЕ), по 3 мл (30 доз), 2 мл (20 доз) или 1 мл (10 доз); 10 ампул в упаковке.

Биологические и Иммунологические свойства

Действующее начало Туберкулина аллерген — туберкулопротеин, вызывает при постановке внутрикожной туберкулиновой пробы у инфицированных или вакцинированных лиц специфическую реакцию гиперчувствительности замедленного типа в виде местной реакции — гиперемии и инфильтрата (папулы).

Туберкулин предназначен для массовой туберкулинодиагностики, с целью:

С целью отбора контингента для ревакцинации БЦЖ, а также перед первичной вакцинацией детей в возрасте 2 месяца и более. для диагностики туберкулеза, в том числе для раннего выявления начальных и локальных форм туберкулеза у детей и подростков. для определения инфицирования микобактериями туберкулеза.

Способ применения и дозы

Применяют для постановки внутрикожной пробы Манту Препарат вводят строго внутрикожно. Пробу Манту ставят пациентам обязательно в положении сидя, т.к. у эмоционально лабильных лиц инъекция может стать причиной обморока. Для проведения внутрикожной пробы применяют однограммовые туберкулиновые шприцы разового использования с короткими тонкими иглами.

Запрещается применять для пробы Манту инсулиновые шприцы и шприцы и иглы с истекшим сроком годности.

Ампулу с препаратом тщательно обтирают марлей, смоченной 70° этиловым спиртом, затем шейку ампулы подпиливают ножом для вскрытия ампул и отламывают. Извлечение туберкулина из ампулы проводят шприцем, которым осуществляют пробу Манту, с иглой № 0845. Набирают 0,2 мл, т. е. 2 дозы туберкулина, насаживают тонкую иглу, выпускают раствор до метки 0,1 мл в стерильный ватный тампон. Ампулу после вскрытия допускается хранить в асептических условиях не более 2 часов.

На внутренней поверхности средней трети предплечья участок кожи обрабатывают 70° этиловым спиртом и просушивают стерильной ватой. Тонкую иглу срезом вверх вводят в верхние слои кожи параллельно ее поверхности — внутрикожно. После введения иглы в кожу из шприца вводят строго по делению шкалы 0,1 мл (2 ТЕ) препарата, т.е. 1 дозу. При правильной технике введения в коже образуется папула беловатого цвета в виде ”лимонной корочки”, размером 7 — 10 мм в диаметре. Пробу Манту ставит по назначению врача специально обученная медсестра, имеющая документ — допуск к проведению туберкулинодиагностики.

Результаты туберкулиновой пробы оценивает врач или специально обученная медсестра. Результат пробы Манту оценивают через 72 ч путем измерения размера инфильтрата (папулы) в мм. Прозрачной линейкой с миллиметровыми делениями измеряют и регистрируют поперечный (по отношению к оси предплечья) размер инфильтрата. Гиперемию учитывают тольво в случае отсутствия инфильтрата. При постановке проб Манту, реакция считается:

Отрицательной — при полном отсутствии инфильтрата (папулы) и гиперемии или при наличии уколочной реакции (0 -1 мм); сомнительной — при инфильтрате размером (2-4 мм) или тольсо гиперемии любого размера без инфильтрата; положительной — при наличии инфильтрата диаметром 6 мм и более; гиперергической — у детей и подростков считается реакция с диаметром инфильтрата 17мм и более, у взрослых — 21мм и более, а также визикулонекротические реакции независимо от размера инфильтрата с лимфангоитом или без него.

Реакция на введение туберкулина

Находится в зависимости от уровня специфической реактивности организма.

У отдельных лиц с высокой степенью гиперчувствительности замедленного типа к туберкулину, местные реакции могут сопровождаться лимфангоитами и лимфаденитами. Кроме того, иногда наблюдают общую реакцию: недомогание, головная боль, повышение температуры.

Здоровым лицам, с сомнительной или положительной реакцией на пробу Манту и детям с отрицательной реакцией на туберкулин, но не подлежащим вакцинации БЦЖ, все профилактические прививки можно проводить непосредственно после оценки результатов пробы Манту.

Распространенные кожные заболевания, эпилепсия, острые, хронические инфекционные и соматические заболевания в период обострения, аллергические состояния (ревматизм в острой и подострой фазах, бронхиальная астма, идиосинкразии с выраженными кожными проявлениями в период обострений). Проба Манту ставится череэ 1 месяц после исчезновения всех клинических симптомов или сразу после снятия карантина. Не допускается проведение пробы Манту в тех детских коллективах, где имеется карантин по детским инфекциям.

Профилактические прививки могут повлиять на чувствительность к туберкулину. Исходя из этого, туберкупинодиагностику необходимо планировать до проведения профилактических прививок против различных инфекций. В случае, если профилактическая прививка была проведена, то туберкулинодиагностика должна осуществляться не ранее, чем через 1 месяц после прививки.

С целью выявления противопокаэаний врач (медицинская сестра) в день постановки туберкулиновых проб проводят опрос и осмотр подвергаемых пробе лиц.

Хранят при температуре от 2 до 8 °С.
Срок годности — 1 год.

Туберкулин Полная информация по препарату. Туберкулин Фармакология, показания к применению, противопоказания, способ применения, побочные действия, Туберкулин лекарственное взаимодействие, беременность, передозировка, форма выпуска, условия хранения, состав.

Состав, форма выпуска, упаковка

представляет собой смесь фильтратов убитых нагреванием культур микобактерий туберкулеза человеческого и бычьего видов, осажденных трихлоруксусной кислотой, обработанных этиловым спиртом и эфиром для наркоза, растворенных в фосфатно-буферном растворе с твином-80 в качестве стабилизатора и фенолом в качестве консерванта.

раствор для инъекций.

Выпускается в ампулах в виде раствора, содержащего в 0,1 мл 2 туберкулиновые единицы (ТЕ), по 3 мл (30 доз), 2 мл (20 доз) или 1 мл (10 доз); 10 ампул в упаковке.

Фармакологические свойства

Фармакологическое действие

Действующее начало Туберкулина аллерген — туберкулопротеин, вызывает при постановке внутрикожной туберкулиновой пробы у инфицированных или вакцинированных лиц специфическую реакцию гиперчувствительности замедленного типа в виде местной реакции — гиперемии и инфильтрата (папулы).

Показания

Показания

Туберкулин предназначен для массовой туберкулинодиагностики, с целью:

  • с целью отбора контингента для ревакцинации БЦЖ, а также перед первичной вакцинацией детей в возрасте 2 месяца и более.
  • для диагностики туберкулеза, в том числе для раннего выявления начальных и локальных форм туберкулеза у детей и подростков.
  • для определения инфицирования микобактериями туберкулеза.

Способ применения и дозы

Способ применения и дозы

Применяют для постановки внутрикожной пробы Манту Препарат вводят строго внутрикожно. Пробу Манту ставят пациентам обязательно в положении сидя, т.к. у эмоционально лабильных лиц инъекция может стать причиной обморока. Для проведения внутрикожной пробы применяют однограммовые туберкулиновые шприцы разового использования с короткими тонкими иглами.

Запрещается применять для пробы Манту инсулиновые шприцы и шприцы и иглы с истекшим сроком годности.

Ампулу с препаратом тщательно обтирают марлей, смоченной 70° этиловым спиртом, затем шейку ампулы подпиливают ножом для вскрытия ампул и отламывают. Извлечение туберкулина из ампулы проводят шприцем, которым осуществляют пробу Манту, с иглой № 0845. Набирают 0,2 мл, т. е. 2 дозы туберкулина, насаживают тонкую иглу, выпускают раствор до метки 0,1 мл в стерильный ватный тампон. Ампулу после вскрытия допускается хранить в асептических условиях не более 2 часов.

На внутренней поверхности средней трети предплечья участок кожи обрабатывают 70° этиловым спиртом и просушивают стерильной ватой. Тонкую иглу срезом вверх вводят в верхние слои кожи параллельно ее поверхности — внутрикожно. После введения иглы в кожу из шприца вводят строго по делению шкалы 0,1 мл (2 ТЕ) препарата, т.е. 1 дозу. При правильной технике введения в коже образуется папула беловатого цвета в виде ”лимонной корочки”, размером 7 — 10 мм в диаметре. Пробу Манту ставит по назначению врача специально обученная медсестра, имеющая документ — допуск к проведению туберкулинодиагностики.

Результаты туберкулиновой пробы оценивает врач или специально обученная медсестра. Результат пробы Манту оценивают через 72 ч путем измерения размера инфильтрата (папулы) в мм. Прозрачной линейкой с миллиметровыми делениями измеряют и регистрируют поперечный (по отношению к оси предплечья) размер инфильтрата. Гиперемию учитывают тольво в случае отсутствия инфильтрата. При постановке проб Манту, реакция считается:
— отрицательной — при полном отсутствии инфильтрата (папулы) и гиперемии или при наличии уколочной реакции (0 -1 мм);
— сомнительной — при инфильтрате размером (2-4 мм) или тольсо гиперемии любого размера без инфильтрата;
— положительной — при наличии инфильтрата диаметром 6 мм и более;
— гиперергической — у детей и подростков считается реакция с диаметром инфильтрата 17мм и более, у взрослых — 21мм и более, а также визикулонекротические реакции независимо от размера инфильтрата с лимфангоитом или без него.

Реакция на введение туберкулина

Находится в зависимости от уровня специфической реактивности организма.
У отдельных лиц с высокой степенью гиперчувствительности замедленного типа к
туберкулину, местные реакции могут сопровождаться лимфангоитами и лимфаденитами. Кроме того, иногда наблюдают общую реакцию: недомогание, головная боль, повышение температуры.
Здоровым лицам, с сомнительной или положительной реакцией на пробу Манту и детям с отрицательной реакцией на туберкулин, но не подлежащим вакцинации БЦЖ, все профилактические прививки можно проводить непосредственно после оценки результатов пробы Манту.

Побочные действия

Противопоказания

Распространенные кожные заболевания, эпилепсия, острые, хронические инфекционные и соматические заболевания в период обострения, аллергические состояния (ревматизм в острой и подострой фазах, бронхиальная астма, идиосинкразии с выраженными кожными проявлениями в период обострений). Проба Манту ставится череэ 1 месяц после исчезновения всех клинических симптомов или сразу после снятия карантина. Не допускается проведение пробы Манту в тех детских коллективах, где имеется карантин по детским инфекциям.

Профилактические прививки могут повлиять на чувствительность к туберкулину. Исходя из этого, туберкупинодиагностику необходимо планировать до проведения профилактических прививок против различных инфекций. В случае, если профилактическая прививка была проведена, то туберкулинодиагностика должна осуществляться не ранее, чем через 1 месяц после прививки.
С целью выявления противопокаэаний врач (медицинская сестра) в день постановки туберкулиновых проб проводят опрос и осмотр подвергаемых пробе лиц.

ПРИКАЗ Минздрава РФ от 21-03-2003 109 (ред от 29-10-2009) О СОВЕРШЕНСТВОВАНИИ ПРОТИВОТУБЕРКУЛЕЗНЫХ МЕРОПРИЯТИЙ В РОССИЙСКОЙ. Актуально в 2020 году

ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ ТУБЕРКУЛИНОВЫХ ПРОБ

от 29.10.2009 N 855)

Туберкулинодиагностика — диагностический тест для определения специфической сенсибилизации организма к микобактериям туберкулеза (МБТ). Как специфический тест применяется при массовых обследованиях населения на туберкулез (массовая туберкулинодиагностика) и для индивидуальных обследований (индивидуальная туберкулинодиагностика).

1.1. Цели массовой туберкулинодиагностики:

Выявление лиц, впервые инфицированных МБТ («вираж» туберкулиновых проб);

Выявление лиц с гиперергическими и усиливающимися реакциями на туберкулин;

Отбор контингентов для противотуберкулезной прививки вакциной БЦЖ-М детей в возрасте 2 месяцев и старше, не получивших прививку в роддоме, и для ревакцинации вакциной БЦЖ;

Ранняя диагностика туберкулеза у детей и подростков;

Определение эпидемиологических показателей по туберкулезу (инфицированность населения МБТ, ежегодный риск инфицирования МБТ).

При массовой туберкулинодиагностике применяют только единую внутрикожную туберкулиновую пробу Манту с 2 туберкулиновыми единицами (ТЕ) очищенного туберкулина в стандартном разведении (готовая форма).

1.2. Цели индивидуальной туберкулинодиагностики:

Дифференциальная диагностика поствакцинальной и инфекционной аллергии к туберкулину;

Диагностика и дифференциальная диагностика туберкулеза и других заболеваний;

Определение «порога» индивидуальной чувствительности к туберкулину;

Определение активности туберкулезного процесса;

Оценка эффективности противотуберкулезного лечения.

При индивидуальной туберкулинодиагностике применяют, кроме пробы Манту с 2 ТЕ очищенного туберкулина в стандартном разведении, пробы Манту с различными дозами туберкулина, накожную градуированную пробу Пирке, пробу Коха, определение туберкулинового титра и др. Для проведения индивидуальной туберкулинодиагностики используют: очищенный туберкулин в стандартном разведении и сухой очищенный туберкулин.

Туберкулиновые препараты — препараты из антигенов МБТ или их культуральных фильтратов, обработанных различными способами.

Допускается использование только зарегистрированных в Российской Федерации препаратов туберкулина.

Туберкулиновые препараты используют для туберкулинодиагностики (очищенные туберкулины) и для выявления антител к МБТ (диагностикум эритроцитарный туберкулезный антигенный сухой и ИФА тест-системы).

Изготавливают из смеси убитых нагреванием фильтратов культуры МБТ человеческого и бычьего видов, очищенных ультрафильтрацией, осажденных трихлоруксусной кислотой, обработанных этиловым спиртом и эфиром. Используют два вида очищенного туберкулина.

Аллерген туберкулезный очищенный жидкий (очищенный туберкулин в стандартном разведении) — готовые к употреблению растворы туберкулина. Препарат представляет собой раствор очищенного туберкулина в фосфатном буфере с твином-80 в качестве стабилизатора и фенолом в качестве консерванта, бесцветная прозрачная жидкость. Препарат выпускают в ампулах в виде раствора, содержащего 2 ТЕ ППД-Л в 0,1 мл. Возможен выпуск 5 ТЕ, 10 ТЕ в 0,1 мл и других дозировок препарата. Срок годности — 1 год. Выпуск готовых к употреблению разведений ППД-Л (модификация Линниковой) позволяет использовать в стране для массовой туберкулинодиагностики стандартный по активности препарат и избежать ошибок при разведении туберкулина на местах его применения.

Аллерген туберкулезный очищенный сухой (сухой очищенный туберкулин) — это растворенный в фосфатном буфере с сахарозой лиофильно высушенный очищенный туберкулин. Препарат имеет вид сухой компактной массы или порошка белого (слегка сероватого или кремового) цвета, легко растворяющегося в прилагаемом растворителе — карболизированном изотоническом растворе натрия хлорида. Выпускается в ампулах, содержащих 50000 ТЕ. Срок годности — 5 лет. Сухой очищенный туберкулин используют для диагностики туберкулеза и туберкулинотерапии только в противотуберкулезных диспансерах и стационарах.

Специфическая активность туберкулиновых препаратов устанавливается и контролируется относительно национального стандарта туберкулина ППД.

В каждой коробке с туберкулинами имеется инструкция по применению препаратов с подробной их характеристикой. Ознакомление с этой инструкцией врача и медицинской сестры перед туберкулинодиагностикой обязательно.

Диагностикум эритроцитарный туберкулезный антигенный сухой — бараньи эритроциты, сенсибилизированные фосфатидным антигеном МБТ, пористая масса или порошок красновато-коричневого цвета. Предназначен для выявления в реакции непрямой гемагглютинации (РНГА) специфических антител к антигенам МБТ. В клинике туберкулеза используют как иммунологический тест для определения активности процесса и эффективности лечения. Тест-система иммуноферментная для определения антител к возбудителю туберкулеза. Представляет собой набор ингредиентов для проведения иммуноферментного анализа на твердофазном носителе. Предназначена для выявления антител к возбудителю туберкулеза в сыворотке крови больных. Используют для лабораторного подтверждения диагноза «туберкулез различной локализации», оценки эффективности лечения, назначения специфической иммунокоррекции. Чувствительность иммуноферментного анализа при туберкулезе составляет 60 — 70%, а специфичность около 90%, что не позволяет использовать тест-систему для скрининга туберкулезной инфекции.

Для проведения внутрикожной пробы Манту применяют однограммовые туберкулиновые шприцы разового использования с тонкими короткими иглами с коротким косым срезом. Запрещается применять шприцы и иглы с истекшим сроком годности, поэтому перед употреблением необходимо проверить дату их выпуска и срок годности. Использование инсулиновых шприцев для проведения туберкулинодиагностики запрещается.

Забор туберкулина из ампулы: ампулу с препаратом тщательно обтирают марлей, смоченной 70° этиловым спиртом, затем шейку ампулы подпиливают ножом для вскрытия ампул и отламывают. Извлечение туберкулина из ампулы производят шприцем, которым осуществляют пробу Манту, и иглой N 0845. Набирают 0,2 мл (т.е. две дозы) туберкулина, насаживают иглу туберкулинового шприца, выпускают раствор до метки 0,1 в стерильный ватный тампон. Ампулу после вскрытия сохраняют в асептических условиях не более 2 ч.

Пробу Манту производят пациентам обязательно в положении сидя, так как у эмоционально лабильных лиц инъекция может стать причиной обморока.

На внутренней поверхности средней трети предплечья участок кожи обрабатывают 70° этиловым спиртом, просушивают стерильной ватой. Тонкую иглу вводят срезом вверх в верхние слои натянутой кожи (внутрикожно) параллельно ее поверхности. После введения отверстия иглы в кожу из шприца вводят 0,1 мл раствора туберкулина, т.е. одну дозу. При правильной технике в коже образуется папула в виде «лимонной корочки» размером не мене 7 — 9 мм в диаметре беловатого цвета.

Пробу Манту производит по назначению врача специально обученная медицинская сестра.

Результаты туберкулиновой пробы оценивает врач или специально обученная медсестра, проводившая эту пробу.

Результат пробы Манту оценивают через 72 часа путем измерения размера инфильтрата (папулы) в миллиметрах (мм). Линейкой с миллиметровыми делениями измеряют и регистрируют поперечный (по отношению к оси предплечья) размер инфильтрата. При отсутствии инфильтрата при учете реакции на пробу Манту измеряют и регистрируют гиперемию.

При постановке пробы Манту реакцию считают:

Отрицательной при полном отсутствии инфильтрата (папулы) или гиперемии или при наличии уколочной реакции (0 — 1 мм);

Сомнительной при инфильтрате размером 2 — 4 мм или только гиперемии любого размера без инфильтрата;

Положительной при наличии инфильтрата диаметром 5 мм и более.

Слабоположительными считают реакции с размером инфильтрата 5 — 9 мм в диаметре, средней интенсивности — 10 — 14 мм, выраженными — 15 — 16 мм. Гиперергическими у детей и подростков считают реакции с диаметром инфильтрата 17 и более, у взрослых — 21 мм и более, а также везикуло-некротические реакции независимо от размера инфильтрата с лимфангоитом или без него; усиливающейся реакцией на туберкулин считают увеличение инфильтрата на 6 мм и более по сравнению с предыдущей реакцией.

При массовой туберкулинодиагностике пробу Манту с 2 ТЕ ППД-Л применяют:

а) для раннего выявления начальных и локальных форм туберкулеза у детей и подростков. С этой целью проводят наблюдение за динамикой послевакцинной аллергии и выявление первичного инфицирования («виража» туберкулиновых реакций), а также определяют гиперергические и усиливающиеся реакции у ранее инфицированных туберкулезом лиц;

б) для отбора контингентов, подлежащих ревакцинации против туберкулеза, а также перед первичной вакцинацией детей в возрасте 2 месяца и более, не вакцинированных в роддоме;

в) для определения инфицированности МБТ и риска первичного инфицирования.

Правильная интерпретация реакции на пробу Манту с 2 ТЕ для своевременного выявления групп повышенного риска заболевания и определения инфицированности МБТ обеспечивают соблюдением точной техники проведения туберкулиновой пробы и оценки реакции на нее.

В организованных коллективах массовая туберкулинодиагностика проводится специально обученным медицинским персоналом учреждения или бригадным методом, который является предпочтительным. При бригадном методе обследования детей и подростков формирование специальных бригад (2 медсестры и врач) для массовой туберкулинодиагностики среди организованных детей (детские ясли, сады, школы) и ревакцинации БЦЖ в декретированных возрастных группах школьников возлагают на детские поликлиники. Из имеющихся штатов поликлиник и детских учреждений главным врачом поликлиники выделяется медицинский персонал, а также утверждается график его работы в детских коллективах. Неорганизованным детям раннего и дошкольного возраста пробы Манту с 2 ТЕ ППД-Л ставят в детской поликлинике. В сельской местности туберкулинодиагностику производят районные сельские участковые больницы и фельдшерско-акушерские пункты.

Методическое руководство проведением пробы Манту осуществляет врач-педиатр противотуберкулезного диспансера (кабинета). При отсутствии противотуберкулезного диспансера (кабинета) работу выполняет заведующий поликлиническим отделением по детству (районный педиатр) совместно с участковым врачом-фтизиатром.

Здоровым детям и подросткам, инфицированным МБТ, а также с положительной (сомнительной) послевакцинной туберкулиновой чувствительностью и детям с отрицательной реакцией на туберкулин, но не подлежащим ревакцинации БЦЖ, все профилактические прививки можно производить непосредственно после оценки результатов пробы Манту. В случае установления «виража» туберкулиновых реакций, а также гиперергической или усиливающейся реакции на туберкулин, без функциональных и локальных проявлений туберкулеза у детей, профилактические прививки проводятся не раньше чем через 6 месяцев.

Результаты пробы Манту у детей и подростков фиксируют в учетной форме N 063/у, в медицинской карте ребенка (форма N 026/у) и в истории развития ребенка (форма N 112/у). При этом отмечают: а) предприятие — изготовитель туберкулина, номер серии, срок годности; б) дату проведения пробы; в) введение препарата в правое или левое предплечье; г) результат пробы — в виде размера инфильтрата (папулы) в мм; при отсутствии инфильтрата указывают размер гиперемии.

При поступлении ребенка в детский стационар, санаторий или санаторно-оздоровительное учреждение в историю развития, медицинскую карту ребенка (ф. N 112/у или ф. N 026/у) или в выписку из истории болезни обязательно переносят все данные о предыдущих внутрикожных туберкулиновых пробах. Сведения о профилактических прививках и результатах туберкулиновых проб (форма N 063/у) передают в подростковые кабинеты амбулаторно-поликлинических учреждений при достижении ребенком 15-летнего возраста, а также по месту учебы подростка — в средние специальные учебные заведения (ПТУ, техникумы, училища), в вуз.

При правильной организации мероприятий по раннему выявлению туберкулеза ежегодно туберкулинодиагностикой должно охватываться 90 — 95% детского и подросткового населения административной территории.

Проба Манту с 2 ТЕ ППД-Л безвредна как для здоровых детей и подростков, так и для лиц с различными соматическими заболеваниями. Однако перенесенные заболевания и предшествующие прививки могут влиять на чувствительность кожи ребенка к туберкулину, усиливая или ослабляя ее. Это затрудняет последующую интерпретацию динамики чувствительности к туберкулину и является основой при определении перечня противопоказаний.

Противопоказания для постановки туберкулиновых проб с 2 ТЕ в период массовой туберкулинодиагностики:

Кожные заболевания, острые и хронические инфекционные и соматические заболевания (в том числе эпилепсия) в период обострения;

Аллергические состояния, ревматизм в острой и подострой фазах, бронхиальная астма, идиосинкразии с выраженными кожными проявлениями в период обострения.

С целью выявления противопоказаний врач (медицинская сестра) перед постановкой туберкулиновых проб проводит изучение медицинской документации, а также опрос и осмотр подвергаемых пробе лиц. Не допускается проведение пробы Манту в тех детских коллективах, где имеется карантин по детским инфекциям. Пробу Манту ставят через 1 месяц после исчезновения клинических симптомов или сразу после снятия карантина.

Профилактические прививки также могут влиять на чувствительность к туберкулину. Исходя из этого туберкулинодиагностику необходимо планировать до проведения профилактических прививок против различных инфекций (АКДС, кори и т.д.). В случаях, если по тем или иным причинам пробу Манту производят не до, а после проведения различных профилактических прививок, туберкулинодиагностика должна осуществляться не ранее чем через 1 месяц после прививки.

С целью раннего выявления туберкулеза пробу Манту с 2 ТЕ ставят всем вакцинированным против туберкулеза детям с 12-месячного возраста и подросткам ежегодно независимо от предыдущего результата.

Детям, не привитым вакциной БЦЖ в период новорожденности, при сохранении медицинских противопоказаний пробу Манту ставят 2 раза в год, начиная с 6-месячного возраста до получения ребенком прививки вакциной БЦЖ-М. Пробу Манту проводят на внутренней поверхности предплечья: правое и левое предплечье чередуют. Рекомендуется проведение туберкулиновой пробы осуществлять в одно и то же время года, преимущественно осенью.

С целью установления первичного инфицирования при массовой туберкулинодиагностике необходимо направлять к фтизиатру следующих детей:

С подозрением на «вираж» туберкулиновых проб;

С усиливающейся чувствительностью к туберкулину;

С гиперергической чувствительностью к туберкулину.

Дети, направляемые к фтизиатру, должны иметь при себе сведения:

О вакцинации (ревакцинации БЦЖ);

О результатах туберкулиновых проб по годам;

О контакте с больным туберкулезом;

О флюорографическом обследовании окружения ребенка;

О перенесенных хронических и аллергических заболеваниях;

О предыдущих обследованиях у фтизиатра;

Данные клинико-лабораторного обследования (общий анализ крови и мочи);

Заключение соответствующих специалистов при наличии сопутствующей патологии.

При решении врачом вопроса о том, связана ли положительная реакция на туберкулин у ребенка (подростка) с инфицированием МБТ или она отражает послевакцинную аллергию, следует учитывать:

Интенсивность положительной туберкулиновой реакции;

Количество полученных прививок БЦЖ;

Наличие и размер послевакцинных рубчиков;

Срок, прошедший после прививки;

Наличие или отсутствие контакта с больным туберкулезом;

Наличие клинических признаков заболевания.

При интерпретации динамики чувствительности к туберкулину следует также учитывать, что на интенсивность реакций на пробу Манту может влиять ряд факторов, определяющих общую реактивность организма: наличие соматической патологии, общая аллергическая настроенность организма, фаза овариального цикла у девушек, индивидуальный характер чувствительности кожи, сбалансированность питания ребенка и пр. Выраженное воздействие на результаты массовой туберкулинодиагностики оказывают неблагоприятные экологические факторы: повышенный радиационный фон, наличие вредных выбросов химических производств и т.д. На результаты туберкулинодиагностики могут влиять различные нарушения в методике ее проведения: применение нестандартного и некачественного инструментария, погрешности в технике постановки и чтения результатов пробы Манту, нарушение режима транспортирования и хранения туберкулина.

Впервые положительную реакцию (папула 5 мм и более), не связанную с иммунизацией вакциной БЦЖ («вираж»);

Стойко (на протяжении 4 — 5 лет) сохраняющуюся реакцию с инфильтратом 12 мм и более;

Резкое усиление чувствительности к туберкулину (на 6 мм и более) в течение одного года (у туберкулиноположительных детей и подростков);

Постепенное, в течение нескольких лет, усиление чувствительности к туберкулину с образованием инфильтрата размерами 12 мм и более.

Все дети (старше трех лет), у которых произошел переход ранее отрицательных туберкулиновых реакций в положительные, а также дети с усиливающейся чувствительностью к туберкулину при наличии контакта с больным туберкулезом, после исключения активного туберкулезного процесса, берутся на учет ПТД по VI группе.

Первая положительная реакция на туберкулин у двух-трехлетнего ребенка может быть проявлением поствакцинальной аллергии. Избежать случаев гипо- или гипердиагностики при решении вопроса о необходимости наблюдения в противотуберкулезном диспансере позволит объективная оценка состояния ребенка, эпидемиологического анамнеза, а также динамическое наблюдение за ребенком в «0» группе с повторной туберкулинодиагностикой через 3 месяца. Осмотр данных детей проводят в учреждениях общей лечебной сети.

Нарастание чувствительности к туберкулину (в т.ч. и гиперергические реакции) у детей и подростков с соматической патологией, бактериальной инфекцией, аллергическими, частыми простудными заболеваниями иногда связано не с инфицированием МБТ, а с влиянием перечисленных неспецифических факторов. При трудности интерпретации характера чувствительности к туберкулину дети также подлежат предварительному наблюдению в «0» группе диспансерного учета с обязательным проведением лечебно-профилактических мероприятий на педиатрическом участке (гипосенсибилизация, санация очагов инфекции, дегельминтизация, достижение периода ремиссии при хронических заболеваниях) под контролем детского фтизиатра. Повторное обследование в диспансере проводят через 1 — 3 месяца. Снижение после неспецифического лечения чувствительности к туберкулину свидетельствует о неспецифическом характере аллергии. Детям с частыми клиническими проявлениями неспецифической аллергии пробу Манту 2 ТЕ рекомендуется ставить на фоне приема десенсибилизирующих средств в течение 7 дней (5 дней до постановки и 2 дня после нее). Сохранение чувствительности к туберкулину на прежнем уровне либо ее дальнейшее нарастание, несмотря на лечебно-профилактические мероприятия, подтверждает инфекционный характер аллергии и требует последующего диспансерного наблюдения ребенка.

Диагностические мероприятия при постановке ребенка на учет в диспансерную группу включают:

Туберкулинодиагностику (проба Манту с 2 ТЕ, накожная градуированная проба);

Общие клинические анализы крови и мочи.

Целью ежегодного проведения пробы Манту заведомо инфицированным МБТ детям и подросткам является выявление лиц с гиперергическими реакциями или с резким усилением реакций меньшего размера, что указывает на риск развития локального туберкулеза.

С целью отбора детей и подростков для ревакцинации БЦЖ пробу Манту с 2 ТЕ ППД-Л ставят в декретированных возрастных группах — 7 лет (0 — 1 классы средней школы) и 14 лет (8 — 9 классы). Ревакцинацию проводят не инфицированным туберкулезом, клинически здоровым лицам с отрицательной реакцией на пробу Манту с 2 ТЕ ППД-Л.

Индивидуальная туберкулинодиагностика применяется для диагностики локального туберкулеза по клиническим показаниям, независимо от срока постановки предшествующей пробы. Противопоказаний, кроме индивидуальной непереносимости туберкулина, не имеется.

Диагностическую туберкулиновую пробу с использованием очищенного туберкулина в стандартном разведении (2 ТЕ) можно проводить в противотуберкулезных диспансерах, детских поликлиниках, соматических и инфекционных стационарах.

Диагностическую туберкулиновую пробу с использованием сухого очищенного туберкулина (Приложение N 1) можно проводить только в противотуберкулезных диспансерах, туберкулезных стационарах и санаториях.

Индивидуальная туберкулинодиагностика как диагностический тест проводится в следующих случаях:

При наличии хронических заболеваний различных органов и систем с торпидным, волнообразным течением, при неэффективности традиционных методов лечения и наличии дополнительных факторов риска по инфицированию МБТ и заболеванию туберкулезом (контакт с больным туберкулезом, отсутствие вакцинации против туберкулеза, социальные факторы риска и т.д.);

Для определения активности туберкулезного процесса;

Для определения локализации туберкулезного процесса;

Для оценки эффективности проведенного противотуберкулезного лечения.

Для индивидуальной диагностики используют пробу Манту с 2 ТЕ очищенного туберкулина в стандартном разведении, накожная градуированная проба, внутрикожные пробы Манту с различными разведениями сухого очищенного туберкулина, определение внутрикожного туберкулинового титра. Техника проведения данных методик диагностики отражена в инструкции по применению аллергена туберкулезного очищенного сухого.

Дети, нуждающиеся в постановке туберкулиновой пробы с 2 ТЕ 2 раза в год в условиях общей лечебной сети:

Больные сахарным диабетом, язвенной болезнью, болезнями крови, системными заболеваниями, ВИЧ-инфицированные, получающие длительную гормональную терапию (более 1 месяца);

С хроническими неспецифическими заболеваниями (пневмонией, бронхитом, тонзиллитом), субфебрилитетом неясной этиологии;

Не вакцинированные против туберкулеза, независимо от возраста ребенка.

В приютах, центрах временной изоляции несовершеннолетних правонарушителей, приемниках-распределителях и в других учреждениях для детей и подростков из социальных групп риска, не имеющих медицинской документации, туберкулиновую пробу Манту с 2 ТЕ ППД-Л проводят при поступлении ребенка в это учреждение и далее 2 раза в год в течение 2-х лет при непрерывном медицинском наблюдении с последующим переходом на ежегодную туберкулинодиагностику.

Детям и подросткам из социальных групп риска (включая мигрантов и беженцев), имеющим медицинскую документацию, при оформлении в детские и подростковые коллективы туберкулиновую пробу Манту с 2 ТЕ ППД-Л проводят, если после предыдущей пробы прошло более 6 месяцев, с последующей постановкой 1 раз в год при регулярном медицинском наблюдении.

Все дети и подростки из социальных групп риска, имеющие выраженную реакцию на туберкулин (папула размером 15 мм и более), должны быть обследованы и наблюдаться в противотуберкулезных диспансерах (в VI-Б группе).

1. Бикс размером 18 x 14 см со стерильными ватными шариками.

2. Туберкулиновые шприцы одноразового использования с тонкими короткими иглами с коротким косым срезом.

3. Линейки миллиметровые длиной 100 мм из пластмассы.

4. Флакон емкостью 50 мл с нашатырным спиртом.

5. Флакон емкостью 50 мл с этиловым спиртом.

6. Иглы инъекционные N 0840 для извлечения туберкулина из флакона.

7. Пинцеты анатомические длиной 15 см.

Составление плана туберкулинодиагностики в зоне обслуживания амбулаторно-поликлинических учреждений осуществляют главные врачи учреждений при участии противотуберкулезных диспансеров.

Сводный план, предусматривающий количество обследуемых детей, подростков и взрослых, как с целью ранней диагностики, так и отбора контингентов для ревакцинации БЦЖ по области, городу, району, составляет центр государственного санитарно-эпидемиологического надзора совместно с главными педиатрами (терапевтами) и противотуберкулезными диспансерами.

В плане туберкулинодиагностики по области, городу, району предусматривают:

Учет всех детей, подростков и взрослых, подлежащих ежегодной туберкулинодиагностике, с выделением возрастных групп, подлежащих ревакцинации;

Календарный план обследования контингентов;

Подготовку медицинского персонала для проведения туберкулинодиагностики;

Приобретение необходимого количества инструментария;

Расчет потребности в туберкулине.

Потребность в очищенном туберкулине в стандартном разведении (2 ТЕ ППД-Л) исчисляют из расчета две дозы по 0,1 мл на каждого обследуемого. При этом необходимо учитывать, что в ампуле содержится 30 доз (3 мл), которые используют на постановку пробы 15 людям. Один литр туберкулина содержит 10000 доз, которые используют для обследования 5000 человек.

Приложение N 1
к Инструкции по применению
туберкулиновых проб

Сухой очищенный туберкулин представляет собой смесь фильтратов убитых нагреванием культур микобактерий туберкулеза (МБТ) человеческого и бычьего видов, очищенных ультрафильтрацией, осажденных трихлоруксусной кислотой, обработанных этиловым спиртом и эфиром для наркоза, растворенных в фосфатно-буферном растворе с сахарозой и лиофилизированных. Препарат имеет вид сухой компактной массы или аморфного порошка серовато-белого цвета, легко растворяется в прилагаемом растворителе — карболизированном растворе натрия хлорида. Препарат выпускают в ампулах; одна ампула содержит 50000 туберкулиновых единиц (ТЕ).

Биологические и иммунологические свойства. Действующее начало препарата аллерген — туберкулопротеин, вызывает при постановке кожных туберкулиновых проб у инфицированных или вакцинированных лиц специфическую реакцию гиперчувствительности замедленного типа в виде местной реакции — гиперемии и инфильтрата (папулы).

Назначение. Препарат предназначен для диагностики туберкулеза в условиях противотуберкулезного диспансера или специализированной клиники.

Способ применения и дозировка. Применяют для постановки внутрикожной пробы Манту с различными дозами туберкулина, для накожных и подкожных туберкулиновых проб (градуированная кожная проба, подкожная проба, определение туберкулинового подкожного и внутрикожного титра, эозинофильно-туберкулиновая проба, гемо-белково-туберкулиновая проба и другие).

Туберкулиновые пробы проводят пациентам в положении сидя, т.к. у эмоционально лабильных людей инъекция может стать причиной обморока.

Разведения сухого очищенного туберкулина готовят следующим образом: ампулу протирают марлей, смоченной 70° этиловым спиртом, затем шейку ампулы подпиливают ножом для вскрытия ампул и отламывают. Аналогичным образом вскрывают ампулу с растворителем.

Для внутрикожных проб сухой очищенный туберкулин разводят следующим образом: содержимое ампулы разводят 1 мл растворителя и получают таким образом основное разведение — 50000 ТЕ в 1 мл.

1-е разведение, соответствующее 1000 ТЕ в 0,1 мл, готовят, добавив в ампулу с основным разведением еще 4 мл растворителя — карболизированного раствора натрия хлорида (либо во флакон наливают 2 мл карболизированного изотонического раствора натрия хлорида и добавляют туда 0,5 мл основного разведения).

Растворитель — карболизированный раствор натрия хлорида готовят в аптеке прибавлением к 100 мл стерильного 0,9% раствора натрия хлорида 0,25 г кристаллического фенола; растворитель стерилизуют в автоклаве.

Все последующие разведения готовят, разводя предыдущее в соотношении 1:10, тщательно их перемешивая. Например, 2-е разведение: к 1 мл 1-го разведения добавить 9 мл растворителя, что соответствует 100 ТЕ в 0,1 мл. Аналогичным образом из 2-го разведения готовят 3-е (10 ТЕ в 0,1 мл) и т.д.

Для получения 2 ТЕ в 0,1 мл к 1 мл 3-го разведения туберкулина следует добавить 4 мл растворителя.

Разведения туберкулина сохраняют в асептических условиях не более 2 ч.

Туберкулиновые пробы с использованием сухого очищенного туберкулина ставят по назначению фтизиатра. Постановку и оценку туберкулиновых проб проводит врач или специально обученная медицинская сестра под наблюдением врача.

Внутрикожная проба Манту.

Внутрикожную пробу Манту проводят строго асептически следующим образом: вскрывают ампулу и готовят соответствующее разведение, как описано выше. Одноразовым туберкулиновым шприцем со стерильной иглой N 845 набирают 0,2 мл туберкулина, затем на шприц надевают прилагаемую к нему стерильную иглу и в ватный тампон выпускают туберкулин вместе с пузырьками воздуха до метки 0,1 мл. Кожу средней трети внутренней поверхности предплечья обрабатывают 70° этиловым спиртом и просушивают стерильной ватой. Кожу фиксируют снизу левой рукой так, чтобы на внутренней поверхности она была натянута, и вводят строго внутрикожно 0,1 мл препарата. При этом образуется инфильтрат беловатого цвета (лимонная корочка) диаметром 8 — 10 мм. Для каждого обследуемого употребляют отдельный стерильный шприц и иглу.

Определение туберкулинового внутрикожного титра.

Сухой туберкулин в разведениях 1 ТЕ в 0,1 мл, 0,1 ТЕ в 0,1 мл и 0,01 ТЕ в 0,1 мл (готовят, как описано выше) вводят по методу Манту одновременно в одно предплечье. При отрицательных результатах пробу с более концентрированным туберкулином (3-е разведение) повторяют на другой руке не ранее чем через 96 часов. При отсутствии реакции на 3-е разведение туберкулина пробы со вторым и первым разведениями ставят последовательно через 36 ч каждое в разные предплечья.

Титрование завершают по достижении положительной реакции на внутрикожную пробу (папула не менее 5 мм в диаметре), полученной на наименьшее разведение туберкулина.

Градуированная скарификационная накожная проба.

Градуированную кожную пробу производят одновременно растворами сухого очищенного туберкулина 100%, 25%, 5% и 1%.

Для приготовления 100% туберкулина, содержащего 100000 ТЕ в 1,0 мл, 2 ампулы с препаратом вскрывают, как описано выше, содержимое ампул разводят последовательно в 1 мл растворителя. Для приготовления растворов 25% туберкулина в стерильный флакон наливают 1,5 мл карболизированного растворителя и добавляют туда 0,5 мл 100% раствора туберкулина. Для приготовления туберкулина 5%-ной концентрации во флакон наливают 2 мл растворителя и добавляют туда 0,5 мл 25% раствора туберкулина. Для получения 1% концентрации во флакон с 2 мл растворителя добавляют 0,5 мл 5% раствора туберкулина.

Капли с приготовленным раствором туберкулина наносят пипетками на подготовленную (см. выше) кожу предплечья на расстоянии 2 — 3 см друг от друга. В верхней части предплечья наносят каплю 100% раствора, а ниже — капли убывающей концентрации. Еще ниже в качестве контроля наносят каплю растворителя. Для каждого раствора используют отдельные маркированные пипетки.

Кожу фиксируют, как при постановке внутрикожной пробы (см. выше). Затем оспопрививательным ланцетом нарушают целостность поверхностных слоев кожи в виде царапины длиной 5 мм, проведенной через каплю туберкулина в направлении продольной оси руки. Плоской стороной ланцета производят втирание туберкулина (2 — 3 раза). Скарификацию проводят сначала через каплю растворителя, затем последовательно через капли 1%, 5%, 25% и 100% растворов туберкулина. Скарифицированный участок кожи оставляют открытым на 5 мин. для подсушивания капель туберкулина. Для каждого обследуемого используют стерильный ланцет.

Для определения туберкулинового подкожного титра, проведения подкожной пробы, для эозинофильно-туберкулиновой, гемо-белково-туберкулиновой и других проб сухой очищенный туберкулин и его разведения применяют по специальным методикам.

Учет результатов. Результаты накожной и внутрикожных туберкулиновых проб оценивают через 72 часа, измеряя прозрачной миллиметровой линейкой поперечный к оси руки диаметр инфильтрата (папулы). Зону гиперемии при этом не учитывают. При величине папулы от 0 до 1 мм реакцию считают отрицательной, от 2 до 4 мм — сомнительной, от 5 мм и более — положительной. У детей и подростков реакцию 17 мм и более, у взрослых 21 мм и более, а также везикуло-некротическую реакцию независимо от размера инфильтрата с лимфангоитом или без него считают гиперергической.

Реакция на внутрикожное и накожное введение туберкулина зависит от уровня специфической реактивности организма:

а) в случае отсутствия состояния специфической реактивности местных и общих явлений не наблюдают — реакцию на туберкулин оценивают как отрицательную;

б) при инфицировании МБТ или наличии поствакцинальной аллергии наблюдают местную реакцию в виде инфильтрата (папулы) и гиперемии. В некоторых случаях у лиц с высокой степенью гиперчувствительности замедленного типа к туберкулину местные реакции, наряду с большой папулой, могут сопровождаться лимфангоитами и лимфаденитами. Кроме того, иногда наблюдают общую реакцию: недомогание, головные боли, повышение температуры и т.д.

Противопоказания для постановки туберкулиновых проб.

При дифференциальной диагностике туберкулеза и других заболеваний противопоказания к постановке пробы учитывают индивидуально. Нежелательно проводить туберкулинодиагностику с использованием сухого очищенного туберкулина в период обострения хронических аллергических заболеваний.

Форма выпуска. Препарат выпускают в ампулах вместимостью 5 мл; каждая ампула содержит 50000 ТЕ. К препарату прилагают растворитель — карболизированный раствор натрия хлорида (0,9% раствор натрия хлорида с 0,25% фенола), в ампулах вместимостью 1 мл. В одной пачке (коробке) 5 ампул с сухим очищенным туберкулином, 5 ампул с растворителем, инструкция по применению препарата и нож для вскрытия ампул.

Условия хранения и транспортирования. Препарат хранят в закрытых, сухих, темных помещениях при температуре от 2 до 8 °C, транспортируют всеми видами крытого транспорта в условиях, исключающих замораживание и перегрев выше 25 °C.

Приложение N 2
к Инструкции по применению
туберкулиновых проб

(в ред. Приказа Минздравсоцразвития РФ от 29.10.2009 N 855)

Аллерген туберкулезный рекомбинантный в стандартном разведении (далее — препарат) представляет собой рекомбинантный белок, продуцируемый генетически модифицированной культурой Escherichia coli BL21(DE3)/pCFP-ESAT. Препарат содержит два связанных между собой антигена — CFP10 и ESAT6, присутствующие в вирулентных штаммах микобактерий туберкулеза, в том числе M.tuberculosis и M.bovis. Эти антигены отсутствуют в штаммах БЦЖ M.bovis, из которого готовятся вакцины туберкулезные — БЦЖ и БЦЖ-М. Одна доза (0,1 мл) препарата содержит: рекомбинантный белок CFP10-ESAT6 (0,2 мкг), фенол (0,25 мг) в качестве консерванта, полисорбат 80 (твин 80) в качестве стабилизатора, натрий фосфорно-кислый двузамещенный 2-водный, натрия хлорид, калий фосфорно-кислый однозамещенный, воду для инъекций — до 0,1 мл.

Биологические и иммунологические свойства.

Препарат предназначен для повышения качества диагностики туберкулезной инфекции. Действие препарата основано на выявлении клеточного иммунного ответа на специфические для микобактерий туберкулеза (далее — МБТ) антигены.

Препарат не обладает сенсибилизирующим действием, не токсичен. При внутрикожном введении вызывает у лиц с туберкулезной инфекцией специфическую кожную реакцию гиперчувствительности замедленного типа (далее — ГЗТ).

По результатам проведенных исследований установлено, что чувствительность (частота положительных ответных реакций у лиц с активной туберкулезной инфекцией) внутрикожной пробы с препаратом сопоставима с чувствительностью туберкулиновой пробы, а его специфичность (частота отсутствия реакции на препарат у здоровых лиц) выше, чем у туберкулина, так как в отличие от туберкулина у вакцинированных БЦЖ, но не инфицированных МБТ лиц препарат не вызывает ответную реакцию ГЗТ. В связи с тем, что препарат не вызывает реакцию ГЗТ, связанную с вакцинацией БЦЖ, проба с препаратом не может быть использована вместо туберкулинового теста для отбора лиц на первичную вакцинацию и ревакцинацию БЦЖ.

Препарат используется во всех возрастных группах с целью:

1) диагностики туберкулеза и оценки активности процесса;

2) дифференциальной диагностики туберкулеза;

3) дифференциальной диагностики поствакцинальной и инфекционной аллергии (гиперчувствительности замедленного типа);

4) наблюдения за эффективностью лечения в комплексе с другими методами.

Для практического использования внутрикожную пробу с препаратом применяют в противотуберкулезных учреждениях или, при отсутствии таковых, по назначению врача-фтизиатра и при его методическом обеспечении.

Для раннего выявления туберкулеза внутрикожную пробу с препаратом проводят:

лицам, направленным в противотуберкулезное учреждение для дообследования на наличие туберкулезного процесса;

лицам, относящимся к группам высокого риска по заболеванию туберкулезом с учетом эпидемиологических, медицинских и социальных факторов риска;

лицам, направленным к фтизиатру по результатам массовой туберкулинодиагностики.

Факторами высокого риска заболевания туберкулезом являются:

1) эпидемиологические (контакт с больным туберкулезом человеком или животным);

сахарный диабет, язвенная болезнь, психоневрологическая патология, частые ОРВИ в анамнезе;

хронические заболевания различных органов и систем при торпидном, волнообразном течении и неэффективности традиционных методов лечения;

длительный прием (более месяца) цитостатических, глюкокортикоидных препаратов, иммунодепрессантов;

ВИЧ-инфекция, перинатальный контакт у детей по ВИЧ-инфекции;

Алкоголизм, наркомания, пребывание в местах лишения свободы, безработица;

Беспризорность детей и подростков, попадание детей в детские приюты, детские дома, социальные центры и т.д.;

Для дифференциальной диагностики туберкулеза и других заболеваний внутрикожную пробу с препаратом проводят в комплексе с клинико-лабораторным и рентгенологическим обследованием в условиях противотуберкулезного учреждения.

Для наблюдения за пациентами, состоящими на учете у фтизиатра с различными проявлениями туберкулезной инфекции, в условиях противотуберкулезного учреждения (все контингенты ПТД) внутрикожную пробу с препаратом проводят при контрольном обследовании во всех группах диспансерного учета с интервалом 3 — 6 месяцев.

Способ применения и дозировка.

Назначение и методическое руководство проведением пробы осуществляет врач-фтизиатр. Проба проводится детям, подросткам и взрослым специально обученной медицинской сестрой, имеющей допуск к проведению внутрикожных тестов. Препарат вводят строго внутрикожно. Для проведения пробы применяют только туберкулиновые шприцы и тонкие короткие иглы с косым срезом. Перед употреблением необходимо проверить дату их выпуска и срок годности. Запрещается применять шприцы, предназначенные для инъекций инсулина.

Резиновую пробку флакона с препаратом обрабатывают 70% этиловым спиртом. Для забора препарата из флакона используется тот же шприц, который будет использован для инъекции (СП 3.3.2342-08 от 03.03.2008). Если туберкулиновые шприцы имеют съемные иглы, пробку флакона прокалывают отдельной иглой для подкожных или внутримышечных инъекций, которую после каждого забора препарата в шприц оставляют в пробке, накрыв стерильной салфеткой. Туберкулиновым шприцем набирают 0,2 мл (две дозы) препарата и выпускают раствор до метки 0,1 мл в стерильный ватный тампон. Флакон с препаратом после вскрытия допускается хранить не более 2 часов в защищенном от света месте.

Пробу проводят обследуемым в положении сидя. После обработки участка кожи на внутренней поверхности средней трети предплечья 70% этиловым спиртом в верхние слои натянутой кожи, параллельно ее поверхности, вводят 0,1 мл препарата. При постановке пробы, как правило, в коже образуется папула в виде «лимонной корочки» беловатого цвета диаметром 7 — 10 мм. Если на одном предплечье ставилась проба с туберкулином, препарат вводят в другое предплечье.

Лицам, у которых в анамнезе имелись проявления неспецифической аллергии, пробу рекомендуется проводить на фоне приема десенсибилизирующих препаратов в течение 7 дней (5 дней до постановки пробы и 2 дня после нее).

Учет и интерпретация результатов.

В учетных документах после постановки пробы с препаратом отмечают:

а) название препарата;

б) предприятие-изготовитель, номер серии, срок годности;

В) дату проведения пробы;

г) результат — реакция на пробу.

Результат пробы оценивает врач или обученная медсестра через 72 часа с момента ее проведения путем измерения поперечного (по отношении к оси предплечья) размера гиперемии и инфильтрата (папулы) в миллиметрах прозрачной линейкой. Гиперемию учитывают только в случае отсутствия инфильтрата.

Ответная реакция на пробу считается:

отрицательной — при полном отсутствии инфильтрата и гиперемии или при наличии «уколочной реакции»;

сомнительной — при наличии гиперемии без инфильтрата;

Положительной — при наличии инфильтрата (папулы) любого размера.

Условно различают следующие ответные кожные реакции на препарат:

Слабо выраженная — при наличии инфильтрата размером до 5 мм;

умеренно выраженная — при размере инфильтрата 5 — 9 мм;

выраженная — при размере инфильтрата 10 мм и более;

гиперергическая — при размере инфильтрата 15 мм и более, при везикуло-некротических изменениях и (или) лимфангоите, лимфадените независимо от размера инфильтрата.

В отличие от реакции ГЗТ кожные проявления неспецифической аллергии (в основном гиперемия) на препарат, как правило, наблюдаются сразу после постановки пробы и через 48 — 72 ч обычно исчезают.

Отрицательная реакция на пробу.

Кожная ГЗТ к препарату, как правило, отсутствует:

1) у лиц, не инфицированных МБТ;

2) у лиц, ранее инфицированных МБТ с неактивной туберкулезной инфекцией;

3) у больных туберкулезом в период завершения инволюции туберкулезных изменений при отсутствии клинических, рентгено-томографических, инструментальных и лабораторных признаков активности процесса;

4) у лиц, излечившихся от туберкулеза.

Одновременно проба с препаратом может быть отрицательной у больных туберкулезом с выраженными иммунопатологическими нарушениями, обусловленными тяжелым течением туберкулезного процесса, у лиц на ранних стадиях инфицирования МБТ, на ранних стадиях туберкулезного процесса, у лиц, имеющих сопутствующие заболевания, сопровождающиеся иммунодефицитным состоянием. В связи с этим при наличии характерных клинико-рентгенологических признаков туберкулеза отрицательная реакция на препарат не должна препятствовать проведению дальнейших мероприятий по диагностике туберкулезной инфекции.

Лица с сомнительной и положительной реакцией на препарат подлежат обследованию на туберкулез.

Лица старше 18 лет, у которых впервые установлена сомнительная или положительная проба с препаратом, подлежат полному клинико-рентгенологическому обследованию в противотуберкулезном диспансере. По итогам обследования, при отсутствии у указанной группы лиц признаков локального туберкулеза, им показано наблюдение у фтизиатра по «0» группе диспансерного учета с проведением лечебно-профилактических мероприятий (по показаниям).

Детям и подросткам при наличии сомнительной или положительной реакции на препарат показано полное обследование на туберкулез с последующим лечением и наблюдением в соответствующей группе диспансерного учета. При отрицательном результате реакции на препарат лечение по поводу туберкулезной инфекции не показано. Повторная постановка пробы — через 2 месяца.

Противопоказания для постановки пробы:

1) острые и хронические (в период обострения) инфекционные заболевания, за исключением случаев, подозрительных на туберкулез;

2) соматические и др. заболевания в период обострения;

3) распространенные кожные заболевания;

4) аллергические состояния;

В детских коллективах, где имеется карантин по детским инфекциям, проба проводится только после снятия карантина.

В случаях дифференциальной диагностики локального туберкулеза и других заболеваний, кроме индивидуальной непереносимости туберкулина, противопоказаний для постановки пробы с препаратом не имеется.

У отдельных лиц, как и при проведении туберкулинодиагностики, могут наблюдаться кратковременные признаки общей неспецифической реакции: недомогание, головная боль, повышение температуры тела.

Новый кожный тест при диагностике и раннем выявлении туберкулеза у лиц из групп риска

Анализ эпидемической ситуации по туберкулезу начиная с 90‑х годов свидетельствует о подъеме эндемии заболевания. Отмечается значительное увеличение заболеваемости как населения в целом, так и детей, особенно в группах риска [1]

Анализ эпидемической ситуации по туберкулезу начиная с 90?х годов свидетельствует о подъеме эндемии заболевания. Отмечается значительное увеличение заболеваемости как населения в целом, так и детей, особенно в группах риска [1]. Показатели заболеваемости туберкулезом в группах риска превышают общие показатели в 10 раз (заболеваемость в очагах туберкулеза взрослого населения в 2008 г. составила 864,8 на 100 тыс. контактов, детского — 541,0). В связи с этим совершенствование мероприятий по раннему выявлению заболевания в наиболее подверженных угрозе группах населения является важной задачей фтизиатрии.

Согласно Федеральному закону № 77?ФЗ «О предупреждении распространения туберкулеза в Российской Федерации» от 18 июня 2001 г. массовое ежегодное обследование населения для активного выявления туберкулеза проводится у взрослых методом флюорографии, у детей с помощью туберкулинодиагностики. При выявлении каких-либо изменений лица с подозрением на заболевание туберкулезом направляются во фтизиатрические учреждения. Дообследование включает в себя использование различных методов — инструментальных, лабораторных, клинико-рентгенологических, часть из которых являются дорогостоящими. К сожалению, данные методы не позволяют выявить туберкулез на ранней стадии развития болезни в период латентной туберкулезной инфекции. Единственным методом, выявляющим туберкулез на раннем этапе, является туберкулинодиагностика. В условиях массовой вакцинопрофилактики туберкулеза в детском возрасте возникают трудности дифференциальной диагностики поствакцинальной и инфекционной аллергии (реакция Манту с двумя туберкулиновыми единицами (РМ с 2ТЕ), положительная во всех случаях), а у взрослых большинство лиц уже инфицировано микобактериями туберкулеза (МБТ) и туберкулинодиагностика не может быть использована для раннего выявления заболевания. Вышеизложенное обосновывает необходимость разработки методики раннего выявления заболевания при обследовании групп риска по заболеванию туберкулезом.

Многие годы в мире ведется интенсивный поиск антигенных детерминант, присущих только Mycobacterium tuberculosis и позволяющих дифференцировать вакцинальный иммунитет, развивающийся в результате вакцинации бациллой Кальмета–Герена (БЦЖ), иммунные реакции на непатогенные микобактерии и инфекцию, вызванную M. tuberculosis. Обнаружить антигены, свойственные только M. tuberculosis, удалось лишь после завершения исследования по первичной структуре генома M. tuberculosis. Было установлено, что M. tuberculosis кодирует синтез двух секреторных белков ESAT-6 и CFP-10, которые отсутствуют у M. bovis и большинства непатогенных микобактерий. На основании полученных результатов разработаны такие диагностические тесты, как квантиферон и Т-СПОТ. Данные методики нашли широкое применение во многих странах мира, и в настоящее время проводятся исследования по внедрению их в России. К сожалению, одной из трудностей для широкого их использования является большая трудоемкость и высокая себестоимость. Кроме того, в детской практике необходимость забора крови из вены у ребенка также является препятствием для повсеместного внедрения.

В настоящее время в Российской Федерации разработан новый эффективный метод диагностики начальных проявлений туберкулеза — Диаскинтест®. Диаскинтест® это аллерген туберкулезный рекомбинантный в стандартном разведении, представляет собой рекомбинантный белок (ESAT/CFP), продуцируемый генетически модифицированной культурой Escherichia coli BL21(DE3)/pCFP-ESAT. Комбинация двух антигенов, присутствующих в вирулентных штаммах МБТ и отсутствующих в вакцинном штамме БЦЖ и штаммах других непатогенных микобактерий, делает тест высокоспецифичным [5–13]. В отличие от квантиферона и Т-СПОТ, широко применяемых в других странах, Диаскинтест® вводится внутрикожно и вызывает у лиц с туберкулезной инфекцией специфическую кожную реакцию, являющуюся проявлением гиперчувствительности замедленного типа. У лиц, вакцинированных БЦЖ и неинфицированных МБТ, реакция на препарат Диаскинтест® отсутствует [2–4].

Целью нашей работы было проведение крупномасштабных постмаркетинговых исследований на базе НИИ фтизиопульмонологии Первого МГМУ им. И. М. Сеченова и контингентов противотуберкулезных диспансеров Самарской и Рязанской областей.

Материалы и методы

Исследование проведено в 2008 – 2009 гг. Методом сплошного одномоментного отбора сформирована группа из 428 больных локальными формами туберкулеза (из них 328 детей и подростков, 100 взрослых в возрасте от 18 до 45 лет) и 1250 детей и подростков из групп риска по заболеванию туберкулезом. На первом этапе исследования у 265 детей и подростков, больных активным туберкулезом, изучены все известные факторы риска и определена роль туберкулинодиагностики в выявлении заболевания. На втором этапе у 1250 детей и подростков из групп риска по заболеванию туберкулезом, направленных на дообследование в противотуберкулезные диспансеры (ПТД) Рязанской и Самарской областей и в консультационное отделение НИИ фтизиопульмонологии Первого МГМУ им. И. М. Сеченова, проведено обследование с использованием традиционного метода выявления — туберкулинодиагностики РМ с 2ТЕ в комплексе с новым методом диагностики — введением внутрикожно аллергена туберкулезного рекомбинантного в стандартном разведении. При необходимости проведено дообследование, с проведением компьютерной томографии для исключения локальной малой формы туберкулеза. При отсутствии признаков интоксикации и отрицательном результате на Диаскинтест® проводилось наблюдение по соответствующей группе диспансерного учета без профилактического лечения. Кроме этого, у 163 пациентов, больных локальными формами туберкулеза в различных его проявлениях (63 ребенка и 100 человек старше 18 лет), проведено комплексное обследование с использованием Диаскинтеста® на разных этапах лечения.

На основании полученных данных определены наиболее подверженные угрозе по заболеванию туберкулезом категории населения, подлежащие обследованию на туберкулез с использованием диагностического препарата Диаскинтест®, и разработан алгоритм диагностики с последующим диспансерным наблюдением за данными пациентами. Статистическую обработку проводили при помощи компьютерной программы SPSS 11,0 с вычислением непараметрического критерия Х2 для категориальных величин, T-критерия для сравнения средних.

Результаты и обсуждение

У 265 детей и подростков, больных активным туберкулезом, определены все известные факторы риска, способствующие развитию болезни и определена значимость туберкулинодиагностики в выявлении заболевания. Полученные результаты свидетельствовали о том, что выявление туберкулеза при помощи общепринятых методов у детей затруднено. В детском возрасте заболевание выявлялось преимущественно при обследовании по контакту (40,6%, р 0,05). Существенно чаще положительные реакции отмечены на пробу Манту по сравнению с Диаскинтестом® у детей и подростков, больных туберкулезом, получивших ранее основной курс противотуберкулезного лечения (94,4% и 38,9% соответственно; c2 = 14,22; р В. А. Аксенова, доктор медицинских наук, профессор
Л. А. Барышникова
Н. И. Клевно, кандидат медицинских наук, доцент
П. В. Сенчихин, кандидат медицинских наук

НИИ фтизиопульмонологии, Первый МГМУ им. И. М. Сеченова, Москва

ДИАСКИНТЕСТ — генномодифицированный туберкулёзный аллерген

Бактерия Escherichia coli считается непатогенной; в норме в больших количествах населяет кишечник. Однако при попадании в другие органы или полости человеческого тела может вызвать развитие патологии, например, при попадании в брюшную полость – перитонит.

ДИАСКИНТЕСТ. Аллерген туберкулезный рекомбинантный в стандартном разведении представляет собой рекомбинантный белок, продуцируемый генетически модифицированной культурой Escherichia coli BL21(DE3)/pCFP-ESAT, разведенный в стерильном изотоническом фосфатном буферном растворе, с консервантом (фенол). Содержит два антигена, присутствующие в вирулентных штаммах микобактерий туберкулеза и отсутствующие в вакцинном штамме БЦЖ.

Состав. Одна доза (0,1 мл) препарата содержит: рекомбинантный белок CFP10-ESAT6 — 0,2 мкг, натрий фосфорнокислый двузамещенный 2-водный, натрия хлорид, калий фосфорнокислый однозамещенный, полисорбат 80, фенол (0,25мг), вода для инъекций – до 0,1 мл.

Таким образом, Диаскинтест , так же как и Манту, является не только заведомым аллергеном, но и биохимической реакцией с использованием ядохимикатов (а Диаскинтест ещё и с использованием генно-модифицированных биовеществ), и реакция эта ставится не в пробирке, а внутри организма ребёнка. Причем вводится этот ядовитый коктейль в организм уколом, т.е. минуя слизистые – естественные защитные барьеры! То есть производится намеренное заражение крови ребёнка.

Ложноотрицательные реакции (и з инструкции по применению):

Проба с препаратом ДИАСКИНТЕСТ может быть отрицательной у больных туберкулезом с выраженными иммунопатологическими нарушениями, обусловленными тяжелым течением туберкулезного процесса, у лиц на ранних стадиях инфицирования Mycobacterium tuberculosis, на ранних стадиях туберкулезного процесса, у лиц, имеющих сопутствующие заболевания, сопровождающиеся иммунодефицитным состоянием.

Противопоказания для постановки пробы.

• острые и хронические (в период обострения) инфекционные заболевания за исключением случаев подозрительных на туберкулез;
• соматические и др. заболевания в период обострения;
• распространенные кожные заболевания;
• аллергические состояния;
• эпилепсия.

В детских коллективах, где имеется карантин по детским инфекциям, проба проводится только после снятия карантина.

Побочное действие.
У отдельных лиц могут наблюдаться кратковременные признаки общей реакции: недомогание, головная боль, повышение температуры тела.

9:59 30.10.2020 Светлана

Согласна, гмо реагент, как и в манту законсервированный в феноле(кровяной яд)-очень опасное вещество, а мы не щадим наших детей. их же много, а в последствии аллергии, кожные высыпания, артриты, потеря зрения, лейкемия -как бомба замедленного действия -где рванёт только Богу известно. Берегите своих детей. они нужны только Вам!

22:13 4.12.2020 саша

Чтобы проследить генетические, канцерогенные, мутагенные эффекты диаскинтеста необходимо провести испытания на нескольких поколениях,что и происходит в России.

Аллерген туберкулезный очищенный жидкий — Инструкция

Международное название:

Аллерген туберкулезный очищенный жидкий (Allergenum tuberculosum depuratum fluidum)

Лекарственная форма:

Раствор для внутрикожного введения по 10 или 30 доз в ампулах, по 10 ампул в картонной пачке.
Раствор для внутрикожного введения по 1мл в ампуле, в картонной пачке 1 ампула в комплекте с 5 стерильными шприцами и 5 иглами.

Фармакологическое действие:

Аллерген туберкулезный очищенный жидкий в стандартном разведении содержит аллерген туберкулопротеин, который вызывает развитие у инфицированных или вакцинированных людей специфическую реакцию при проведении внутрикожной пробы.

Показания:

Аллерген туберкулезный очищенный жидкий в стандартном разведении применяют для проведения внутрикожной туберкулиновой пробы Манту, в частности при отборе пациентов для ревакцинации БЦЖ и для определения наличия туберкулеза у людей различного возраста.

Противопоказанния:

Запрещено проведение пробы Манту при таких состояниях (а также в течение 1 месяца после исчезновения симптомов, перечисленных заболеваний):
— хронические соматические и инфекционные заболевания в период обострения, острые инфекционные и соматические заболевания;
— дерматологические заболевания, различной этиологии и локализации;
— аллергические заболевания, в том числе идиосинкразия с выраженными дерматологическими проявлениями, острая и подострая фаза ревматизма, бронхиальная астма;
— эпилепсия.

Не следует проводить пробу Манту при наличии карантина по инфекционным заболеваниям в детском коллективе, а также в течение месяца после окончания карантина.

Побочные действия:

При отсутствии состояния специфической реактивности не отмечается развития общих и местных нежелательных явлений (отрицательная реакция на туберкулин).
При поствакцинальной аллергии или инфицировании отмечается развитие местной реакции в виде инфильтрата и гиперемии. У пациентов с высокой степенью аллергии местные реакции могут сопровождаться развитием лимфангоитов и лимфаденитов.
Кроме того, при применении препарата Аллерген туберкулезный очищенный жидкий в стандартном разведении для внутрикожного применения возможно развитие боли в месте введения, слабости, гипертермии, головной боли, кожных аллергических реакций и анафилактического шока.

Способ применения и дозы:

Перед проведением инъекции препарата Аллерген туберкулезный очищенный жидкий в стандартном разведении необходимо проведение медицинского осмотра с целью выявления возможных противопоказаний.
0,2мл раствора вводят внутрикожно (по Манту) в асептических условиях.
Препарат Аллерген туберкулезный очищенный жидкий в стандартном разведении применяют только в медицинских учреждениях, проводить инъекцию и оценивать результаты пробы должен только квалифицированный специалист.

Особые указания:

Передозировка: Сообщений о передозировке препарата Аллерген туберкулезный очищенный жидкий в стандартном разведении для внутрикожного применения не поступало.

Взаимодействие:

Не следует проводить пробу Манту в течение 1 месяца до или после проведения профилактической прививки.
Проведение плановой вакцинации допускается не ранее, чем через 72 часа после проведения пробы Манту.

Подробное описание:

Состав: 1мл (10 доз) препарата Аллерген туберкулезный очищенный жидкий в стандартном разведении для внутрикожного применения содержит:
Аллергена туберкулопротеина – 20 туберкулиновых единиц;
Дополнительные ингредиенты.
1 доза препарата содержит 2 туберкулиновые единицы.

Мы рекомендуем!

РОДИНКИ, БОРОДАВКИ и ПАПИЛЛОМЫ свидетельствуют о наличии в организме паразитов! Наши читатели успешно используют Метод Елены Малышевой. Внимательно изучив этот метод мы решили предложить его и вашему вниманию. Читать далее.

Аллерген туберкулезный очищенный жидкий — Медицинская инструкция. Листок-вкладыш Аллерген туберкулезный очищенный жидкий. Информация для врачей.

Аллерген туберкулезный очищенный жидкий (Allergenum tuberculosum depuratum fluidum)

Наименование: Аллерген туберкулезный очищенный жидкий (Allergenum tuberculosum depuratum fluidum)

Наименование

Аллерген туберкулезный очищенный жидкий (Allergenum tuberculosum depuratum fluidum)

Фармакологическое действие

Аллерген туберкулезный очищенный жидкий в стандартном разведении содержит аллерген туберкулопротеин, который вызывает развитие у инфицированных или вакцинированных людей специфическую реакцию при проведении внутрикожной пробы.

Показания к применению

Аллерген туберкулезный очищенный жидкий в стандартном разведении используют для проведения внутрикожной туберкулиновой пробы Манту, например при отборе пациентов для ревакцинации БЦЖ и для определения наличия туберкулеза у людей различного возраста.

Способ применения

Перед проведением инъекции лекарства Аллерген туберкулезный очищенный жидкий в стандартном разведении нужно проведение медицинского осмотра с целью выявления возможных противопоказаний.
0,2мл раствора вводят внутрикожно (по Манту) в асептических условиях.
Препарат Аллерген туберкулезный очищенный жидкий в стандартном разведении используют только в медицинских учреждениях, проводить инъекцию и оценивать результаты пробы должен только квалифицированный специалист.

Побочные действия

При отсутствии состояния специфической реактивности не отмечается развития общих и местных нежелательных явлений (отрицательная реакция на туберкулин).
При поствакцинальной аллергии или инфицировании отмечается развитие местной реакции в виде инфильтрата и гиперемии. У пациентов с высокой степенью аллергии местные реакции могут сопровождаться развитием лимфангоитов и лимфаденитов.
Кроме того, при использовании лекарства Аллерген туберкулезный очищенный жидкий в стандартном разведении для внутрикожного применения вероятно развитие боли в месте введения, слабости, гипертермии, головной боли, кожных аллергических реакций и анафилактического шока.

Противопоказания

Нельзя проведение пробы Манту при таких состояниях (а также в течение 1 месяца после исчезновения симптомов, перечисленных заболеваний):
— хронические соматические и инфекционные заболевания в период обострения, острые инфекционные и соматические заболевания;
— дерматологические заболевания, различной этиологии и локализации;
— аллергические заболевания, в том числе идиосинкразия с выраженными дерматологическими проявлениями, острая и подострая фаза ревматизма, бронхиальная астма;
— эпилепсия.
Не надлежит проводить пробу Манту при наличии карантина по инфекционным заболеваниям в детском коллективе, а также в течение месяца после окончания карантина.

Взаимодействие с другими лекарственными средствами

Не надлежит проводить пробу Манту в течение 1 месяца до или после проведения профилактической прививки.
Проведение плановой вакцинации разрешается не раньше, чем через 72 часа после проведения пробы Манту.

Передозировка

Сообщений о передозировке лекарства Аллерген туберкулезный очищенный жидкий в стандартном разведении для внутрикожного применения не поступало.

Форма выпуска

Раствор для внутрикожного введения по 10 или 30 доз в ампулах, по 10 ампул в картонной пачке.
Раствор для внутрикожного введения по 1мл в ампуле, в картонной пачке 1 ампула в комплекте с 5 стерильными шприцами и 5 иглами.

Условия хранения

Раствор для внутрикожных инъекций годен в течение 1 года при условии хранения в помещениях с температурой от 2 до 8 градусов Цельсия.
Вскрытую ампулу разрешается хранить в течение 2 часов в асептических условиях при температуре от 2 до 8 градусов Цельсия.
Нельзя замораживать и нагревать раствор.
Не надлежит применять препарат при повреждении упаковки во время хранения или при несоблюдении условий хранения.

Состав

1мл (10 доз) лекарства Аллерген туберкулезный очищенный жидкий в стандартном разведении для внутрикожного применения содержит:
Аллергена туберкулопротеина – 20 туберкулиновых единиц;
Дополнительные ингредиенты.
1 дозировка лекарства содержит 2 туберкулиновые единицы.

Иммунитет и аллергия при туберкулезе

Иммунитет при туберкулезе может быть естественным и при­обретенным либо в результате перенесенного заболевания, либо как следствие вакцинации. Очень устойчивы к ТБ холоднокровные и земноводные. Наиболее восприимчивы к туберкулезной ин­фекции млекопитающие, особенно человек, а также морская свин­ка, кролик, обезьяна и крупный рогатый скот. Кроме видовой различают индивидуальную и тканевую резистентность макроорганизма к микобактериям туберкулеза. Так, на­пример, среди людей имеются индивидуумы, в разной степени устойчивые к микобактериям туберкулеза. В связи с этим среди находящихся в контакте с больным туберкулезом одни заболева­ют, а другие остаются здоровыми. Естественная устой­чивость к туберкулезу передается по наследству.

Получены доказательства роли наследственности в течении ту­беркулезного процесса. Генетические факторы влияют на ответ иммунной системы при размножении микобактерий туберкулеза в организме человека.

Приобретенный иммунитет может возникнуть при естествен­ном заражении микобактериями туберкулеза. Поступление боль­шой дозы вирулентных микобактерий приводит к возникновению заболевания.

При ту­беркулезе можно создать искусственный иммунитет с помощью ослабленного, но частично сохранившего вирулентность штамма микобактерий (БЦЖ).

Представление о нестерильном иммунитете как об обязатель­ном наличии живых микобактерий в макроорганизме для сохранения в нем противотуберкулезной резистентности устарело. Им­мунный ответ возникает вследствие воздействия антигенов микобактерий, обработанных макрофагами, на макроорганизм.

Часть иммунных лимфоцитов — Т-киллеры — совместно с макрофагами обеспечивают развитие гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ), т.е. клеточно­го противотуберкулезного иммунитета. Большая популяция МБТ приводит к угнетению ГЗТ и формированию некротической гранулемы. Если популяция МБТ мала, то мак­рофаги трансформируются в эпителиоидные клетки и клетки Пирогова—Лангханса, ограничивающие очаг воспаления.

Таким образом, иммунитет при туберкулезе является несте­рильным, клеточным, опосредованным Т-лимфоцитами. Иммун­ный ответ при туберкулезе реализуется по клеточному типу при кооперации макрофагов, Т- и В-лимфоцитов.

В благоприятных условиях иммунитет формируется через 4 — 8 нед после инфицирования или БЦЖ-вакцинации и отражает наличие клона «обученных» Т-лимфоцитов.

Одним из проявлений иммунитета при туберкулезе является состояние повышенной чувствительности замедленного типа. Она возникает в результате образования в организме сенсибилизированных лимфоци­тов. При повторном заражении или эндогенной реинфекции в органе, где находятся микобактерии, возникает бурная воспалительная реакция, вследствие чего блокируются лимфатические и кровеносные сосуды и туберкулез­ная инфекция купируется в очаге воспаления.

Туберкулиновые пробы являются классическим феноменом повышенной чувствительности замедленного типа. Но по выра­женности пробы нельзя судить о выраженности иммунитета.

При введении туберкулина может развиваться местная, общая и очаговая реакции.

Различают пять основных типов реакций на введенный тубер­кулин, которые характеризуют фазы аллергии.

1. Анергия — это состояние, когда макроорганизм не реагирует на введенный туберкулин. В таких случаях в организме нет и не было микобактерий туберкулеза или, возможно, они и были, но больной излечился. Анергия мо­жет наблюдаться у тяжелобольных туберкулезом, когда наступает истощение защитных сил организма.

2. Нормергия характеризуется тем, что после введения туберку­лина определенной концентрации появляются реакции на коже (инфильтрация и покраснение) соответствующих размеров.

3. Гиперергическая реакция бывает при введении небольших доз туберкулина, когда возникает бурная местная реакция (так назы­ваемая «пышная» туберкулиновая проба).

4. Парадоксальная реакция — это состояние, когда при введе­нии туберкулина высокой концентрации реакция не возникает, а после введения его в меньшей концентрации отмечается положи­тельная туберкулиновая проба.

5. Уравнительная реакция наблюдается тогда, когда на все кон­центрации туберкулина организм реагирует одинаково.

Уравнительные и парадоксальные реакции бывают у больных с запущенными формами туберкулеза. Однако кож­ная туберкулиновая реакция и другие туберкулиновые пробы не могут полностью отражать клиническое течение заболевания. Вы­раженность аллергических реакций не всегда возрастает по мере возрастания активности туберкулезного процесса. У пожилых лю­дей аллергия обычно слабо выражена.

7. Основные статистические показатели, используемые при оценке эпидемиологической ситуации во фтизиатрии.

1. Заболеваемость — количество лиц, впервые заболевших ту­беркулезом в течение года, на 100 тыс. чел.

Заболеваемость показывает число больных, у которых впервые диагностирован активный туберкулез в течение года, в расчете на 100 тыс. чел. Так, например, если в городе с населением 150 тыс. чел. в течение года зарегистрировано 75 случаев заболевания ту­беркулезом, то в пересчете на 100 тыс. чел. число заболевших будет составлять 50.

2. Болезненность — количество болеющих туберкулезом на 100 тыс.населения, обнаруженных и зарегистрированных на конец года.

Болезненность (контингенты больных) включает в себя забо­левших как в текущем году, так и в предыдущие годы в расчете на 100 тыс. населения. Для вычисления показателя берут всех больных активным туберкулезом (контингенты больных), состоящих в I, II группах диспансерного наблюдения на конец отчетного года. Для этого к числу контингентов, состоящих на учете на начало года, прибавляют взятых на учет вновь выявленных больных в те­чение года, а также больных с рецидивами туберкулеза и боль­ных, прибывших из других мест. Из этой суммы следует вычесть число излеченных от туберкулеза, выбывших в другую местность и умерших в течение года.

3. Смертность — количество умерших от туберкулеза в течение года на 100 тыс. чел.

Принято различать смертность от всех форм туберкулеза и раздельно — от туберкулеза легких и внелегочных форм.

4. Инфицированностъ — доля лиц, положительно реагирующих на туберкулин, от числа охваченных туберкулинодиагностикой, выраженная в процентах.

Инфицированность — процент положительно реагирующих на туберкулин из числа не вакцинированных БЦЖ лиц, которым поставлена туберкулиновая проба. Инфицированность показывает распространенность туберкулезной инфекции среди населения или его отдельных групп. В число инфицированных входят люди, заразившиеся туберкулезом в разные годы, и поэтому в различных возрастных группах этот показатель отражает историю распространения инфекции среди населения. Про­цент положительных реакций у детей в возрасте до 5 лет показывает степень распространенности туберкулезной инфекции за последние годы.

Пораженность — число больных активным туберкулезом на 100 тыс. чел., которое выявляется при сплошном одномоментном обследовании населения района, города (или части территории). Такие обследования являются дорогостоящим мероприятием и их проводят тогда, когда нет достаточно достоверных данных о распространенности заболевания туберкулезом в каком-либо районе или стране или когда необходимо установить полноту выявления больных.

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

Рекомбинантный аллерген

ФС.3.3.1.0001.15 Аллерген туберкулезный рекомбинантный в стандартном разведении | Фармстудент

Ресурсы сайта (1449 работ)

ФС.3.3.1.0001.15 Аллерген туберкулезный рекомбинантный в стандартном разведении

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Аллерген туберкулезный ФС.3.3.1.0001.15

рекомбинантный в Взамен ГФ Х, ст. 706,

стандартном разведении ФС 42-19ВС-86

Настоящая фармакопейная статья распространяется на аллерген туберкулезный рекомбинантный, который представляет собой гибридный белок с молекулярной массой около 27 кДа, состоящий из 2 антигенов CFP10-ESAT6, продуцируемый генетически модифицированной культурой Еscherichia соli BL21(DE3)/pCFP-ESAT.

Аллерген туберкулезный рекомбинантный предназначен для диагностики туберкулеза.

ПРОИЗВОДСТВО

Производство препарата аллергена туберкулезного рекомбинантного должно осуществляться с соблюдением установленных правил организации производства и контроля качества генно-инженерных иммунобиологических лекарственных средств, гарантирующих качество и безопасность для человека.

Выращенную культуру клеток бактерий-продуцентов отделяют от среды и лизируют для высвобождения белка. Лизат клеток-продуцентов проходит стадии хроматографического выделения и очистки целевого белка-концентрата.

Очищенный концентрат – полуфабрикат (субстанция) аллергена туберкулезного подлежит проверке на стерильность, отсутствие сенсибилизирующих свойств, содержание белка, специфичность, специфическую активность, аномальную токсичность.

Стандартное разведение аллергена получают путем разведения концентрата изотоническим фосфатным буферным раствором до содержания 0,2 мкг гибридного белка в 0,1 мл.

ИСПЫТАНИЯ

Описание

Бесцветная прозрачная жидкость без посторонних примесей.

Подлинность

Препарат при внутрикожном введении морским свинкам, зараженным тест-штаммом Mycobacteriumtuberculosis, должен вызывать положительные кожные реакции, а у животных, иммунизированных вакциной БЦЖ, реакции должны отсутствовать (разделы «Специфическая активность», «Специфичность»).

Прозрачность

Должен быть прозрачным. Определение проводят визуально в соответствии с ОФС «Прозрачность и степень мутности жидкостей».

Цветность

Должен быть бесцветным. Определение проводят визуально в соответствии с ОФС «Степень окраски жидкостей».

Извлекаемый объем

Не менее номинального. Определение проводят в соответствии с ОФС «Извлекаемый объем лекарственных форм для парентерального применения».

рН

От 7,35 до 7,55. Определяют потенциометрическим методом в соответствии с ОФС «Ионометрия»» href=»http://pharmacopoeia.ru/ofs-1-2-1-0004-15-ionometriya/»>ОФС «Ионометрия».

Аномальная токсичность

Должен быть нетоксичным. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Аномальная токсичность»» href=»http://pharmacopoeia.ru/ofs-1-2-4-0004-15-anomalnaya-toksichnost/»>ОФС «Аномальная токсичность» на 5 мышах, тест-доза 0,5 мл.

Бактериальные эндотоксины

Не более 5 ЕЭ/мл. Определение проводят в соответствии с ОФС «Бактериальные эндотоксины».

Стерильность

Должен быть стерильным. Определение проводят в соответствии с ОФС «Стерильность»» href=»http://pharmacopoeia.ru/ofs-1-2-4-0003-15-sterilnost/»>ОФС «Стерильность» методом прямого посева или мембранной фильтрации.

Специфическая активность

В 0,1 мл препарата должно содержаться 0,2 мкг аллергена туберкулезного рекомбинантного. Индекс специфической активности должен быть равен (1,00 ± 0,05). Испытание проводят на морских свинках, зараженных живой культурой Mycobacterium tuberculosis.

Морских свинок (альбиносов или белокожих Hartley) массой (350±50) г содержат на постоянном пищевом рационе и в одинаковых условиях окружающей среды. Сенсибилизацию проводят путем заражения животных подкожно или аэрогенно вирулентным штаммом M.tuberculosis.

Используют третью генерацию тест-штамма с плотной среды для выращивания микобактерий. Морских свинок используют для постановки проб не более 2 раз в период от 30 до 120 сут после инфицирования с интервалом между постановками проб не менее 30 сут.

При повторном использовании животных пробы ставят на участках кожи, ранее не подвергавшихся воздействию препаратов.

За 24 ч до постановки туберкулиновых проб шерсть на спине или боках морских свинок удаляют сплошной полосой шириной 3-4 см.

Испытание препарата проводят на 6 зараженных микобактериями туберкулеза морских свинках. Заполняют 4 шприца испытуемым образцом и 4 шприца разведенным (0,2 мкг/0,1 мл) стандартным образцом (СО) аллергена туберкулезного рекомбинантного.

Каждой морской свинке по методу случайных чисел вводят по 0,1 мл внутрикожно 4 пробы испытуемого образца и 4 пробы СО. Реакцию учитывают через 24 ч, измеряя 2 взаимно перпендикулярных диаметра эритемы в мм. Подсчитывают суммы реакций на испытуемый препарат и на СО.

Специфическую активность оценивают по индексу специфической активности (I) – отношению суммы реакций на испытуемый препарат к сумме реакций на разведенный СО при отсутствии достоверных различий между средними реакциями на испытуемый препарат и СО.

Если полученные результаты выходят за указанные пределы, испытание повторяют. Результаты 2 испытаний усредняют.

Специфичность

Морские свинки, иммунизированные вакциной БЦЖ, не должны реагировать на внутрикожное введение 0,2 мкг в 0,1 мл испытуемого аллергена туберкулезного рекомбинантного и давать положительные реакции – папулы диаметром не менее 5 мм на 2 ТЕ в 0,1 мл СО очищенного туберкулина. Испытание проводят на 3 морских свинках не ранее чем через 30 дней после введения им по 0,5 мг вакцины БЦЖ.

Фенол

От 0,20 до 0,30 %. Определение проводят в соответствии с ОФС «Количественное определение фенола спектрофотометрическим методом в иммунобиологических лекарственных препаратах».

Производственные штаммы

Рекомбинантный штамм Escherichia coli BL21(DE3)/pCFP-ESAT — прототрофный штамм E.

coli В (депонирован в ИБХ РАН), который обладает рядом характеристик, отличающих его от штамма предшественника: быстрый рост на минимальной среде, способность к синхронизации, устойчивый рост культуры в условиях биосинтеза белка и недостатка питательных веществ, дефектность системы рестрикции ДНК В-типа.

Штамм несет оригинальную плазмиду pCFP10-ESAT6, содержащую генетическую конструкцию из 2 генов M.tuberculosis –cfp10 и esat 6и ген устойчивости к ампициллину (bla). Штамм устойчив к ампициллину (100 – 150 мкг/мл) и чувствителен к остальным антибиотикам.

Для контроля качества препарата используют тест-штаммы M.tuberculosis (вирулентный) и M. bovis BCG — 1 из Государственной коллекции патогенных микроорганизмов.

Упаковка и маркировка

В соответствии с ОФС «Иммунобиологические лекарственные препараты».

Транспортирование

При температуре от 2 до 8 оС в условиях, исключающих замораживание. Допускается транспортирование при температуре не выше 18 °С в течение 15 дней.

Хранение

При температуре от 2 до 8 °С. Не замораживать!

Новые возможности с рекомбинантными аллергенами › Клиника – Форпост

В составе специфических аллергенов, сейчас возможно также выделить наиболее активные белковые компоненты, которые вызывают выработку IgE антител и аллергические симптомы.

Например, проводя обычный тест на аллергию, выявлена сенсибилизация к аллергену пыльцы березы. Но этот аллерген включает несколько аллергенных компонентов. Это и есть рекомбинантные аллергены.

Рекомбинантные аллергены – это аллергенные молекулы, полученные методом генной инженерии, первоначально выделенные из аллергенного экстракта.

Большинство существующих рекомбинантных аллергенов экспрессированы в клетке Esherichia coli, и по своим структурным и иммунологическим свойствам полностью соответствуют натуральным протеинам. Другие высокотехнологические системы основаны на воспроизведении

рекомбинантных аллергенов в дрожжевой, бактериальной или инсектной клетке.

Рекомбинантные аллергены обладают тем же специфичным свойством к индукции IgE-антител, что и компоненты натуральных экстрактов и обычно демонстрируют высокую чувствительность и специфичность в тестах in vitro и in vivo.

Сегодня множество аллергенных молекул из различных натуральных источников аллергенов могут быть клонированы, секвинированы и экспрессированы как рекомбинантные аллергены.

Использование рекомбинантных аллергенов позволяет выявить сенсибилизацию к компонентам ( специфичным белкам).

Таким образом, использование рекомбинантных аллергенов – это важная информация о триггерных стимулах на молекулярном уровне. Исследование реактивности к рекомбинантным аллергенам дает возможность изучать более сложные популяционные явления, такие как географические различия в IgE-опосредованной чувствительности и перекрестные реакции между различными аллергенами.

• В случае, когда в натуральном экстракте содержание аллергенных компонентов низкое, дополнение основного рекомбинантного белка к экстракту улучшает клиническую чувствительность и количественную постановку теста.

• Рекомбинантные аллергены могут быть объединены для формирования композиции, содержащей оптимальное соотношение основных аллергенных компонентов из натурального экстракта, и исключающих компоненты, имеющие малое диагностическое значение. Это открывает интересные возможности для улучшения качества тестов в будущем.

• Использование тестов на отдельные аллергенные компоненты дополняют традиционные тесты на IgE антитела с целью получения более детальной информации. Возможность исследовать чувствительность к отдельным компонентам аллергена может пролить свет на необъяснимые явления.

• Тестирование с отдельными компонентами используется для более подробного исследования и объяснения аллергической реактивности, а также для определения перекрестной реактивности к различным аллергенам.

Что такое перекрестная аллергия и для чего это нужно

Для пациентов, у которых появляются симптомы после употребления в пищу яблока или других фруктов, обычный тест, основанный на применении экстракта, будет выявлять причиннозначимый аллерген, такой как яблоко, персик, груша. Однако истинной причиной может быть сенсибилизация к пыльце деревьев или трав, перекрестная реакция между компонентами аллергенов, имеющими одинаковую структуру и представленными в пыльце растений и пищевых белках.

Тесты на отдельные аллергеные компоненты могут быть использованы для получения большей информации о причине сенсибилизации на молекулярном уровне, например, к молекулам пыльцы, LTPs или профилинам, и делает возможным сделать выводы врачам о клинических проявлениях.

Так как у пациентов, реагирующих на пыльцу, симптомы проявляются только в определенный сезон, то симптоматическое лечение в период цветения может быть эффективно, а для пациентов чувствительных к LTP еще обязательно необходима элиминационная диета.

К тому же у этих пациентов, вероятно, разовьются более тяжелые симптомы.

Вот объяснение почему ребенок у которого была аллергия к латексной соске со временем дал реакцию на банан или авокадо – наличие рекомбинатных аллергенов ( перекрестная чувствительность, один и тот же по структуре белок аллерген)

Более точный ответ нужна ли СИТ

Рекомбинантные аллергены дают возможность высокоспецифической диагностики, с помощью которой возможно определить объективные критерии для назначения специфической иммунотерапии (СИТ).

Тесты с рекомбинантными аллергенами открывают новые возможности прогнозирования, будет ли назначение СИТ эффективным или нет, и назначения адекватной терапии.

Если аллергические реакции у пациента обусловлены сенсибилизацией к основному компоненту аллергена.

С высокой степенью вероятности можно прогнозировать высокий терапевтический эффект от СИТ с экстрактом пыльцы березы, который будет содержать высокую концентрацию этого компонента.

С другой стороны, если пациент чувствителен к другому, не к главному компоненту аллергена иммунотерапия с экстрактом, возможно будет недостаточно эффективной. Есть также опасения, что СИТ с аллергенными компонентами, к которым пациент не чувствителен, может вызвать развитие новой сенсибилизации, что скорее ухудшит симптомы, чем устранит их.

Иммунологический эффект от проведения СИТ может быть прослежен периодически

по уровню IgE- и IgG – антител к основным рекомбинантным аллергенам. Более того, проведение мониторинга может отследить развитие сенсибилизации к минорным

перекрестно –реагирующим компонентам экстракта.

Компонентная аллергодиагностика – новые подходы

Рекомбинантные аллергены открывают большие перспективы диагностики к молекулярным компонентам. С их помощью возможно определение сенсибилизации пациента к полному аллергенному профилю, включающему как аллергенные

компоненты, вызывающие заболевание, так и перекрестно-реагирующие. Компонентная аллергодиагностика – революционное направление аллергологии.

Разработки в области исследования реактивности к рекомбинантным аллергенам, проводились в компании Phadia в течение многих лет. В испытаниях использовали,

как очищенные натуральные аллергенные компоненты, так и рекомбинантные аллергены. Более 10 лет назад были запущены исследования с первыми рекомбинантными

аллергенами, после чего количество компонентов для диагностики in vitro неуклонно растет. Ученые активно разрабатывают новые рекомбинантные аллерготесты, исследуют их клиническую значимость и ищут пути их применения.

Аллерген туберкулезный рекомбинантный в стандартном разведении – Аллергия – симптомы и лечение

(в ред. Приказа Минздравсоцразвития РФ от 29. 10. 2009 N 855)

Аллерген туберкулезный рекомбинантный в стандартном разведении (далее – препарат) представляет собой рекомбинантный белок, продуцируемый генетически модифицированной культурой Escherichia coli BL21(DE3) /pCFP-ESAT. Препарат содержит два связанных между собой антигена – CFP10 и ESAT6, присутствующие в вирулентных штаммах микобактерий туберкулеза, в том числе M.tuberculosis и M.bovis.

Эти антигены отсутствуют в штаммах БЦЖ M.bovis, из которого готовятся вакцины туберкулезные – БЦЖ и БЦЖ-М.

Одна доза (0, 1 мл) препарата содержит: рекомбинантный белок CFP10-ESAT6 (0, 2 мкг) , фенол (0, 25 мг) в качестве консерванта, полисорбат 80 (твин 80) в качестве стабилизатора, натрий фосфорно-кислый двузамещенный 2-водный, натрия хлорид, калий фосфорно-кислый однозамещенный, воду для инъекций – до 0, 1 мл.

Биологические и иммунологические свойства.

Препарат предназначен для повышения качества диагностики туберкулезной инфекции. Действие препарата основано на выявлении клеточного иммунного ответа на специфические для микобактерий туберкулеза (далее – МБТ) антигены.

Препарат не обладает сенсибилизирующим действием, не токсичен. При внутрикожном введении вызывает у лиц с туберкулезной инфекцией специфическую кожную реакцию гиперчувствительности замедленного типа (далее – ГЗТ) .

По результатам проведенных исследований установлено, что чувствительность (частота положительных ответных реакций у лиц с активной туберкулезной инфекцией) внутрикожной пробы с препаратом сопоставима с чувствительностью туберкулиновой пробы, а его специфичность (частота отсутствия реакции на препарат у здоровых лиц) выше, чем у туберкулина, так как в отличие от туберкулина у вакцинированных БЦЖ, но не инфицированных МБТ лиц препарат не вызывает ответную реакцию ГЗТ. В связи с тем, что препарат не вызывает реакцию ГЗТ, связанную с вакцинацией БЦЖ, проба с препаратом не может быть использована вместо туберкулинового теста для отбора лиц на первичную вакцинацию и ревакцинацию БЦЖ.

Препарат используется во всех возрастных группах с целью:

1) диагностики туберкулеза и оценки активности процесса;

2) дифференциальной диагностики туберкулеза;

3) дифференциальной диагностики поствакцинальной и инфекционной аллергии (гиперчувствительности замедленного типа) ;

4) наблюдения за эффективностью лечения в комплексе с другими методами.

Для практического использования внутрикожную пробу с препаратом применяют в противотуберкулезных учреждениях или, при отсутствии таковых, по назначению врача-фтизиатра и при его методическом обеспечении.

Для раннего выявления туберкулеза внутрикожную пробу с препаратом проводят:

лицам, направленным в противотуберкулезное учреждение для дообследования на наличие туберкулезного процесса;

лицам, относящимся к группам высокого риска по заболеванию туберкулезом с учетом эпидемиологических, медицинских и социальных факторов риска;

лицам, направленным к фтизиатру по результатам массовой туберкулинодиагностики.

Факторами высокого риска заболевания туберкулезом являются:

1) эпидемиологические (контакт с больным туберкулезом человеком или животным) ;

сахарный диабет, язвенная болезнь, психоневрологическая патология, частые ОРВИ в анамнезе;

хронические заболевания различных органов и систем при торпидном, волнообразном течении и неэффективности традиционных методов лечения;

длительный прием (более месяца) цитостатических, глюкокортикоидных препаратов, иммунодепрессантов;

ВИЧ-инфекция, перинатальный контакт у детей по ВИЧ-инфекции;

алкоголизм, наркомания, пребывание в местах лишения свободы, безработица;

беспризорность детей и подростков, попадание детей в детские приюты, детские дома, социальные центры и т.д.;

Для дифференциальной диагностики туберкулеза и других заболеваний внутрикожную пробу с препаратом проводят в комплексе с клинико-лабораторным и рентгенологическим обследованием в условиях противотуберкулезного учреждения.

Для наблюдения за пациентами, состоящими на учете у фтизиатра с различными проявлениями туберкулезной инфекции, в условиях противотуберкулезного учреждения (все контингенты ПТД) внутрикожную пробу с препаратом проводят при контрольном обследовании во всех группах диспансерного учета с интервалом 3 – 6 месяцев.

Способ применения и дозировка.

Назначение и методическое руководство проведением пробы осуществляет врач-фтизиатр. Проба проводится детям, подросткам и взрослым специально обученной медицинской сестрой, имеющей допуск к проведению внутрикожных тестов. Препарат вводят строго внутрикожно.

Для проведения пробы применяют только туберкулиновые шприцы и тонкие короткие иглы с косым срезом. Перед употреблением необходимо проверить дату их выпуска и срок годности. Запрещается применять шприцы, предназначенные для инъекций инсулина.

Резиновую пробку флакона с препаратом обрабатывают 70% этиловым спиртом. Для забора препарата из флакона используется тот же шприц, который будет использован для инъекции (СП 3. 3. 2342-08 от 03. 03.

Если туберкулиновые шприцы имеют съемные иглы, пробку флакона прокалывают отдельной иглой для подкожных или внутримышечных инъекций, которую после каждого забора препарата в шприц оставляют в пробке, накрыв стерильной салфеткой.

Туберкулиновым шприцем набирают 0, 2 мл (две дозы) препарата и выпускают раствор до метки 0, 1 мл в стерильный ватный тампон. Флакон с препаратом после вскрытия допускается хранить не более 2 часов в защищенном от света месте.

Пробу проводят обследуемым в положении сидя. После обработки участка кожи на внутренней поверхности средней трети предплечья 70% этиловым спиртом в верхние слои натянутой кожи, параллельно ее поверхности, вводят 0, 1 мл препарата.

При постановке пробы, как правило, в коже образуется папула в виде “лимонной корочки” беловатого цвета диаметром 7 – 10 мм. Если на одном предплечье ставилась проба с туберкулином, препарат вводят в другое предплечье.

Лицам, у которых в анамнезе имелись проявления неспецифической аллергии, пробу рекомендуется проводить на фоне приема десенсибилизирующих препаратов в течение 7 дней (5 дней до постановки пробы и 2 дня после нее) .

Учет и интерпретация результатов.

В учетных документах после постановки пробы с препаратом отмечают:

а) название препарата;

б) предприятие-изготовитель, номер серии, срок годности;

в) дату проведения пробы;

г) результат – реакция на пробу.

Результат пробы оценивает врач или обученная медсестра через 72 часа с момента ее проведения путем измерения поперечного (по отношении к оси предплечья) размера гиперемии и инфильтрата (папулы) в миллиметрах прозрачной линейкой. Гиперемию учитывают только в случае отсутствия инфильтрата.

Ответная реакция на пробу считается:

отрицательной – при полном отсутствии инфильтрата и гиперемии или при наличии “уколочной реакции”;

сомнительной – при наличии гиперемии без инфильтрата;

положительной – при наличии инфильтрата (папулы) любого размера.

Условно различают следующие ответные кожные реакции на препарат:

слабо выраженная – при наличии инфильтрата размером до 5 мм;

умеренно выраженная – при размере инфильтрата 5 – 9 мм;

выраженная – при размере инфильтрата 10 мм и более;

гиперергическая – при размере инфильтрата 15 мм и более, при везикуло-некротических изменениях и (или) лимфангоите, лимфадените независимо от размера инфильтрата.

В отличие от реакции ГЗТ кожные проявления неспецифической аллергии (в основном гиперемия) на препарат, как правило, наблюдаются сразу после постановки пробы и через 48 – 72 ч обычно исчезают.

Отрицательная реакция на пробу.

Кожная ГЗТ к препарату, как правило, отсутствует:

1) у лиц, не инфицированных МБТ;

2) у лиц, ранее инфицированных МБТ с неактивной туберкулезной инфекцией;

3) у больных туберкулезом в период завершения инволюции туберкулезных изменений при отсутствии клинических, рентгено-томографических, инструментальных и лабораторных признаков активности процесса;

4) у лиц, излечившихся от туберкулеза.

Одновременно проба с препаратом может быть отрицательной у больных туберкулезом с выраженными иммунопатологическими нарушениями, обусловленными тяжелым течением туберкулезного процесса, у лиц на ранних стадиях инфицирования МБТ, на ранних стадиях туберкулезного процесса, у лиц, имеющих сопутствующие заболевания, сопровождающиеся иммунодефицитным состоянием. В связи с этим при наличии характерных клинико-рентгенологических признаков туберкулеза отрицательная реакция на препарат не должна препятствовать проведению дальнейших мероприятий по диагностике туберкулезной инфекции.

Лица с сомнительной и положительной реакцией на препарат подлежат обследованию на туберкулез.

Лица старше 18 лет, у которых впервые установлена сомнительная или положительная проба с препаратом, подлежат полному клинико-рентгенологическому обследованию в противотуберкулезном диспансере.

По итогам обследования, при отсутствии у указанной группы лиц признаков локального туберкулеза, им показано наблюдение у фтизиатра по “0” группе диспансерного учета с проведением лечебно-профилактических мероприятий (по показаниям) .

Детям и подросткам при наличии сомнительной или положительной реакции на препарат показано полное обследование на туберкулез с последующим лечением и наблюдением в соответствующей группе диспансерного учета. При отрицательном результате реакции на препарат лечение по поводу туберкулезной инфекции не показано. Повторная постановка пробы – через 2 месяца.

Противопоказания для постановки пробы:

1) острые и хронические (в период обострения) инфекционные заболевания, за исключением случаев, подозрительных на туберкулез;

2) соматические и др. заболевания в период обострения;

3) распространенные кожные заболевания;

В детских коллективах, где имеется карантин по детским инфекциям, проба проводится только после снятия карантина.

В случаях дифференциальной диагностики локального туберкулеза и других заболеваний, кроме индивидуальной непереносимости туберкулина, противопоказаний для постановки пробы с препаратом не имеется.

У отдельных лиц, как и при проведении туберкулинодиагностики, могут наблюдаться кратковременные признаки общей неспецифической реакции: недомогание, головная боль, повышение температуры тела.

Взаимодействие с другими лекарственными препаратами.

Здоровым лицам с отрицательным результатом пробы профилактические прививки (кроме БЦЖ) можно проводить непосредственно после оценки и учета результата пробы.

Если профилактические прививки уже проведены, то пробу с препаратом осуществляют не ранее чем 1 месяц после прививки.

Приложение N 5 от 21 марта 2003 г. N 109

Аллергокомпонент t215 – Береза rBet v1 PR-10, IgE (ImmunoCAP)

Количественное определение в крови специфических антител класса иммуноглобулинов E к главному («мажорному») аллергену пыльцы березы – Betv1 белку PR-10, выявление которых позволяет диагностировать истинную аллергию к пыльце березы, оценить перекрестную реактивность с аллергенами других растений и пищевых продуктов, прогнозировать эффективность аллергенспецифической иммунотерапии.

Синонимы русские
Специфические иммуноглобулины класса Е к мажорному аллергену пыльцы березы Betv1 PR-10.

Синонимы английские
ImmunoCAP t215 (Birch, rBet v1 PR-10), IgE; Silver Birch recombinant (rBet v1 PR-10) IgE Ab in Serum; Silver Birch (rBet v1 PR-10) IgE.

Метод исследования

Реакция иммунофлюоресценции на трехмерной пористой твердой фазе, ИФЛ (ImmunoCAP).

Единицы измерения

kU/l (килоединица на литр).

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную или капиллярную кровь.

Аллерген – это вещество, вызывающее аллергическую реакцию. При атопических заболеваниях аллергены стимулируют образование антител класса IgE и являются причинными факторами развития клинических симптомов аллергических заболеваний.

Выявление в крови специфических иммуноглобулинов Е к определенному аллергену подтверждает его роль в развитии аллергической реакции I типа (реагиновой), а значит, позволяет определить возможного «виновника» аллергии и назначить соответствующие лечебные и профилактические мероприятия.

Однако в состав аллергенного вещества входит не один, а несколько белковых структур, которые могут выступать аллергенами. Одни являются «мажорными» -основными аллергенами, другие «минорными» – второстепенными. Определение антител к рекомбинантным аллергенам позволяет выявить ведущий компонент в составе сложных аллергенов на уровне молекулярной аллергологии.

Это позволяет дифференцировать истинную и перекрестную аллергию.

Применение рекомбинантных аллергенов представляет собой новый инструмент в диагностике аллергических реакций I типа, который позволяет получить подробную информацию о сенсибилизации пациента, перекрестной реактивности с другими аллергенами, обосновать целесообразность и прогнозировать эффективность аллергенспецифической иммунотерапии (АСИТ).

Пыльца березы является основным и наиболее распространенным триггером аллергических реакций в весенний период, которые проявляются аллергическим ринитом, конъюнктивитом, обострениями бронхиальной астмы и атопического дерматита, симптомами орального аллергического синдрома.

При аллергологическом тестировании обычно определяется сенсибилизация к пыльце березы, как сложному аллергену, который одновременно включает в себя несколько аллергенных компонентов (Betv 1, Betv 2, Betv 3, Betv 4, Betv 5, Betv 6, Betv 7).

Определение специфических антител IgE к отдельным аллергенным молекулам, рекомбинантным аллергенам, полученным методом генной инженерии позволяет дифференцировать истинную сенсибилизацию и перекрестную реактивность.

Особенно важно учитывать это при планировании АСИТ с аллергенами пыльцы березы, поскольку она может быть эффективной только при истинной аллергии.

Истинная аллергия к пыльце березы подтверждается наличием в крови специфических антител IgE к аллергокомпоненту Betv1 – белку PR-10, рибонуклеазе, патогенетически связанному с развитием сенсибилизации к пыльце березы протеину. IgE-антитела к аллергену Betv1 выявляются у более 95% пациентов, сенсибилизированных к пыльце березы.

PR-10 – термолабильный белок, аллергенные свойства которого снижаются после термической обработки, а также при распаде в пищеварительном тракте.

Структура PR-10 гомологична белкам пыльцы других деревьев из семейств Березовых, Буковых, Ореховых и таксономически связанных фруктов (яблоки, абрикосы, персики, черешня), овощей (морковь, сельдерей) и специй.

В виду вышеуказанного, у лиц, сенсибилизированных к белку PR-10, кроме респираторных симптомов на пыльцу нередко при употреблении в пищу фруктов, некоторых овощей, орехов наблюдаются локальные проявления аллергии – оральный аллергический синдром в виде зуда, жжения, отека, покраснения в ротовой полости.

Целью данного исследования является определение специфических IgE к рекомбинантному аллергену пыльцы березы rBetv1 методом ImmunoCAP.

Аллергодиагностика технологией ImmunoCAP характеризуется высокой точностью и специфичностью, что достигается обнаружением в очень малом количестве крови пациента низких концентраций IgE-антител.

Исследование основано на иммунофлюоресцентном методе, что позволяет увеличить чувствительность в несколько раз по сравнению с другими диагностическими методами. Во всем мире до 80% определений специфических иммуноглобулинов IgE выполняется данным методом.

Всемирная Организация Здравоохранения и Всемирная Организация Аллергологов признают диагностику с использованием ImmunoCAP как «золотой стандарт», так как эта методика доказала свою точность и стабильность результатов в независимых исследованиях.

Для чего используется исследование?

  • дифференциальная диагностика истинной аллергии к пыльце березы и аллергических реакций, обусловленных перекрестной реактивности с другими аллергенами растительного происхождения;
  • выявление сенсибилизации к главному аллергену пыльцы березы у пациентов с аллергией на пыльцу деревьев и трав и/или поливалентной сенсибилизацией;
  • определение возможных причин перекрестной реактивности между аллергенами различных растений и продуктов растительного происхождения;
  • решение вопроса о целесообразности проведения и прогнозирование эффективности аллергенспецифической терапии (АСИТ) с аллергенами пыльцы березы.

Когда назначается исследование?

  • при обследовании пациентов, сенсибилизированных к пыльце березы и других деревьев;
  • при обследовании пациентов с поливалентной сенсибилизацией к аллергенам растительного происхождения;
  • при планировании АСИТ с аллергенами пыльцы березы.

Что означают результаты?

Значение показателякЕдА/л Класс Уровень аллергенспецифических антител IgE
0 – 0,35 Отсутствует
0,351 – 0,69 1 Низкий
0,70 – 3,49 2 Средний
3,5 – 17,49 3 Высокий
17,5 – 49,99 4 Очень высокий
50,0 – 100,0 5 Насыщенно высокий
Больше 100,0 6 Крайне высокий

Причины положительного результата:

  • сенсибилизация к главному аллергену пыльцы березы.

При выявлении сенсибилизации к аллергену Betv1 и отсутствием IgE-антител к аллергенам Betv2 и Betv4 высокая вероятность успешной АСИТ.

У пациентов с истинной аллергией на пыльцу березы (наличием IgE-антител к Betv1) и одновременной сенсибилизацией к минорным аллергенам Betv2 и Betv4 вероятность успешной АСИТ снижается.

Причины отрицательного результата:

  • отсутствие сенсибилизации к данному аллергену;
  • длительное ограничение или исключение контакта с аллергеном;
  • успешное проведение АСИТ.

При отсутствии сенсибилизации к Betv 1 АСИТ с аллергенами пыльцы березы будет неэффективной.

Важные замечания

Выполнение данного исследования безопасно для пациента по сравнению с кожными тестами (invivo), так как исключает контакт пациента с аллергеном. Прием антигистаминных препаратов и возрастные особенности не влияют на качество и точность исследования.

Также рекомендуется

[02-029] Клинический анализ крови: общий анализ, лейкоцитарная формула, СОЭ (с микроскопией мазка крови при выявлении патологических изменений)

[08-017] Суммарные иммуноглобулины E (IgE) в сыворотке

[21-673] Аллергочип ImmunoCAP

[40-442] Аллергологическое обследование при астме/рините

[21-657] Аллерген t3 – береза бородавчатая, IgE (ImmunoCAP)

[21-665] Панель аллергенов деревьев tx5 (ImmunoCAP), IgE: ольха серая, лещина, вяз, ива, тополь

[21-664] Панель аллергенов злаковых трав gx1 (ImmunoCAP), IgE: ежа сборная, овсяница луговая, плевел, тимофеевка луговая, мятлик луговой

[21-670] Панель аллергенов сорных трав wx3 (ImmunoCAP), IgE: полынь, подорожник ланцетовидный, марь, золотарник, крапива двудомная

+ определение специфических иммуноглобулинов класса E к прочим аллергенам

Кто назначает исследование?

Аллерголог, пульмонолог, оториноларинголог, дерматолог, гастроэнтеролог, педиатр, терапевт, врач общей практики.

Литература

  1. Mothes N, Valenta R. Biology of tree pollen allergens. Curr Allergy Asthma Rep 2004;4(5):384-90
  2. Rossi RE, Monasterolo G, Monasterolo S. Detection of specific IgE antibodies in the sera of patients allergic to birch pollen using recombinant allergens Bet v 1, Bet v 2, Bet v 4: evaluation of different IgE reactivity profiles. Allergy 2003 ;58(9):929-32
  3. Kazemi-Shirazi L, Niederberger V, Linhart B, Lidholm J, Kraft D, Valenta R. Recombinant marker allergens: diagnostic gatekeepers for the treatment of allergy. Int Arch Allergy Immunol 2002;127(4):259-68
  4. Valenta R, Duchene M, Pettenburger K, Sillaber S, Valent P. Identification of profilin as a novel pollen allergen; IgE autoreactivity in sensitized individuals. Science 1991;253:557-60

AlkorBio Group. Рекомбинантные аллергены – расширение возможностей in vitro аллергодиагностики

Что это за разработка, способна ли эта инновация изменить подход к выявлению аллергии и почему сегодня ученые все чаще обращаются к теме аллергодиагностики, – об этом мы беседуем с руководителем лаборатории молекулярной диагностики компании «Вега» ГК Алкор Био Александром Павловым.

– Александр, я правильно понимаю, что вы первые в России приступили к разработке рекомбинантных аллергенов для широкого применения в лабораторной диагностике?

– Да, сегодня в России никто кроме нас не производит рекомбинантные аллергены для использования в составе тест-систем.

Наверняка в научных лабораториях такие разработки ведутся, но их применение не выходит за рамки лабораторных нужд.

Западные разработчики здесь на шаг впереди нас: существует, по крайней мере, четыре компании, в Швеции, Германии, Франции и США, которые производят рекомбинантные аллергены и предлагают их для in vitro аллергодиагностики.

– В настоящее время в Алкор Био производится 154 аллергенов, получаемых из природного сырья. Зачем вы начали разрабатывать синтетические аллергены?

– В нашей компании четыре года назад стартовал проект по созданию панели аллергенных экстрактов для применения в in vitro аллергодиагностике.

Способ получения экстрактов достаточно универсален для разного рода аллергенов, хотя, конечно, каждый аллерген требует своего собственного подхода. Этот способ заключается в тотальном экстрагировании из вещества всего содержащегося в нем белка, будь то пищевой, пыльцевой или бытовой аллерген.

На выходе мы получаем раствор, содержащий компоненты искомого вещества. При этом мы оцениваем компонентный состав, определяем общее содержание белка и иммунологические свойства.

Если иммунологические свойства, то есть эффективность выявления иммуноглобулинов класса Е (IgE) в крови у пациентов, страдающих от этого типа аллергии, достаточно высока, то данный экстракт может быть использован для диагностики аллергии.

Этот метод был разработан еще в 70-ых годах прошлого века и в настоящее время широко применяется в аллергодиагностике. С использованием таких экстрактов также проводятся так называемые кожные скарификационные и аппликационные тесты, аллергоспецифическая иммунотерапия.

Однако, по мере развития аллергодиагностики, оказалось, что специфичность этого метода, зачастую, несколько ниже, чем хотелось бы. И у данного явления есть несколько причин, одна из которых – вариабельность аллергенных экстрактов.

То есть, к примеру, пыльца деревьев раннего цветения, полученная в средней полосе России, отличается от таковой же, но полученной в южных широтах. Следовательно, есть вероятность, что не будет полного совпадения и у полученных из этого сырья экстрактов.

Кроме этого выделение экстрактов может происходить немного по-разному у разных производителей.

И третье – сам подход к выделению аллергенных экстрактов не дифференцирован по отношению к аллергенным компонентам, которые вызывают аллергию, а направлен на выделение как можно большего количества тотального белка.

– То есть в экстракте, выделенном из какого-то определенного сырья, может содержаться сразу несколько аллергенных компонентов?

– Да, во многих субстанциях аллергенные компоненты представлены не одним белком, а целым набором: двумя, тремя и даже десятью белками. И каждый из них сам по себе может вызывать реакцию. Причем, у разных людей спектр чувствительности в пределах одного аллергена может различаться. Например, рассмотрим такой распространенный аллерген, как пыльца березы.

Основной аллергенный компонент пыльцы березы вызывает аллергию в 95% случаев, когда у людей наблюдается аллергическая реакция на пыльцу березы, но есть и другие компоненты, у одних пациентов они могут вызывать аллергию, у других – нет.

Но нередко аллергенный компонент, который присутствует в растворе в очень небольших количествах, то есть является минором, вызывает довольно сильную аллергическую реакцию, то есть с точки зрения аллергодиагностики является мажором.

Может быть и такая ситуация, когда аллергены, не имеющие мажорных компонентов, с той или иной частотой вызывают аллергическую реакцию. И все эти особенности могут приводить к возникновению проблем при использовании аллергенных экстрактов недифференцированно.

Кроме этого все аллергены можно объединить в несколько так называемых суперсемейств. И внутри одного такого суперсемейства белки очень похожи. То есть это некие эволюционно консервативные структуры, белки, которые могут встречаться в широком спектре окружающих нас веществ.

Поэтому, например, такая проблема как неспецифичность и кросс-реактивность аллергенных компонентов часто бывает вызвана очень высокой степенью гомологии белков из разных природных источников.

Например, когда мы диагностируем аллергию к пыльце березы и, действительно, видим, что по результатам in vitrо теста у человека обнаруживается гиперчувствительность, это не означает на 100%, что мы поставим верный диагноз. Потому что основной компонент пыльцы березы встречается и во многих пищевых продуктах: в яблоке, груше, персике.

То есть человек уверен, что у него аллергия на березу, а оказывается, что у него аллергия, скажем, на яблоко. Потому что эти аллергены очень похожи. И таких примеров достаточно много.

Поэтому-то аллергия такое многофакторное заболевание: если у вас развился аллергический ответ на один из таких белков, то тут же может появиться ответ сразу на несколько других аллергенов.

При этом если аллерген определен не верно, нельзя назначать аллергоспецифическую терапию, когда пациенту проводят терапевтический курс инъекций аллергена, чтобы выработать невосприимчивость к нему. Эта процедура очень длительная, занимает, зачастую, несколько лет и стоимость ее – десятки тысяч рублей. А в случае, если диагноз поставлен неправильно – неправильно определен тип аллергии, неверно определен основной аллерген – это может вызвать совершенно противоположную реакцию. То есть у пациента появляется аллергическая реакция на то, на что ее прежде никогда не было.

Частичным решением вопроса может быть обогащение существующих экстрактов целевыми веществами, теми, которые мы хотим изучать, то есть аллергенными компонентами, либо использовать эти аллергенные компоненты независимо. Для того, чтобы более специфично и надежно поставить диагноз.

– Как это можно сделать? Как в процессе диагностирования аллергии избежать ошибок?

Первый подход самый простой, когда мы берем какое-то вещество и разделяем его на компоненты, то есть отсеиваем все неаллергенные и берем только аллергенные в большей концентрации. И затем каждый компонент используем независимо.

Такой подход имеет право на жизнь, к примеру, когда мы говорим о таком распространенном аллергене, как белок яйца. Здесь присутствуют такие вещества, как овальбумин и овомукоид, каждый из них является аллергеном, но нередко бывает, что одни аллергики реагируют только на овальбумин, а другие – только на овомукоид.

И овальбумин и овомукоид присутствуют в яйце в высокой концентрации. Поэтому мы можем при помощи нехитрых биохимических манипуляций выделить эти вещества в чистом виде и затем использовать в аллергодиагностике независимо друг от друга.

Но есть гораздо более сложные варианты, когда минорный компонент, то есть компонент, которого очень мало, является сильным аллергеном. Тогда для выделения этого компонента из природного источника приходится применять сложные селективные методы.

Например, если есть вещество, имеющее сродство к данному аллергенному компоненту, его добавляют к раствору аллергена, все это вместе отбирают и таким образом получают сильно обогащенную фракцию. То же самое можно сделать методом жидкостной хроматографии. Но далеко не к каждому аллергенному компоненту можно подобрать такое селектирующее вещество.

– И что делать в этом случае?

– Получить эти белки искусственно. Это и есть так называемая технология рекомбинантных белков. Ее суть заключается в том, что мы используем чужеродный организм для высокопроизводительной наработки интересующего нас вещества.

Например, если требуемый белок – растительный, можно использовать бактерию: внедрить в нее ген или участок гена, который отвечает за экспрессию, синтез необходимого нам белка. В этом случае мы говорим о технологии молекулярного клонирования, когда из генома растения вырезается определенный участок и затем вставляется в геном бактерии.

После чего мы заставляем бактерию этот белок производить. В настоящее время уже описано огромное количество аллергенных компонентов и участков геномов, которые ответственны за их синтез. То есть имеется достаточное количество информации для получения широкого спектра рекомбинантных белков.

Но здесь возникает другая проблема: да, белок при помощи этой технологии мы можем получать в неограниченных количествах, но прежде чем его использовать в аллергодиагностике, необходимо его протестировать на эффективность, а также верифицировать, то есть проверить, насколько этот белок обладает теми свойствами, которые мы от него ожидаем.

И это большой пласт работы, который следует сразу за получением искомого белка. Здесь применяется широкий спектр иммуноферментных методов, требуется большая выборка положительных и отрицательных сывороток, чтобы показать: вещество, которое мы получили – аналогично аллергенному экстракту, которое мы таким образом замещаем и/или дополняем.

В лаборатории аллергологии ГК Алкор Био была создана большая панель аллергенных экстрактов, а также тест-система для in vitrо аллергодиагностики, был собран большой банк сывороток крови пациентов и в настоящее время все эти наработки могут быть использованы для создания панели рекомбинантных белков.

Я уверен, что в дальнейшем панель аллергенов ГК Алкор Био будет расширяться, в том числе, и за счет рекомбинантных белков, хотя, конечно, процесс их получения трудоемкий и длительный.

В первую очередь имеет смысл начинать разработку белков, которые представляют наибольшую угрозу в плане получения ложных результатов, как, например, вышеупомянутый белок пыльцы березы rBetv1 – мажорный белок, проявляющий кросс-реактивность.

Использование рекомбинантных аллергенов позволит снизить вероятность ошибки при постановке диагноза, это – хорошее дополнение к панели аллергенных экстрактов, расширение которой в Группе компаний Алкор Био активно продолжается.

Аллерген туберкулезный очищенный жидкий. Владелец регистрационного удостоверения.

Аллерген туберкулезный очищенный в стандартном разведении (Туберкулин)

Очищенный туберкулин в стандартном разведении представляет собой смесь фильтратов убитых нагреванием культур микобактерий туберкулеза человеческого и бычьего видов, осажденных трихлоруксусной кислотой, обработанных этиловым спиртом и эфиром для наркоза, растворенных в фосфатно-буферном растворе с твином-80 в качестве стабилизатора и фенолом в качестве консерванта.

Препарат имеет вид бесцветной прозрачной жидкости.

Выпускается в ампулах в виде раствора, содержащего в 0,1 мл 2 туберкулиновые единицы (ТЕ), по 3 мл (30 доз), 2 мл (20 доз) или 1 мл (10 доз); 10 ампул в упаковке.

Биологические и Иммунологические свойства

Действующее начало Туберкулина аллерген — туберкулопротеин, вызывает при постановке внутрикожной туберкулиновой пробы у инфицированных или вакцинированных лиц специфическую реакцию гиперчувствительности замедленного типа в виде местной реакции — гиперемии и инфильтрата (папулы).

Туберкулин предназначен для массовой туберкулинодиагностики, с целью:

С целью отбора контингента для ревакцинации БЦЖ, а также перед первичной вакцинацией детей в возрасте 2 месяца и более. для диагностики туберкулеза, в том числе для раннего выявления начальных и локальных форм туберкулеза у детей и подростков. для определения инфицирования микобактериями туберкулеза.

Способ применения и дозы

Применяют для постановки внутрикожной пробы Манту Препарат вводят строго внутрикожно. Пробу Манту ставят пациентам обязательно в положении сидя, т.к. у эмоционально лабильных лиц инъекция может стать причиной обморока. Для проведения внутрикожной пробы применяют однограммовые туберкулиновые шприцы разового использования с короткими тонкими иглами.

Запрещается применять для пробы Манту инсулиновые шприцы и шприцы и иглы с истекшим сроком годности.

Ампулу с препаратом тщательно обтирают марлей, смоченной 70° этиловым спиртом, затем шейку ампулы подпиливают ножом для вскрытия ампул и отламывают. Извлечение туберкулина из ампулы проводят шприцем, которым осуществляют пробу Манту, с иглой № 0845. Набирают 0,2 мл, т. е. 2 дозы туберкулина, насаживают тонкую иглу, выпускают раствор до метки 0,1 мл в стерильный ватный тампон. Ампулу после вскрытия допускается хранить в асептических условиях не более 2 часов.

На внутренней поверхности средней трети предплечья участок кожи обрабатывают 70° этиловым спиртом и просушивают стерильной ватой. Тонкую иглу срезом вверх вводят в верхние слои кожи параллельно ее поверхности — внутрикожно. После введения иглы в кожу из шприца вводят строго по делению шкалы 0,1 мл (2 ТЕ) препарата, т.е. 1 дозу. При правильной технике введения в коже образуется папула беловатого цвета в виде ”лимонной корочки”, размером 7 — 10 мм в диаметре. Пробу Манту ставит по назначению врача специально обученная медсестра, имеющая документ — допуск к проведению туберкулинодиагностики.

Результаты туберкулиновой пробы оценивает врач или специально обученная медсестра. Результат пробы Манту оценивают через 72 ч путем измерения размера инфильтрата (папулы) в мм. Прозрачной линейкой с миллиметровыми делениями измеряют и регистрируют поперечный (по отношению к оси предплечья) размер инфильтрата. Гиперемию учитывают тольво в случае отсутствия инфильтрата. При постановке проб Манту, реакция считается:

Отрицательной — при полном отсутствии инфильтрата (папулы) и гиперемии или при наличии уколочной реакции (0 -1 мм); сомнительной — при инфильтрате размером (2-4 мм) или тольсо гиперемии любого размера без инфильтрата; положительной — при наличии инфильтрата диаметром 6 мм и более; гиперергической — у детей и подростков считается реакция с диаметром инфильтрата 17мм и более, у взрослых — 21мм и более, а также визикулонекротические реакции независимо от размера инфильтрата с лимфангоитом или без него.

Реакция на введение туберкулина

Находится в зависимости от уровня специфической реактивности организма.

У отдельных лиц с высокой степенью гиперчувствительности замедленного типа к туберкулину, местные реакции могут сопровождаться лимфангоитами и лимфаденитами. Кроме того, иногда наблюдают общую реакцию: недомогание, головная боль, повышение температуры.

Здоровым лицам, с сомнительной или положительной реакцией на пробу Манту и детям с отрицательной реакцией на туберкулин, но не подлежащим вакцинации БЦЖ, все профилактические прививки можно проводить непосредственно после оценки результатов пробы Манту.

Распространенные кожные заболевания, эпилепсия, острые, хронические инфекционные и соматические заболевания в период обострения, аллергические состояния (ревматизм в острой и подострой фазах, бронхиальная астма, идиосинкразии с выраженными кожными проявлениями в период обострений). Проба Манту ставится череэ 1 месяц после исчезновения всех клинических симптомов или сразу после снятия карантина. Не допускается проведение пробы Манту в тех детских коллективах, где имеется карантин по детским инфекциям.

Профилактические прививки могут повлиять на чувствительность к туберкулину. Исходя из этого, туберкупинодиагностику необходимо планировать до проведения профилактических прививок против различных инфекций. В случае, если профилактическая прививка была проведена, то туберкулинодиагностика должна осуществляться не ранее, чем через 1 месяц после прививки.

С целью выявления противопокаэаний врач (медицинская сестра) в день постановки туберкулиновых проб проводят опрос и осмотр подвергаемых пробе лиц.

Хранят при температуре от 2 до 8 °С.
Срок годности — 1 год.

Туберкулин Полная информация по препарату. Туберкулин Фармакология, показания к применению, противопоказания, способ применения, побочные действия, Туберкулин лекарственное взаимодействие, беременность, передозировка, форма выпуска, условия хранения, состав.

Состав, форма выпуска, упаковка

представляет собой смесь фильтратов убитых нагреванием культур микобактерий туберкулеза человеческого и бычьего видов, осажденных трихлоруксусной кислотой, обработанных этиловым спиртом и эфиром для наркоза, растворенных в фосфатно-буферном растворе с твином-80 в качестве стабилизатора и фенолом в качестве консерванта.

раствор для инъекций.

Выпускается в ампулах в виде раствора, содержащего в 0,1 мл 2 туберкулиновые единицы (ТЕ), по 3 мл (30 доз), 2 мл (20 доз) или 1 мл (10 доз); 10 ампул в упаковке.

Фармакологические свойства

Фармакологическое действие

Действующее начало Туберкулина аллерген — туберкулопротеин, вызывает при постановке внутрикожной туберкулиновой пробы у инфицированных или вакцинированных лиц специфическую реакцию гиперчувствительности замедленного типа в виде местной реакции — гиперемии и инфильтрата (папулы).

Показания

Показания

Туберкулин предназначен для массовой туберкулинодиагностики, с целью:

  • с целью отбора контингента для ревакцинации БЦЖ, а также перед первичной вакцинацией детей в возрасте 2 месяца и более.
  • для диагностики туберкулеза, в том числе для раннего выявления начальных и локальных форм туберкулеза у детей и подростков.
  • для определения инфицирования микобактериями туберкулеза.

Способ применения и дозы

Способ применения и дозы

Применяют для постановки внутрикожной пробы Манту Препарат вводят строго внутрикожно. Пробу Манту ставят пациентам обязательно в положении сидя, т.к. у эмоционально лабильных лиц инъекция может стать причиной обморока. Для проведения внутрикожной пробы применяют однограммовые туберкулиновые шприцы разового использования с короткими тонкими иглами.

Запрещается применять для пробы Манту инсулиновые шприцы и шприцы и иглы с истекшим сроком годности.

Ампулу с препаратом тщательно обтирают марлей, смоченной 70° этиловым спиртом, затем шейку ампулы подпиливают ножом для вскрытия ампул и отламывают. Извлечение туберкулина из ампулы проводят шприцем, которым осуществляют пробу Манту, с иглой № 0845. Набирают 0,2 мл, т. е. 2 дозы туберкулина, насаживают тонкую иглу, выпускают раствор до метки 0,1 мл в стерильный ватный тампон. Ампулу после вскрытия допускается хранить в асептических условиях не более 2 часов.

На внутренней поверхности средней трети предплечья участок кожи обрабатывают 70° этиловым спиртом и просушивают стерильной ватой. Тонкую иглу срезом вверх вводят в верхние слои кожи параллельно ее поверхности — внутрикожно. После введения иглы в кожу из шприца вводят строго по делению шкалы 0,1 мл (2 ТЕ) препарата, т.е. 1 дозу. При правильной технике введения в коже образуется папула беловатого цвета в виде ”лимонной корочки”, размером 7 — 10 мм в диаметре. Пробу Манту ставит по назначению врача специально обученная медсестра, имеющая документ — допуск к проведению туберкулинодиагностики.

Результаты туберкулиновой пробы оценивает врач или специально обученная медсестра. Результат пробы Манту оценивают через 72 ч путем измерения размера инфильтрата (папулы) в мм. Прозрачной линейкой с миллиметровыми делениями измеряют и регистрируют поперечный (по отношению к оси предплечья) размер инфильтрата. Гиперемию учитывают тольво в случае отсутствия инфильтрата. При постановке проб Манту, реакция считается:
— отрицательной — при полном отсутствии инфильтрата (папулы) и гиперемии или при наличии уколочной реакции (0 -1 мм);
— сомнительной — при инфильтрате размером (2-4 мм) или тольсо гиперемии любого размера без инфильтрата;
— положительной — при наличии инфильтрата диаметром 6 мм и более;
— гиперергической — у детей и подростков считается реакция с диаметром инфильтрата 17мм и более, у взрослых — 21мм и более, а также визикулонекротические реакции независимо от размера инфильтрата с лимфангоитом или без него.

Реакция на введение туберкулина

Находится в зависимости от уровня специфической реактивности организма.
У отдельных лиц с высокой степенью гиперчувствительности замедленного типа к
туберкулину, местные реакции могут сопровождаться лимфангоитами и лимфаденитами. Кроме того, иногда наблюдают общую реакцию: недомогание, головная боль, повышение температуры.
Здоровым лицам, с сомнительной или положительной реакцией на пробу Манту и детям с отрицательной реакцией на туберкулин, но не подлежащим вакцинации БЦЖ, все профилактические прививки можно проводить непосредственно после оценки результатов пробы Манту.

Побочные действия

Противопоказания

Распространенные кожные заболевания, эпилепсия, острые, хронические инфекционные и соматические заболевания в период обострения, аллергические состояния (ревматизм в острой и подострой фазах, бронхиальная астма, идиосинкразии с выраженными кожными проявлениями в период обострений). Проба Манту ставится череэ 1 месяц после исчезновения всех клинических симптомов или сразу после снятия карантина. Не допускается проведение пробы Манту в тех детских коллективах, где имеется карантин по детским инфекциям.

Профилактические прививки могут повлиять на чувствительность к туберкулину. Исходя из этого, туберкупинодиагностику необходимо планировать до проведения профилактических прививок против различных инфекций. В случае, если профилактическая прививка была проведена, то туберкулинодиагностика должна осуществляться не ранее, чем через 1 месяц после прививки.
С целью выявления противопокаэаний врач (медицинская сестра) в день постановки туберкулиновых проб проводят опрос и осмотр подвергаемых пробе лиц.

ПРИКАЗ Минздрава РФ от 21-03-2003 109 (ред от 29-10-2009) О СОВЕРШЕНСТВОВАНИИ ПРОТИВОТУБЕРКУЛЕЗНЫХ МЕРОПРИЯТИЙ В РОССИЙСКОЙ. Актуально в 2020 году

ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ ТУБЕРКУЛИНОВЫХ ПРОБ

от 29.10.2009 N 855)

Туберкулинодиагностика — диагностический тест для определения специфической сенсибилизации организма к микобактериям туберкулеза (МБТ). Как специфический тест применяется при массовых обследованиях населения на туберкулез (массовая туберкулинодиагностика) и для индивидуальных обследований (индивидуальная туберкулинодиагностика).

1.1. Цели массовой туберкулинодиагностики:

Выявление лиц, впервые инфицированных МБТ («вираж» туберкулиновых проб);

Выявление лиц с гиперергическими и усиливающимися реакциями на туберкулин;

Отбор контингентов для противотуберкулезной прививки вакциной БЦЖ-М детей в возрасте 2 месяцев и старше, не получивших прививку в роддоме, и для ревакцинации вакциной БЦЖ;

Ранняя диагностика туберкулеза у детей и подростков;

Определение эпидемиологических показателей по туберкулезу (инфицированность населения МБТ, ежегодный риск инфицирования МБТ).

При массовой туберкулинодиагностике применяют только единую внутрикожную туберкулиновую пробу Манту с 2 туберкулиновыми единицами (ТЕ) очищенного туберкулина в стандартном разведении (готовая форма).

1.2. Цели индивидуальной туберкулинодиагностики:

Дифференциальная диагностика поствакцинальной и инфекционной аллергии к туберкулину;

Диагностика и дифференциальная диагностика туберкулеза и других заболеваний;

Определение «порога» индивидуальной чувствительности к туберкулину;

Определение активности туберкулезного процесса;

Оценка эффективности противотуберкулезного лечения.

При индивидуальной туберкулинодиагностике применяют, кроме пробы Манту с 2 ТЕ очищенного туберкулина в стандартном разведении, пробы Манту с различными дозами туберкулина, накожную градуированную пробу Пирке, пробу Коха, определение туберкулинового титра и др. Для проведения индивидуальной туберкулинодиагностики используют: очищенный туберкулин в стандартном разведении и сухой очищенный туберкулин.

Туберкулиновые препараты — препараты из антигенов МБТ или их культуральных фильтратов, обработанных различными способами.

Допускается использование только зарегистрированных в Российской Федерации препаратов туберкулина.

Туберкулиновые препараты используют для туберкулинодиагностики (очищенные туберкулины) и для выявления антител к МБТ (диагностикум эритроцитарный туберкулезный антигенный сухой и ИФА тест-системы).

Изготавливают из смеси убитых нагреванием фильтратов культуры МБТ человеческого и бычьего видов, очищенных ультрафильтрацией, осажденных трихлоруксусной кислотой, обработанных этиловым спиртом и эфиром. Используют два вида очищенного туберкулина.

Аллерген туберкулезный очищенный жидкий (очищенный туберкулин в стандартном разведении) — готовые к употреблению растворы туберкулина. Препарат представляет собой раствор очищенного туберкулина в фосфатном буфере с твином-80 в качестве стабилизатора и фенолом в качестве консерванта, бесцветная прозрачная жидкость. Препарат выпускают в ампулах в виде раствора, содержащего 2 ТЕ ППД-Л в 0,1 мл. Возможен выпуск 5 ТЕ, 10 ТЕ в 0,1 мл и других дозировок препарата. Срок годности — 1 год. Выпуск готовых к употреблению разведений ППД-Л (модификация Линниковой) позволяет использовать в стране для массовой туберкулинодиагностики стандартный по активности препарат и избежать ошибок при разведении туберкулина на местах его применения.

Аллерген туберкулезный очищенный сухой (сухой очищенный туберкулин) — это растворенный в фосфатном буфере с сахарозой лиофильно высушенный очищенный туберкулин. Препарат имеет вид сухой компактной массы или порошка белого (слегка сероватого или кремового) цвета, легко растворяющегося в прилагаемом растворителе — карболизированном изотоническом растворе натрия хлорида. Выпускается в ампулах, содержащих 50000 ТЕ. Срок годности — 5 лет. Сухой очищенный туберкулин используют для диагностики туберкулеза и туберкулинотерапии только в противотуберкулезных диспансерах и стационарах.

Специфическая активность туберкулиновых препаратов устанавливается и контролируется относительно национального стандарта туберкулина ППД.

В каждой коробке с туберкулинами имеется инструкция по применению препаратов с подробной их характеристикой. Ознакомление с этой инструкцией врача и медицинской сестры перед туберкулинодиагностикой обязательно.

Диагностикум эритроцитарный туберкулезный антигенный сухой — бараньи эритроциты, сенсибилизированные фосфатидным антигеном МБТ, пористая масса или порошок красновато-коричневого цвета. Предназначен для выявления в реакции непрямой гемагглютинации (РНГА) специфических антител к антигенам МБТ. В клинике туберкулеза используют как иммунологический тест для определения активности процесса и эффективности лечения. Тест-система иммуноферментная для определения антител к возбудителю туберкулеза. Представляет собой набор ингредиентов для проведения иммуноферментного анализа на твердофазном носителе. Предназначена для выявления антител к возбудителю туберкулеза в сыворотке крови больных. Используют для лабораторного подтверждения диагноза «туберкулез различной локализации», оценки эффективности лечения, назначения специфической иммунокоррекции. Чувствительность иммуноферментного анализа при туберкулезе составляет 60 — 70%, а специфичность около 90%, что не позволяет использовать тест-систему для скрининга туберкулезной инфекции.

Для проведения внутрикожной пробы Манту применяют однограммовые туберкулиновые шприцы разового использования с тонкими короткими иглами с коротким косым срезом. Запрещается применять шприцы и иглы с истекшим сроком годности, поэтому перед употреблением необходимо проверить дату их выпуска и срок годности. Использование инсулиновых шприцев для проведения туберкулинодиагностики запрещается.

Забор туберкулина из ампулы: ампулу с препаратом тщательно обтирают марлей, смоченной 70° этиловым спиртом, затем шейку ампулы подпиливают ножом для вскрытия ампул и отламывают. Извлечение туберкулина из ампулы производят шприцем, которым осуществляют пробу Манту, и иглой N 0845. Набирают 0,2 мл (т.е. две дозы) туберкулина, насаживают иглу туберкулинового шприца, выпускают раствор до метки 0,1 в стерильный ватный тампон. Ампулу после вскрытия сохраняют в асептических условиях не более 2 ч.

Пробу Манту производят пациентам обязательно в положении сидя, так как у эмоционально лабильных лиц инъекция может стать причиной обморока.

На внутренней поверхности средней трети предплечья участок кожи обрабатывают 70° этиловым спиртом, просушивают стерильной ватой. Тонкую иглу вводят срезом вверх в верхние слои натянутой кожи (внутрикожно) параллельно ее поверхности. После введения отверстия иглы в кожу из шприца вводят 0,1 мл раствора туберкулина, т.е. одну дозу. При правильной технике в коже образуется папула в виде «лимонной корочки» размером не мене 7 — 9 мм в диаметре беловатого цвета.

Пробу Манту производит по назначению врача специально обученная медицинская сестра.

Результаты туберкулиновой пробы оценивает врач или специально обученная медсестра, проводившая эту пробу.

Результат пробы Манту оценивают через 72 часа путем измерения размера инфильтрата (папулы) в миллиметрах (мм). Линейкой с миллиметровыми делениями измеряют и регистрируют поперечный (по отношению к оси предплечья) размер инфильтрата. При отсутствии инфильтрата при учете реакции на пробу Манту измеряют и регистрируют гиперемию.

При постановке пробы Манту реакцию считают:

Отрицательной при полном отсутствии инфильтрата (папулы) или гиперемии или при наличии уколочной реакции (0 — 1 мм);

Сомнительной при инфильтрате размером 2 — 4 мм или только гиперемии любого размера без инфильтрата;

Положительной при наличии инфильтрата диаметром 5 мм и более.

Слабоположительными считают реакции с размером инфильтрата 5 — 9 мм в диаметре, средней интенсивности — 10 — 14 мм, выраженными — 15 — 16 мм. Гиперергическими у детей и подростков считают реакции с диаметром инфильтрата 17 и более, у взрослых — 21 мм и более, а также везикуло-некротические реакции независимо от размера инфильтрата с лимфангоитом или без него; усиливающейся реакцией на туберкулин считают увеличение инфильтрата на 6 мм и более по сравнению с предыдущей реакцией.

При массовой туберкулинодиагностике пробу Манту с 2 ТЕ ППД-Л применяют:

а) для раннего выявления начальных и локальных форм туберкулеза у детей и подростков. С этой целью проводят наблюдение за динамикой послевакцинной аллергии и выявление первичного инфицирования («виража» туберкулиновых реакций), а также определяют гиперергические и усиливающиеся реакции у ранее инфицированных туберкулезом лиц;

б) для отбора контингентов, подлежащих ревакцинации против туберкулеза, а также перед первичной вакцинацией детей в возрасте 2 месяца и более, не вакцинированных в роддоме;

в) для определения инфицированности МБТ и риска первичного инфицирования.

Правильная интерпретация реакции на пробу Манту с 2 ТЕ для своевременного выявления групп повышенного риска заболевания и определения инфицированности МБТ обеспечивают соблюдением точной техники проведения туберкулиновой пробы и оценки реакции на нее.

В организованных коллективах массовая туберкулинодиагностика проводится специально обученным медицинским персоналом учреждения или бригадным методом, который является предпочтительным. При бригадном методе обследования детей и подростков формирование специальных бригад (2 медсестры и врач) для массовой туберкулинодиагностики среди организованных детей (детские ясли, сады, школы) и ревакцинации БЦЖ в декретированных возрастных группах школьников возлагают на детские поликлиники. Из имеющихся штатов поликлиник и детских учреждений главным врачом поликлиники выделяется медицинский персонал, а также утверждается график его работы в детских коллективах. Неорганизованным детям раннего и дошкольного возраста пробы Манту с 2 ТЕ ППД-Л ставят в детской поликлинике. В сельской местности туберкулинодиагностику производят районные сельские участковые больницы и фельдшерско-акушерские пункты.

Методическое руководство проведением пробы Манту осуществляет врач-педиатр противотуберкулезного диспансера (кабинета). При отсутствии противотуберкулезного диспансера (кабинета) работу выполняет заведующий поликлиническим отделением по детству (районный педиатр) совместно с участковым врачом-фтизиатром.

Здоровым детям и подросткам, инфицированным МБТ, а также с положительной (сомнительной) послевакцинной туберкулиновой чувствительностью и детям с отрицательной реакцией на туберкулин, но не подлежащим ревакцинации БЦЖ, все профилактические прививки можно производить непосредственно после оценки результатов пробы Манту. В случае установления «виража» туберкулиновых реакций, а также гиперергической или усиливающейся реакции на туберкулин, без функциональных и локальных проявлений туберкулеза у детей, профилактические прививки проводятся не раньше чем через 6 месяцев.

Результаты пробы Манту у детей и подростков фиксируют в учетной форме N 063/у, в медицинской карте ребенка (форма N 026/у) и в истории развития ребенка (форма N 112/у). При этом отмечают: а) предприятие — изготовитель туберкулина, номер серии, срок годности; б) дату проведения пробы; в) введение препарата в правое или левое предплечье; г) результат пробы — в виде размера инфильтрата (папулы) в мм; при отсутствии инфильтрата указывают размер гиперемии.

При поступлении ребенка в детский стационар, санаторий или санаторно-оздоровительное учреждение в историю развития, медицинскую карту ребенка (ф. N 112/у или ф. N 026/у) или в выписку из истории болезни обязательно переносят все данные о предыдущих внутрикожных туберкулиновых пробах. Сведения о профилактических прививках и результатах туберкулиновых проб (форма N 063/у) передают в подростковые кабинеты амбулаторно-поликлинических учреждений при достижении ребенком 15-летнего возраста, а также по месту учебы подростка — в средние специальные учебные заведения (ПТУ, техникумы, училища), в вуз.

При правильной организации мероприятий по раннему выявлению туберкулеза ежегодно туберкулинодиагностикой должно охватываться 90 — 95% детского и подросткового населения административной территории.

Проба Манту с 2 ТЕ ППД-Л безвредна как для здоровых детей и подростков, так и для лиц с различными соматическими заболеваниями. Однако перенесенные заболевания и предшествующие прививки могут влиять на чувствительность кожи ребенка к туберкулину, усиливая или ослабляя ее. Это затрудняет последующую интерпретацию динамики чувствительности к туберкулину и является основой при определении перечня противопоказаний.

Противопоказания для постановки туберкулиновых проб с 2 ТЕ в период массовой туберкулинодиагностики:

Кожные заболевания, острые и хронические инфекционные и соматические заболевания (в том числе эпилепсия) в период обострения;

Аллергические состояния, ревматизм в острой и подострой фазах, бронхиальная астма, идиосинкразии с выраженными кожными проявлениями в период обострения.

С целью выявления противопоказаний врач (медицинская сестра) перед постановкой туберкулиновых проб проводит изучение медицинской документации, а также опрос и осмотр подвергаемых пробе лиц. Не допускается проведение пробы Манту в тех детских коллективах, где имеется карантин по детским инфекциям. Пробу Манту ставят через 1 месяц после исчезновения клинических симптомов или сразу после снятия карантина.

Профилактические прививки также могут влиять на чувствительность к туберкулину. Исходя из этого туберкулинодиагностику необходимо планировать до проведения профилактических прививок против различных инфекций (АКДС, кори и т.д.). В случаях, если по тем или иным причинам пробу Манту производят не до, а после проведения различных профилактических прививок, туберкулинодиагностика должна осуществляться не ранее чем через 1 месяц после прививки.

С целью раннего выявления туберкулеза пробу Манту с 2 ТЕ ставят всем вакцинированным против туберкулеза детям с 12-месячного возраста и подросткам ежегодно независимо от предыдущего результата.

Детям, не привитым вакциной БЦЖ в период новорожденности, при сохранении медицинских противопоказаний пробу Манту ставят 2 раза в год, начиная с 6-месячного возраста до получения ребенком прививки вакциной БЦЖ-М. Пробу Манту проводят на внутренней поверхности предплечья: правое и левое предплечье чередуют. Рекомендуется проведение туберкулиновой пробы осуществлять в одно и то же время года, преимущественно осенью.

С целью установления первичного инфицирования при массовой туберкулинодиагностике необходимо направлять к фтизиатру следующих детей:

С подозрением на «вираж» туберкулиновых проб;

С усиливающейся чувствительностью к туберкулину;

С гиперергической чувствительностью к туберкулину.

Дети, направляемые к фтизиатру, должны иметь при себе сведения:

О вакцинации (ревакцинации БЦЖ);

О результатах туберкулиновых проб по годам;

О контакте с больным туберкулезом;

О флюорографическом обследовании окружения ребенка;

О перенесенных хронических и аллергических заболеваниях;

О предыдущих обследованиях у фтизиатра;

Данные клинико-лабораторного обследования (общий анализ крови и мочи);

Заключение соответствующих специалистов при наличии сопутствующей патологии.

При решении врачом вопроса о том, связана ли положительная реакция на туберкулин у ребенка (подростка) с инфицированием МБТ или она отражает послевакцинную аллергию, следует учитывать:

Интенсивность положительной туберкулиновой реакции;

Количество полученных прививок БЦЖ;

Наличие и размер послевакцинных рубчиков;

Срок, прошедший после прививки;

Наличие или отсутствие контакта с больным туберкулезом;

Наличие клинических признаков заболевания.

При интерпретации динамики чувствительности к туберкулину следует также учитывать, что на интенсивность реакций на пробу Манту может влиять ряд факторов, определяющих общую реактивность организма: наличие соматической патологии, общая аллергическая настроенность организма, фаза овариального цикла у девушек, индивидуальный характер чувствительности кожи, сбалансированность питания ребенка и пр. Выраженное воздействие на результаты массовой туберкулинодиагностики оказывают неблагоприятные экологические факторы: повышенный радиационный фон, наличие вредных выбросов химических производств и т.д. На результаты туберкулинодиагностики могут влиять различные нарушения в методике ее проведения: применение нестандартного и некачественного инструментария, погрешности в технике постановки и чтения результатов пробы Манту, нарушение режима транспортирования и хранения туберкулина.

Впервые положительную реакцию (папула 5 мм и более), не связанную с иммунизацией вакциной БЦЖ («вираж»);

Стойко (на протяжении 4 — 5 лет) сохраняющуюся реакцию с инфильтратом 12 мм и более;

Резкое усиление чувствительности к туберкулину (на 6 мм и более) в течение одного года (у туберкулиноположительных детей и подростков);

Постепенное, в течение нескольких лет, усиление чувствительности к туберкулину с образованием инфильтрата размерами 12 мм и более.

Все дети (старше трех лет), у которых произошел переход ранее отрицательных туберкулиновых реакций в положительные, а также дети с усиливающейся чувствительностью к туберкулину при наличии контакта с больным туберкулезом, после исключения активного туберкулезного процесса, берутся на учет ПТД по VI группе.

Первая положительная реакция на туберкулин у двух-трехлетнего ребенка может быть проявлением поствакцинальной аллергии. Избежать случаев гипо- или гипердиагностики при решении вопроса о необходимости наблюдения в противотуберкулезном диспансере позволит объективная оценка состояния ребенка, эпидемиологического анамнеза, а также динамическое наблюдение за ребенком в «0» группе с повторной туберкулинодиагностикой через 3 месяца. Осмотр данных детей проводят в учреждениях общей лечебной сети.

Нарастание чувствительности к туберкулину (в т.ч. и гиперергические реакции) у детей и подростков с соматической патологией, бактериальной инфекцией, аллергическими, частыми простудными заболеваниями иногда связано не с инфицированием МБТ, а с влиянием перечисленных неспецифических факторов. При трудности интерпретации характера чувствительности к туберкулину дети также подлежат предварительному наблюдению в «0» группе диспансерного учета с обязательным проведением лечебно-профилактических мероприятий на педиатрическом участке (гипосенсибилизация, санация очагов инфекции, дегельминтизация, достижение периода ремиссии при хронических заболеваниях) под контролем детского фтизиатра. Повторное обследование в диспансере проводят через 1 — 3 месяца. Снижение после неспецифического лечения чувствительности к туберкулину свидетельствует о неспецифическом характере аллергии. Детям с частыми клиническими проявлениями неспецифической аллергии пробу Манту 2 ТЕ рекомендуется ставить на фоне приема десенсибилизирующих средств в течение 7 дней (5 дней до постановки и 2 дня после нее). Сохранение чувствительности к туберкулину на прежнем уровне либо ее дальнейшее нарастание, несмотря на лечебно-профилактические мероприятия, подтверждает инфекционный характер аллергии и требует последующего диспансерного наблюдения ребенка.

Диагностические мероприятия при постановке ребенка на учет в диспансерную группу включают:

Туберкулинодиагностику (проба Манту с 2 ТЕ, накожная градуированная проба);

Общие клинические анализы крови и мочи.

Целью ежегодного проведения пробы Манту заведомо инфицированным МБТ детям и подросткам является выявление лиц с гиперергическими реакциями или с резким усилением реакций меньшего размера, что указывает на риск развития локального туберкулеза.

С целью отбора детей и подростков для ревакцинации БЦЖ пробу Манту с 2 ТЕ ППД-Л ставят в декретированных возрастных группах — 7 лет (0 — 1 классы средней школы) и 14 лет (8 — 9 классы). Ревакцинацию проводят не инфицированным туберкулезом, клинически здоровым лицам с отрицательной реакцией на пробу Манту с 2 ТЕ ППД-Л.

Индивидуальная туберкулинодиагностика применяется для диагностики локального туберкулеза по клиническим показаниям, независимо от срока постановки предшествующей пробы. Противопоказаний, кроме индивидуальной непереносимости туберкулина, не имеется.

Диагностическую туберкулиновую пробу с использованием очищенного туберкулина в стандартном разведении (2 ТЕ) можно проводить в противотуберкулезных диспансерах, детских поликлиниках, соматических и инфекционных стационарах.

Диагностическую туберкулиновую пробу с использованием сухого очищенного туберкулина (Приложение N 1) можно проводить только в противотуберкулезных диспансерах, туберкулезных стационарах и санаториях.

Индивидуальная туберкулинодиагностика как диагностический тест проводится в следующих случаях:

При наличии хронических заболеваний различных органов и систем с торпидным, волнообразным течением, при неэффективности традиционных методов лечения и наличии дополнительных факторов риска по инфицированию МБТ и заболеванию туберкулезом (контакт с больным туберкулезом, отсутствие вакцинации против туберкулеза, социальные факторы риска и т.д.);

Для определения активности туберкулезного процесса;

Для определения локализации туберкулезного процесса;

Для оценки эффективности проведенного противотуберкулезного лечения.

Для индивидуальной диагностики используют пробу Манту с 2 ТЕ очищенного туберкулина в стандартном разведении, накожная градуированная проба, внутрикожные пробы Манту с различными разведениями сухого очищенного туберкулина, определение внутрикожного туберкулинового титра. Техника проведения данных методик диагностики отражена в инструкции по применению аллергена туберкулезного очищенного сухого.

Дети, нуждающиеся в постановке туберкулиновой пробы с 2 ТЕ 2 раза в год в условиях общей лечебной сети:

Больные сахарным диабетом, язвенной болезнью, болезнями крови, системными заболеваниями, ВИЧ-инфицированные, получающие длительную гормональную терапию (более 1 месяца);

С хроническими неспецифическими заболеваниями (пневмонией, бронхитом, тонзиллитом), субфебрилитетом неясной этиологии;

Не вакцинированные против туберкулеза, независимо от возраста ребенка.

В приютах, центрах временной изоляции несовершеннолетних правонарушителей, приемниках-распределителях и в других учреждениях для детей и подростков из социальных групп риска, не имеющих медицинской документации, туберкулиновую пробу Манту с 2 ТЕ ППД-Л проводят при поступлении ребенка в это учреждение и далее 2 раза в год в течение 2-х лет при непрерывном медицинском наблюдении с последующим переходом на ежегодную туберкулинодиагностику.

Детям и подросткам из социальных групп риска (включая мигрантов и беженцев), имеющим медицинскую документацию, при оформлении в детские и подростковые коллективы туберкулиновую пробу Манту с 2 ТЕ ППД-Л проводят, если после предыдущей пробы прошло более 6 месяцев, с последующей постановкой 1 раз в год при регулярном медицинском наблюдении.

Все дети и подростки из социальных групп риска, имеющие выраженную реакцию на туберкулин (папула размером 15 мм и более), должны быть обследованы и наблюдаться в противотуберкулезных диспансерах (в VI-Б группе).

1. Бикс размером 18 x 14 см со стерильными ватными шариками.

2. Туберкулиновые шприцы одноразового использования с тонкими короткими иглами с коротким косым срезом.

3. Линейки миллиметровые длиной 100 мм из пластмассы.

4. Флакон емкостью 50 мл с нашатырным спиртом.

5. Флакон емкостью 50 мл с этиловым спиртом.

6. Иглы инъекционные N 0840 для извлечения туберкулина из флакона.

7. Пинцеты анатомические длиной 15 см.

Составление плана туберкулинодиагностики в зоне обслуживания амбулаторно-поликлинических учреждений осуществляют главные врачи учреждений при участии противотуберкулезных диспансеров.

Сводный план, предусматривающий количество обследуемых детей, подростков и взрослых, как с целью ранней диагностики, так и отбора контингентов для ревакцинации БЦЖ по области, городу, району, составляет центр государственного санитарно-эпидемиологического надзора совместно с главными педиатрами (терапевтами) и противотуберкулезными диспансерами.

В плане туберкулинодиагностики по области, городу, району предусматривают:

Учет всех детей, подростков и взрослых, подлежащих ежегодной туберкулинодиагностике, с выделением возрастных групп, подлежащих ревакцинации;

Календарный план обследования контингентов;

Подготовку медицинского персонала для проведения туберкулинодиагностики;

Приобретение необходимого количества инструментария;

Расчет потребности в туберкулине.

Потребность в очищенном туберкулине в стандартном разведении (2 ТЕ ППД-Л) исчисляют из расчета две дозы по 0,1 мл на каждого обследуемого. При этом необходимо учитывать, что в ампуле содержится 30 доз (3 мл), которые используют на постановку пробы 15 людям. Один литр туберкулина содержит 10000 доз, которые используют для обследования 5000 человек.

Приложение N 1
к Инструкции по применению
туберкулиновых проб

Сухой очищенный туберкулин представляет собой смесь фильтратов убитых нагреванием культур микобактерий туберкулеза (МБТ) человеческого и бычьего видов, очищенных ультрафильтрацией, осажденных трихлоруксусной кислотой, обработанных этиловым спиртом и эфиром для наркоза, растворенных в фосфатно-буферном растворе с сахарозой и лиофилизированных. Препарат имеет вид сухой компактной массы или аморфного порошка серовато-белого цвета, легко растворяется в прилагаемом растворителе — карболизированном растворе натрия хлорида. Препарат выпускают в ампулах; одна ампула содержит 50000 туберкулиновых единиц (ТЕ).

Биологические и иммунологические свойства. Действующее начало препарата аллерген — туберкулопротеин, вызывает при постановке кожных туберкулиновых проб у инфицированных или вакцинированных лиц специфическую реакцию гиперчувствительности замедленного типа в виде местной реакции — гиперемии и инфильтрата (папулы).

Назначение. Препарат предназначен для диагностики туберкулеза в условиях противотуберкулезного диспансера или специализированной клиники.

Способ применения и дозировка. Применяют для постановки внутрикожной пробы Манту с различными дозами туберкулина, для накожных и подкожных туберкулиновых проб (градуированная кожная проба, подкожная проба, определение туберкулинового подкожного и внутрикожного титра, эозинофильно-туберкулиновая проба, гемо-белково-туберкулиновая проба и другие).

Туберкулиновые пробы проводят пациентам в положении сидя, т.к. у эмоционально лабильных людей инъекция может стать причиной обморока.

Разведения сухого очищенного туберкулина готовят следующим образом: ампулу протирают марлей, смоченной 70° этиловым спиртом, затем шейку ампулы подпиливают ножом для вскрытия ампул и отламывают. Аналогичным образом вскрывают ампулу с растворителем.

Для внутрикожных проб сухой очищенный туберкулин разводят следующим образом: содержимое ампулы разводят 1 мл растворителя и получают таким образом основное разведение — 50000 ТЕ в 1 мл.

1-е разведение, соответствующее 1000 ТЕ в 0,1 мл, готовят, добавив в ампулу с основным разведением еще 4 мл растворителя — карболизированного раствора натрия хлорида (либо во флакон наливают 2 мл карболизированного изотонического раствора натрия хлорида и добавляют туда 0,5 мл основного разведения).

Растворитель — карболизированный раствор натрия хлорида готовят в аптеке прибавлением к 100 мл стерильного 0,9% раствора натрия хлорида 0,25 г кристаллического фенола; растворитель стерилизуют в автоклаве.

Все последующие разведения готовят, разводя предыдущее в соотношении 1:10, тщательно их перемешивая. Например, 2-е разведение: к 1 мл 1-го разведения добавить 9 мл растворителя, что соответствует 100 ТЕ в 0,1 мл. Аналогичным образом из 2-го разведения готовят 3-е (10 ТЕ в 0,1 мл) и т.д.

Для получения 2 ТЕ в 0,1 мл к 1 мл 3-го разведения туберкулина следует добавить 4 мл растворителя.

Разведения туберкулина сохраняют в асептических условиях не более 2 ч.

Туберкулиновые пробы с использованием сухого очищенного туберкулина ставят по назначению фтизиатра. Постановку и оценку туберкулиновых проб проводит врач или специально обученная медицинская сестра под наблюдением врача.

Внутрикожная проба Манту.

Внутрикожную пробу Манту проводят строго асептически следующим образом: вскрывают ампулу и готовят соответствующее разведение, как описано выше. Одноразовым туберкулиновым шприцем со стерильной иглой N 845 набирают 0,2 мл туберкулина, затем на шприц надевают прилагаемую к нему стерильную иглу и в ватный тампон выпускают туберкулин вместе с пузырьками воздуха до метки 0,1 мл. Кожу средней трети внутренней поверхности предплечья обрабатывают 70° этиловым спиртом и просушивают стерильной ватой. Кожу фиксируют снизу левой рукой так, чтобы на внутренней поверхности она была натянута, и вводят строго внутрикожно 0,1 мл препарата. При этом образуется инфильтрат беловатого цвета (лимонная корочка) диаметром 8 — 10 мм. Для каждого обследуемого употребляют отдельный стерильный шприц и иглу.

Определение туберкулинового внутрикожного титра.

Сухой туберкулин в разведениях 1 ТЕ в 0,1 мл, 0,1 ТЕ в 0,1 мл и 0,01 ТЕ в 0,1 мл (готовят, как описано выше) вводят по методу Манту одновременно в одно предплечье. При отрицательных результатах пробу с более концентрированным туберкулином (3-е разведение) повторяют на другой руке не ранее чем через 96 часов. При отсутствии реакции на 3-е разведение туберкулина пробы со вторым и первым разведениями ставят последовательно через 36 ч каждое в разные предплечья.

Титрование завершают по достижении положительной реакции на внутрикожную пробу (папула не менее 5 мм в диаметре), полученной на наименьшее разведение туберкулина.

Градуированная скарификационная накожная проба.

Градуированную кожную пробу производят одновременно растворами сухого очищенного туберкулина 100%, 25%, 5% и 1%.

Для приготовления 100% туберкулина, содержащего 100000 ТЕ в 1,0 мл, 2 ампулы с препаратом вскрывают, как описано выше, содержимое ампул разводят последовательно в 1 мл растворителя. Для приготовления растворов 25% туберкулина в стерильный флакон наливают 1,5 мл карболизированного растворителя и добавляют туда 0,5 мл 100% раствора туберкулина. Для приготовления туберкулина 5%-ной концентрации во флакон наливают 2 мл растворителя и добавляют туда 0,5 мл 25% раствора туберкулина. Для получения 1% концентрации во флакон с 2 мл растворителя добавляют 0,5 мл 5% раствора туберкулина.

Капли с приготовленным раствором туберкулина наносят пипетками на подготовленную (см. выше) кожу предплечья на расстоянии 2 — 3 см друг от друга. В верхней части предплечья наносят каплю 100% раствора, а ниже — капли убывающей концентрации. Еще ниже в качестве контроля наносят каплю растворителя. Для каждого раствора используют отдельные маркированные пипетки.

Кожу фиксируют, как при постановке внутрикожной пробы (см. выше). Затем оспопрививательным ланцетом нарушают целостность поверхностных слоев кожи в виде царапины длиной 5 мм, проведенной через каплю туберкулина в направлении продольной оси руки. Плоской стороной ланцета производят втирание туберкулина (2 — 3 раза). Скарификацию проводят сначала через каплю растворителя, затем последовательно через капли 1%, 5%, 25% и 100% растворов туберкулина. Скарифицированный участок кожи оставляют открытым на 5 мин. для подсушивания капель туберкулина. Для каждого обследуемого используют стерильный ланцет.

Для определения туберкулинового подкожного титра, проведения подкожной пробы, для эозинофильно-туберкулиновой, гемо-белково-туберкулиновой и других проб сухой очищенный туберкулин и его разведения применяют по специальным методикам.

Учет результатов. Результаты накожной и внутрикожных туберкулиновых проб оценивают через 72 часа, измеряя прозрачной миллиметровой линейкой поперечный к оси руки диаметр инфильтрата (папулы). Зону гиперемии при этом не учитывают. При величине папулы от 0 до 1 мм реакцию считают отрицательной, от 2 до 4 мм — сомнительной, от 5 мм и более — положительной. У детей и подростков реакцию 17 мм и более, у взрослых 21 мм и более, а также везикуло-некротическую реакцию независимо от размера инфильтрата с лимфангоитом или без него считают гиперергической.

Реакция на внутрикожное и накожное введение туберкулина зависит от уровня специфической реактивности организма:

а) в случае отсутствия состояния специфической реактивности местных и общих явлений не наблюдают — реакцию на туберкулин оценивают как отрицательную;

б) при инфицировании МБТ или наличии поствакцинальной аллергии наблюдают местную реакцию в виде инфильтрата (папулы) и гиперемии. В некоторых случаях у лиц с высокой степенью гиперчувствительности замедленного типа к туберкулину местные реакции, наряду с большой папулой, могут сопровождаться лимфангоитами и лимфаденитами. Кроме того, иногда наблюдают общую реакцию: недомогание, головные боли, повышение температуры и т.д.

Противопоказания для постановки туберкулиновых проб.

При дифференциальной диагностике туберкулеза и других заболеваний противопоказания к постановке пробы учитывают индивидуально. Нежелательно проводить туберкулинодиагностику с использованием сухого очищенного туберкулина в период обострения хронических аллергических заболеваний.

Форма выпуска. Препарат выпускают в ампулах вместимостью 5 мл; каждая ампула содержит 50000 ТЕ. К препарату прилагают растворитель — карболизированный раствор натрия хлорида (0,9% раствор натрия хлорида с 0,25% фенола), в ампулах вместимостью 1 мл. В одной пачке (коробке) 5 ампул с сухим очищенным туберкулином, 5 ампул с растворителем, инструкция по применению препарата и нож для вскрытия ампул.

Условия хранения и транспортирования. Препарат хранят в закрытых, сухих, темных помещениях при температуре от 2 до 8 °C, транспортируют всеми видами крытого транспорта в условиях, исключающих замораживание и перегрев выше 25 °C.

Приложение N 2
к Инструкции по применению
туберкулиновых проб

(в ред. Приказа Минздравсоцразвития РФ от 29.10.2009 N 855)

Аллерген туберкулезный рекомбинантный в стандартном разведении (далее — препарат) представляет собой рекомбинантный белок, продуцируемый генетически модифицированной культурой Escherichia coli BL21(DE3)/pCFP-ESAT. Препарат содержит два связанных между собой антигена — CFP10 и ESAT6, присутствующие в вирулентных штаммах микобактерий туберкулеза, в том числе M.tuberculosis и M.bovis. Эти антигены отсутствуют в штаммах БЦЖ M.bovis, из которого готовятся вакцины туберкулезные — БЦЖ и БЦЖ-М. Одна доза (0,1 мл) препарата содержит: рекомбинантный белок CFP10-ESAT6 (0,2 мкг), фенол (0,25 мг) в качестве консерванта, полисорбат 80 (твин 80) в качестве стабилизатора, натрий фосфорно-кислый двузамещенный 2-водный, натрия хлорид, калий фосфорно-кислый однозамещенный, воду для инъекций — до 0,1 мл.

Биологические и иммунологические свойства.

Препарат предназначен для повышения качества диагностики туберкулезной инфекции. Действие препарата основано на выявлении клеточного иммунного ответа на специфические для микобактерий туберкулеза (далее — МБТ) антигены.

Препарат не обладает сенсибилизирующим действием, не токсичен. При внутрикожном введении вызывает у лиц с туберкулезной инфекцией специфическую кожную реакцию гиперчувствительности замедленного типа (далее — ГЗТ).

По результатам проведенных исследований установлено, что чувствительность (частота положительных ответных реакций у лиц с активной туберкулезной инфекцией) внутрикожной пробы с препаратом сопоставима с чувствительностью туберкулиновой пробы, а его специфичность (частота отсутствия реакции на препарат у здоровых лиц) выше, чем у туберкулина, так как в отличие от туберкулина у вакцинированных БЦЖ, но не инфицированных МБТ лиц препарат не вызывает ответную реакцию ГЗТ. В связи с тем, что препарат не вызывает реакцию ГЗТ, связанную с вакцинацией БЦЖ, проба с препаратом не может быть использована вместо туберкулинового теста для отбора лиц на первичную вакцинацию и ревакцинацию БЦЖ.

Препарат используется во всех возрастных группах с целью:

1) диагностики туберкулеза и оценки активности процесса;

2) дифференциальной диагностики туберкулеза;

3) дифференциальной диагностики поствакцинальной и инфекционной аллергии (гиперчувствительности замедленного типа);

4) наблюдения за эффективностью лечения в комплексе с другими методами.

Для практического использования внутрикожную пробу с препаратом применяют в противотуберкулезных учреждениях или, при отсутствии таковых, по назначению врача-фтизиатра и при его методическом обеспечении.

Для раннего выявления туберкулеза внутрикожную пробу с препаратом проводят:

лицам, направленным в противотуберкулезное учреждение для дообследования на наличие туберкулезного процесса;

лицам, относящимся к группам высокого риска по заболеванию туберкулезом с учетом эпидемиологических, медицинских и социальных факторов риска;

лицам, направленным к фтизиатру по результатам массовой туберкулинодиагностики.

Факторами высокого риска заболевания туберкулезом являются:

1) эпидемиологические (контакт с больным туберкулезом человеком или животным);

сахарный диабет, язвенная болезнь, психоневрологическая патология, частые ОРВИ в анамнезе;

хронические заболевания различных органов и систем при торпидном, волнообразном течении и неэффективности традиционных методов лечения;

длительный прием (более месяца) цитостатических, глюкокортикоидных препаратов, иммунодепрессантов;

ВИЧ-инфекция, перинатальный контакт у детей по ВИЧ-инфекции;

Алкоголизм, наркомания, пребывание в местах лишения свободы, безработица;

Беспризорность детей и подростков, попадание детей в детские приюты, детские дома, социальные центры и т.д.;

Для дифференциальной диагностики туберкулеза и других заболеваний внутрикожную пробу с препаратом проводят в комплексе с клинико-лабораторным и рентгенологическим обследованием в условиях противотуберкулезного учреждения.

Для наблюдения за пациентами, состоящими на учете у фтизиатра с различными проявлениями туберкулезной инфекции, в условиях противотуберкулезного учреждения (все контингенты ПТД) внутрикожную пробу с препаратом проводят при контрольном обследовании во всех группах диспансерного учета с интервалом 3 — 6 месяцев.

Способ применения и дозировка.

Назначение и методическое руководство проведением пробы осуществляет врач-фтизиатр. Проба проводится детям, подросткам и взрослым специально обученной медицинской сестрой, имеющей допуск к проведению внутрикожных тестов. Препарат вводят строго внутрикожно. Для проведения пробы применяют только туберкулиновые шприцы и тонкие короткие иглы с косым срезом. Перед употреблением необходимо проверить дату их выпуска и срок годности. Запрещается применять шприцы, предназначенные для инъекций инсулина.

Резиновую пробку флакона с препаратом обрабатывают 70% этиловым спиртом. Для забора препарата из флакона используется тот же шприц, который будет использован для инъекции (СП 3.3.2342-08 от 03.03.2008). Если туберкулиновые шприцы имеют съемные иглы, пробку флакона прокалывают отдельной иглой для подкожных или внутримышечных инъекций, которую после каждого забора препарата в шприц оставляют в пробке, накрыв стерильной салфеткой. Туберкулиновым шприцем набирают 0,2 мл (две дозы) препарата и выпускают раствор до метки 0,1 мл в стерильный ватный тампон. Флакон с препаратом после вскрытия допускается хранить не более 2 часов в защищенном от света месте.

Пробу проводят обследуемым в положении сидя. После обработки участка кожи на внутренней поверхности средней трети предплечья 70% этиловым спиртом в верхние слои натянутой кожи, параллельно ее поверхности, вводят 0,1 мл препарата. При постановке пробы, как правило, в коже образуется папула в виде «лимонной корочки» беловатого цвета диаметром 7 — 10 мм. Если на одном предплечье ставилась проба с туберкулином, препарат вводят в другое предплечье.

Лицам, у которых в анамнезе имелись проявления неспецифической аллергии, пробу рекомендуется проводить на фоне приема десенсибилизирующих препаратов в течение 7 дней (5 дней до постановки пробы и 2 дня после нее).

Учет и интерпретация результатов.

В учетных документах после постановки пробы с препаратом отмечают:

а) название препарата;

б) предприятие-изготовитель, номер серии, срок годности;

В) дату проведения пробы;

г) результат — реакция на пробу.

Результат пробы оценивает врач или обученная медсестра через 72 часа с момента ее проведения путем измерения поперечного (по отношении к оси предплечья) размера гиперемии и инфильтрата (папулы) в миллиметрах прозрачной линейкой. Гиперемию учитывают только в случае отсутствия инфильтрата.

Ответная реакция на пробу считается:

отрицательной — при полном отсутствии инфильтрата и гиперемии или при наличии «уколочной реакции»;

сомнительной — при наличии гиперемии без инфильтрата;

Положительной — при наличии инфильтрата (папулы) любого размера.

Условно различают следующие ответные кожные реакции на препарат:

Слабо выраженная — при наличии инфильтрата размером до 5 мм;

умеренно выраженная — при размере инфильтрата 5 — 9 мм;

выраженная — при размере инфильтрата 10 мм и более;

гиперергическая — при размере инфильтрата 15 мм и более, при везикуло-некротических изменениях и (или) лимфангоите, лимфадените независимо от размера инфильтрата.

В отличие от реакции ГЗТ кожные проявления неспецифической аллергии (в основном гиперемия) на препарат, как правило, наблюдаются сразу после постановки пробы и через 48 — 72 ч обычно исчезают.

Отрицательная реакция на пробу.

Кожная ГЗТ к препарату, как правило, отсутствует:

1) у лиц, не инфицированных МБТ;

2) у лиц, ранее инфицированных МБТ с неактивной туберкулезной инфекцией;

3) у больных туберкулезом в период завершения инволюции туберкулезных изменений при отсутствии клинических, рентгено-томографических, инструментальных и лабораторных признаков активности процесса;

4) у лиц, излечившихся от туберкулеза.

Одновременно проба с препаратом может быть отрицательной у больных туберкулезом с выраженными иммунопатологическими нарушениями, обусловленными тяжелым течением туберкулезного процесса, у лиц на ранних стадиях инфицирования МБТ, на ранних стадиях туберкулезного процесса, у лиц, имеющих сопутствующие заболевания, сопровождающиеся иммунодефицитным состоянием. В связи с этим при наличии характерных клинико-рентгенологических признаков туберкулеза отрицательная реакция на препарат не должна препятствовать проведению дальнейших мероприятий по диагностике туберкулезной инфекции.

Лица с сомнительной и положительной реакцией на препарат подлежат обследованию на туберкулез.

Лица старше 18 лет, у которых впервые установлена сомнительная или положительная проба с препаратом, подлежат полному клинико-рентгенологическому обследованию в противотуберкулезном диспансере. По итогам обследования, при отсутствии у указанной группы лиц признаков локального туберкулеза, им показано наблюдение у фтизиатра по «0» группе диспансерного учета с проведением лечебно-профилактических мероприятий (по показаниям).

Детям и подросткам при наличии сомнительной или положительной реакции на препарат показано полное обследование на туберкулез с последующим лечением и наблюдением в соответствующей группе диспансерного учета. При отрицательном результате реакции на препарат лечение по поводу туберкулезной инфекции не показано. Повторная постановка пробы — через 2 месяца.

Противопоказания для постановки пробы:

1) острые и хронические (в период обострения) инфекционные заболевания, за исключением случаев, подозрительных на туберкулез;

2) соматические и др. заболевания в период обострения;

3) распространенные кожные заболевания;

4) аллергические состояния;

В детских коллективах, где имеется карантин по детским инфекциям, проба проводится только после снятия карантина.

В случаях дифференциальной диагностики локального туберкулеза и других заболеваний, кроме индивидуальной непереносимости туберкулина, противопоказаний для постановки пробы с препаратом не имеется.

У отдельных лиц, как и при проведении туберкулинодиагностики, могут наблюдаться кратковременные признаки общей неспецифической реакции: недомогание, головная боль, повышение температуры тела.

Лучшая статья за этот месяц:  Аллергия на анестезию
Добавить комментарий