Аллерген o72 энтеротоксин а staphylococcus aureus ige

Токсины Staphylococcus aureus

Стафилококки, в частности S. aureus продуцируют ряд токсинов, которые классифицируются на три группы : 1) Цитолитические — гемолизины и лейкоцидины; 2) Энтеротоксины и 3) Эксфолиативный токсин.

Гемолизины — 4 антигенно- различных токсина: a, b, g, d. Из всех них альфа- лизин, или альфа- токсин наиболее клинически важен. В культуре он продуцируется только в аэробных условиях, и его продукция усиливается высокой концентрацией диоксида углерода. Это протеин, который инактивируется при 60 о С, но имеет парадоксальное свойства восстанавливать свою активность при дальнейшем нагревании между 80 о и 100 о С. Это связано с тем, что токсин комбинирован с термолабильным ингибитором. При повышении температуры ингибитор инактивируется, высвобождая токсин. Сам ингибитор инактивируется при 60 градусах. В большей степени активен по отношению к эритроцитам барана, в меньшей человека. Он разрушает лизосомы, при этом повреждаются макрофаги и тромбоциты. Это является причиной повреждения циркуляторной системы, мышечной ткани и коры надпочечников. Он является токсоидом и благодаря этому стимулирует иммунитет к стафилококкам.

Альфа-токсин S.aureus может рассматриваться в качестве прототипа олигомеризующих порообразующих цитотоксинов. Ген, кодирующий альфа-токсин, находится в виде единичной копии в хромосоме большинства патогенных штаммов S.aureus, и его экспрессия регулируется внешними факторами на уровне транскрипции дополнительным геном регулятором (agr). Токсин синтезируется в виде молекулы-предшественника, состоящей из 319 аминокислот и имеющей на N-конце сигнальную последовательность из 26 аминокислотных остатков. Выделяемый готовый токсин (протомер) представляет собой гидрофильную молекулу молекулярной массой около 33 кДа, в которой отсутствуют остатки цистеина.

В настоящее время изучена кристаллографическая структура завершенной поры, образованной альфа-токсином. На поверхности плазматической мембраны 7 протомеров токсина образуют грибовидный гептамер (232 кДа), содержащий 3 различных домена. Домены, формирующие «шляпку» и «край», расположены на внешней поверхности плазматической мембраны, а домен «ножки» служит трансмембранным каналом.

Альфа-токсин обладает цитолитическими свойствами в отношении различных типов клеток, включая моноциты, лимфоциты, эритроциты, тромбоциты и эндотелиоциты человека. Различают три последовательные стадии повреждения клеточной мембраны под действием альфа-токсина. Протомеры токсина сначала связываются с мембраной клетки-мишени при помощи не установленных рецепторов или не специфически абсорбируются фосфатидилхолином или холестеролом, входящими в состав билипидного слоя мембраны. Во-вторых, связанные с мембраной протомеры олигомеризуются в нелитический гептамерный комплекс. И в заключение, гептамер претерпевает ряд конформационных изменений, конечным результатом которых является формирование «ножки», которая проникает сквозь цитоплазматическую мембрану. Через образовавшуюся пору происходит вход и выход небольших молекул и ионов, что ведет к набуханию и гибели клеток, имеющих ядро, или осмотическому лизису эритроцитов.

Кроме того, отмечено, что при образовании пор запускаются вторичные процессы, которые также могут обусловить развитие патологических последствий. Эти процессы включают активацию эндонуклеаз, увеличение экзоцитоза тромбоцитов, высвобождение цитокинов и медиаторов воспаления. На примере нескольких экспериментальных моделей на животных было показано, что альфа-токсин является фактором вирулентности S.aureus, однако его точная роль в развитии стафилококковых заболеваний у человека остается неясной.

[Другими порообразующими токсинами являются RTX-токсины грамотрицательных бактерий (гемолизины E. coli) и стрептолизин O, выделяемый S.pyogenes].

Бетта-лизин S. aureus гемолитичен для бараньих эритроцитов, но не для человеческих и кроличьих. Он является сфингомиелиназой и разрушает клеточные мембраны. Продуцируется в аэробных и анаэробных условиях.

Гамма-лизины — наиболее слабые токсины, но действует на все типы эритроцитов от различных млекопитающих.

Дельта-лизин — литичен только для человеческих и нелитичен для бараньих и кроличьих эритроцитов. Действует как детергент, растворяя структурные липиды ЦПМ.

Альфа- и дельта- лизины найдены только у штаммов из клинического материала от человека, тогда как бета- лизины найдены и у штаммов других животных.

Лейкоцидины — токсины состоящие из двух фракций S и F, токсичны только в присутствии обеих фракций, но не по одиночке. Являются летальнымы для лейкоцитов многих животных. Мишенью для них является трифосфоинозитид в мембранах лейкоцитов.

Стафилококковые энтеротоксины (SEA, SEB, SECn, SED, SEE, SEG, SEH, и SEI) отвечают за манифестацию стафилококковой пищевой токсикоинфекции, проявляющейся в рвоте, тошноте, диарее в течение 6 часов после употребления контаминированной пищи. Токсин резистентен к пищеварительным ферментам, термостабилен. Инактивируется медленно (10-40 минут) только при 100 о , что зависит от его концентрации или источника (среды) нахождения. Молоко и молочные продукты наиболее частые источники отравления. Идентифицировано 8 типов токсинов A, B, C1, C2, D, E, G, H и I. Тип, который ранее назывался F типом, в настоящее время называется TSST-1 (токсин синдрома токсического шока).

Энтеротоксины могут иметь другие биологические эффекты — пирогенный, митогенный, тромбоцитопенический, гипотензивный и цитотоксический.

Пищевые токсикоинфекции, вызванные приемом пищи, которая была ранее контаминирована Staphytlococcus aureus, являются одной из форм гастроэнтеритов, клинически проявляющихся рвотой /с/ или /без/ диареи. Это состояние называется стафилококковым пищевым отравлением (СПО) и следует за приемом пищи, которая была предварительно загрязнена S. aureus, и в которой таким образом произошло накопление SЕs (стафилококковые энтеротоксины). Признаки системной токсичности (лихорадка и низкое давление) редко наблюдаются в случаях СПО. Кроме того, СПО – обычно разрешается за короткое время (в пределах от 24 до 48 часов от появления первых симптомов). Не ясно, развивается ли долговременная устойчивость к СПО у людей. Однако, антитела к одному типу SE не обязательно обуславливают устойчивость к СПО вызванными другими серотипами токсинов. В некоторых случаях, антитела, против одного SE могут перекрестно реагировать против другого SE. Например, антитела к SEB могут защищать против SEC, потому что эти два SEs имеют перекрестные антитело-связывающее эпитопы.

Все SEs вызывают рвоту у приматов при оральном введении. Проникшие с пищей SEs не приводят к выраженной энтеротоксэмии, если не использованы чрезвычайно высокие дозы токсинов. В отличие от SEs, оральное введение TSST-1 не вызывает рвоты у обезьян, но с другой стороны возникают системные признаки TSS (стафилококкового токсического шока) когда токсин вводится per or кроликам. Несмотря на его оральную токсичность, TSST-1 не был признан с медицинской точки зрения энтеротоксином. Это связано с тем что TSST-1 восприимчив к действию пепсина и может поэтому быть менее устойчив в кишке по сравнению с SEs. С другой стороны в кишечнике рецепторы для SEs и TSST различаются. Альтернативная гипотеза заключается в том, что весь орально вводимый TSST-1 быстро входит в системное кровообращение не достигая таким образом нижних отделов пищеварительного тракта.

Гастроэнтериты, спровоцированные SEs, ассоциированы с характерными гистологическими нарушениями в различных областях гастроинтестинального трактата, но наиболее серьезные повреждения появляются в желудке и верхней части тонкой кишки. В этих областях наблюдается гиперемия слизистой с проникновением нейтрофилов в эпителиальный слой и lamina propria. В просвете 12-перстной кишки наблюдается накопление слизистогнойного экссудата. В тощей кишке наблюдается расширение крипт и разрушение или исчезновение границы щеточной каймы. В lamina propria тощей кишки появляются обширные нейтрофильные и макрофагальные инфильтраты.

Известно, что цель для SЕs, связь с которой токсинов приводит к появлению рвотного эффекта расположена в брюшной полости, где существуют предполагаемые клеточные рецепторы для SEs. Так как эти рецепторы еще не идентифицированы, остается много неясного относительно ранних событий в патогенезе СПО. Ведущая гипотеза – заключается в том, что рвота возникает в ответ на SE-обусловленное воспаление. Признаки СПО высоко коррелируют с генерированием множества провоспалительных медиаторов, включая простагландин E2, лейкотриен B4, и 5-гидроксиэйкозатетраеноевой кислоты. Цистеиниловые лейкотриены, типа лейкотриена E4, также вовлечены как критические посредники в СПО. Неясно, синтезируются ли эти посредники непосредственно или косвенно в ответ на SEs. В конечном счете, рвотная реакция в ответ на SEs зависит от активации медуллярного рвотного центра, который стимулируется импульсами, переданными через блуждающий нерв (n. vagus) и симпатическую нервную систему.

Несколько групп исследователей считают, что первичными источниками воспалительных медиаторов, синтезируемых и секретируемых в течение СПО, являются тучные клетки. Одна текущая гипотеза заключается в том, что SEs вызывают дегрануляцию тучных клеток после прямой адгезии токсина на рецепторах этих клеток, а не через типичный IgE — опосредованный процесс активации тучных клеток. С другой стороны есть результаты, которые указывают, на то что активация тучных клеток in vivo требует, совместной адгезии на них SEs в комплексе с некими костимулирующими сигналами. Альтернативно, существует нейрогенная модель, в которой тучные клетки стимулируются нейропептидами, которые секретируются сенсорными нервами. Одним из предполагаемых пептидов активирующий тучные клетки и который, как показано, вовлечен в SEB-обусловленную токсичность, была субстанция P. Однако в других исследованиях не было обнаружено адгезии SEA к нервной ткани в гастроинтестинальном тракте у крыс. Этот результат подвергает сомнению теорию о нейропептидном механизме действия SEs. В заключении можно отметить, что роль тучных клеток в СПО подтверждена, однако механизмы, через которые SEs вызывают дегрануляцию тучных клеток, остаются пока не выясненными. Однако понятно, что механизмы действия энтеротоксинов у S. aureus значительно отличается от механизма действия экзоэнтеротоксинов, например, у энтеротоксигенных кишечных палочек и у холерного вибриона.

Эксфолиативные токсины (ETA и ETB) — вызывают эксфолиативные повреждения, при которых внешний слой эпидермиса отделяется от ниже лежащих тканей. Разрушает межклеточные связи (десмосомы) и способствует инвазии ткани без повреждения клетки. При этом образуются межтканевые щели, заполненные жидкостью. Проявляется образованием пузырей. (Болезнь новорожденных или детей младше 5 лет — болезнь Ritter). В настоящее время известно два типа токсинов — термостабильный, синтез которого контролируется хромосомными генами и термолабильный — плазмидами.

TSST (токсин синдрома токсического шока у S. aureus) — синдром токсического шока — мультисистемное заболевание, которое проявляется лихорадкой, гипотензией, миалгией, рвотой, диареей, гиперемией слизистых и эритематозной сыпью с отшелушиванием (десквамацией). Все эти симптомы ассоциированы с инфекцией слизистой, вызванной штаммами S.aureus. В основном возникает у молодых женщин детородного периода при использовании определенного типа высоко адсорбирующих тампонов. TSST член семейства суперантигенов, которые обладают способностью стимулировать Т-клетки, фактор некроза опухоли и кроме этого индуцируют цитокин интерлейкин-1.

Некоторые бактериальные токсины действуют непосредственно на Т-клетки и антигенпрезентирующие клетки иммунной системы. При нарушении функций этих клеток, вызванных токсином, развиваются заболевания. Одна из больших групп этой категории токсинов — пирогенные токсины, обладающие свойствами суперантигенов (PTSAg). Их отличительная особенность — мощное стимулирующее действие на клетки иммунной системы, пирогенность и усиление эндотоксического шока. Эти термостабильные токсины с молекулярной массой от 22 до 30 кДа включают стафилококковые энтеротоксины серотипов от A до E, G и H, стафилококковый TSST-1, пирогенные экзотоксины стрептококков группы А (серотипы от А до C и F), суперантиген стрептококков группы А.

Все токсины, относящиеся к PTSAg, имеют сходную биологическую активность, при этом среди членов данного семейства выделяется TSST-1, имеющий менее 30% гомологии по аминокислотному составу с другими токсинами данного семейства. Ген, кодирующий TSST-1, локализован на хромосоме и в тоже время у штаммов S.aureus ген tst входит в состав различных мобильных генетических элементов. Токсин синтезируется в виде молекулы-предшественника, состоящей из 234 аминокислотных остатков, причем первые 40 остатков являются сигнальной последовательностью, которая отщепляется в процессе образования зрелого токсина массой 22 кДа.

Экспрессия TSST-1 зависит от концентрации кислорода, температуры, pH и уровня глюкозы и регулируется agp локусом S.aureus. По данным кристаллографического анализа, TSST-1 так же, как и ряд других токсинов, относящихся к PTSAg, состоит из двух различных доменов, но в отличие от других членов семейства TSST-1 не нуждается в ионах цинка в качестве кофактора.

В целом мощное иммуностимулирующее свойство PSTAg является прямым результатом связывания токсина с различными участками снаружи от пептидсвязывающего участка молекул главного комплекса гистосовместимости второго класса (расположенных на поверхности антигенпрезентирующих клеток) и специфических участков на рецепторах Т-клеток. В частности, В домен TSST-1 сначала связывается с a-цепью молекул человеческого лейкоцитарного антигена DR1, в то время как А домен специфически связывается с V-b2-элементами рецепторов Т клеток.

Связывание TSST-1 с V-b-2 элементами рецепторов Т-клеток приводит к массивной пролиферации (до 20%) периферических Т-клеток — явление, которое радикально изменяет набор V-b- у Т-клеток. Т-клетки, образовавшиеся в результате пролиферации, могут существовать в состоянии анергии или подвергаются апоптозу. Пролиферация Т-клеток сопровождается массивным высвобождением лимфоцитарных (интерлейкин [ИЛ]-2, a-фактор некроза опухолей, g-интерферон) и моноцитарных (ИЛ-1, ИЛ-6, a-фактор некроза опухолей) цитокинов. Они вызывают гипотензию, высокую температуру тела и диффузную эритематозную сыпь, которые характерны для синдрома токсического шока. На протяжении длительного времени TSST-1 рассматривают как ключевую субстанцию в развитии синдрома стафилококкового токсического шока, однако в последние годы его стали связывать и с развитием синдрома Кавасаки — ведущей причины приобретенных пороков сердца у детей в США.

Не нашли то, что искали? Воспользуйтесь поиском:

Аллерген o72 энтеротоксин а staphylococcus aureus ige

Спасибо дерматовенерологу за то, что помог мне с очень деликатной проблемой. О том, чтобы обратиться с ней к врачу, мне, поначалу, стыдно было даже подумать. Не то, что рассказать. Родные до сих пор не знают. Доктор был максимально этичен. Это очень помогло мне взять себя в руки, успокоиться и начать лечение. Теперь, пью курс назначенных препаратов.

Спасибо огромное Евсюкову Сергею Ивановичу за качественный лечебный массаж. Умница, настоящий мужчина и доктор старой закалки. Я уже прошла у него несколько сеансов. Каждый раз семь потов сойдет. Массажист очень старательно и кропотливо подходит к делу. Такой труд не может стоить дешево. Я конечно не профессионал. Но по внутреннему ощущению, спина обрела прежнюю гибкость, ушли боли в пояснице. А еще, я похудела. Пока есть к чему стремиться, но я постараюсь закрепить успех. В целом, у клиники неплохой интерьер. Симпатично и в массажном кабинете. В сочетании с профессионализмом врача, это все помогает настроиться на процедуру, расслабиться.

Записался на прием к кардиологу в ваш центр. Прием был назначен на одно время, а по факту, пришлось ждать около 15 минут. Даже поругался с администратором немного. За что приношу извинения. В целом, консультация была для меня очень полезна. С удовольствием пойду снова в вашу клинику. Теперь, конечно, придется сутки походить как терминатору с холтеровским монитором. Но мне здоровье сердца важнее временных неудобств. После снова к доктору. Обсудим с ним мои дальнейшие действия. Спасибо за терпение и грамотную помощь.

Несколько лет назад мне вырезали меланому спины. У меня была первая стадия, так что, дело ограничилось оперативным вмешательством. Правда, было подозрение на рецидив через пол года, но оно не нашло подтверждений. После этого, я регулярно наблюдаюсь. Сначала раз в пол года, а сейчас уже раз в год. В этот раз, УЗИ-обследование решила пройти в вашем центре. В принципе, нареканий нет. Оборудование все новое. Доктор очень профессионально и четко объяснила мне, что к чему. Пока, ничего криминального нет. Но, я буду у вас регулярно наблюдаться.

Хочу выразить благодарность эндокринологу Шупенко Ирине Валентиновне. Она истинный профессионал. Врач с большой буквы. И замечательная душевная женщина. Внимательно меня выслушала. Все доступно и развернуто объяснила, назначила лечение. Конечно, я осознаю, что мне тоже нужно будет приложить свои силы к лечению. Далеко не все зависит от врача. Никаких претензий к ее работе у меня нет. Страшно пропустить осложнение. Так что, будем решать проблему в самом зародыше. Обязательно к ней буду обращаться за консультациями. У такого специалиста наблюдаться как-то спокойнее. Обязательно порекомендую Ирину Валентиновну друзьям.

Сдавал в Смайл Мед анализы по направлению ревматолога. И прошел консультацию у опытного терапевта Сергея Ивановича. Что хочу сказать. Вышло дорого. Придется в этом месяце пожить более экономно чем обычно. Зато все ответы получил за несколько дней. У меня подозревают рассеянный склероз. Поэтому, сейчас важно пройти все обследования максимально быстро и уточнить диагноз. Спасибо огромное лабораторной службе за оперативную работу.

Скажите пожалуйста, у вас можно еще взять консультацию гематолога или гемостазиолога? Мне его тоже надо проходить. + исследования по направлению онколога. Очень удобно, что я живу недалеко от вашего центра. Сейчас, тяжело стало совершать длительные выходы в город. Силы кончаются очень быстро. А к вам я могу попасть на прием в течение получаса.

Энтеротоксины стафилококка

СТАЙЛАБ предлагает тест-системы для анализа содержания стафилококковых энтеротоксинов A, B, C, D и E в пищевых продуктах и окружающей среде методом ИФА.

Лучшая статья за этот месяц:  Прик тест на аллергию

Чтобы получить более подробную информацию, позвоните нам по телефону или оставьте заявку на сайте, наши специалисты будут рады ответить на все интересующие вопросы.

За время существования клиники администрацией собрана команда врачей, диагностов и лабораторных сотрудников высокого класса. Штат центра — высококвалифицированная команда профессионалов, в котором трудится более 20 врачей разных специализаций, включая и 9 специалистов высшей категории со стажем работы более 10 лет.

Наш многопрофильный медицинский центр «Диона» предоставляет:

  • современный подход к работе с пациентами;
  • международный уровень медицинского оборудования;
  • высокое качество используемых препаратов;
  • строгий отбор специалистов и персонала;
  • сертифицированную квалификацию всех врачей;
  • гарантию результатов диагностики и лечения.

Удобная система регистрации пациентов и организации приема позволяет вам сэкономить время, избегая очередей и лишних консультаций. Управляющий персонал клиники «Диона» следит за поддержанием доступного уровня цен на медицинские услуги. В нашем медцентре постоянно проводятся акции и предоставляются скидки на различные услуги, поэтому оставаясь с нами Вы будете в курсе выгодных предложений.

Для записи на прием к специалистам позвоните по телефону на нашем сайте или оставьте заявку.

Влияние энтеротоксинов Staphylococcus aureus и epidermidis на течение атопического дерматита у детей Текст научной статьи по специальности « Медицина и здравоохранение»

Аннотация научной статьи по медицине и здравоохранению, автор научной работы — Флуер Ф.С., Кудрявцева А.В., Прохоров В.Я., Котосова Л.К., Лазарева А.В., Вертиева Е.Ю.

Проведено исследование 29 штаммов Staphylococcus aureus и 18 штаммов Staphylococcus epidermidis , выделенных с кожных покровов детей с атопическим дерматитом (АД), на способность продуцировать стафилококковые энтеротоксины типов А и В и токсина токсического шока. Установлено, что продуцентами СЭА S. aureus были 48,2%, SEB 58,6% и токсина токсического шока 55,1%, а продуцентами SEA S. epidermidis были 16,6% штаммов, а SEB 5,8% исследованных штаммов. Установлено отрицательное действие энтеротоксинпродуцирующих штаммов стафилококков на тяжесть течения АД у детей. Показана необходимость выявления энтеротоксинпродуцирующих штаммов S. aureus у детей с АД, усугубляющих течение заболевания, и проведения профилактических мероприятий для предотвращения колонизации поверхности кожи и кишечника энтеротоксинпродуцирующими штаммами S. aureus.

Похожие темы научных работ по медицине и здравоохранению , автор научной работы — Флуер Ф.С., Кудрявцева А.В., Прохоров В.Я., Котосова Л.К., Лазарева А.В., Вертиева Е.Ю.,

Текст научной работы на тему «Влияние энтеротоксинов Staphylococcus aureus и epidermidis на течение атопического дерматита у детей»

© Коллектив авторов, 2008

Ф.С. Флуер, А.В. Кудрявцева, В.Я. Прохоров, Л.К. Котосова, А.В. Лазарева, Е.Ю. Вертиева

ВЛИЯНИЕ ЭНТЕРОТОКСИНОВ STAPHYLOCOCCUS AUREUS И EPIDERMIDIS НА ТЕЧЕНИЕ АТОПИЧЕСКОГО ДЕРМАТИТА У ДЕТЕЙ

ГУ НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи РАМН, НЦЗД, Москва

Проведено исследование 29 штаммов Staphylococcus aureus и 18 штаммов Staphylococcus epidermidis, выделенных с кожных покровов детей с атопическим дерматитом (АД), на способность продуцировать стафилококковые энтеротоксины типов А и В и токсина токсического шока. Установлено, что продуцентами СЭА S. aureus были 48,2%, SEB — 58,6% и токсина токсического шока — 55,1%, а продуцентами SEA S. epidermidis были 16,6% штаммов, а SEB — 5,8% исследованных штаммов. Установлено отрицательное действие энтеротоксинпродуцирующих штаммов стафилококков на тяжесть течения АД у детей. Показана необходимость выявления энтеротоксин-продуцирующих штаммов S. aureus у детей с АД, усугубляющих течение заболевания, и проведения профилактических мероприятий для предотвращения колонизации поверхности кожи и кишечника энтеротоксинпродуцирующими штаммами S. aureus.

Authors studied capacity of 29 Staphylococcus aureus strains and of 18 Staphylococcus epidermidis strains from skin culture of patients with atopic dermatitis (AD) to produce Staphylococcal en-terotoxins (SE) types A and B and toxic shock toxin. The study showed that 48,2% of S. aureus strains produced SEA; 58,6 — SEB and 5,8% produced toxic shock toxin. As for S. epidermidis strains, 16,6% of them produced SEA and 5,8% — SEB. Authors showed negative influence of SE-produced strains upon AD severity in children. They proved necessity of SE-producing S. aureus strains detection in children with AD, because they could detoriorate AD presentations, and necessity of prophylactic measures for prevention of skin contamination by enterotoxin-producing S. aureus strains.

Атопический дерматит (АД) является одной из важнейших проблем как педиатрии, так и дерматологии, поражает не только детей, но и молодых людей. АД имеет большое медико-социальное значение в связи со значительной распространенностью и тенденцией к затяжному течению, приводит к развитию у больных психосоциальных проблем, снижению качества жизни. В настоящее время установлено, что частота АД среди детей достигает 15-20%, в ряду аллергической патологии диагностируется у 240-250 человек на 100 000 обследованных [1].

АД в настоящее время рассматривается как иммуноопосредованный дерматоз с генетической предрасположенностью, а именно предполагается, что патогенетическую основу АД составляют наследственно-обусловленные ^Е-опосредуемые аллергические реакции, являющиеся следствием сенсибилизации организма к различным экзоал-лергенам и избыточной выработки ^Е (в ответ на воздействие бытовых, пыльцевых, грибковых, пищевых, эпидермальных аллергенов) [1]. По наследству передается совокупность факторов риска, способствующих формированию аллергической патологии, наследственная предрасположенность к ТИ2-клеточным иммунным реакциям, последующему развитию аллергического воспаления и неспецифической гиперреактивности тканей, вовлекаемых в аллергический процесс [2].

Современные работы по исследованию наследственных и генетических детерминант АД показали, что заболевание значительно чаще развивается и более тяжело протекает при наличии АД у родителей, особенно у матерей, и демонстрируют, что в патогенез заболевания вовлечены гены, кодирующие регуляцию иммунных реакций, факторов воспаления и других молекул, участвующих в развитии аллергической реакции, гены цитокинов и их рецепторов, что подтверждает значительную роль иммунных факторов в развитии заболевания [3]. Необходимо, однако, отметить, что АД развивается также часто и как спорадическое заболевание, что диктует необходимость дальнейшего изучения патогенетических основ и предрасполагающих к нему факторов.

Для аллергических реакций при АД показано существование дисбаланса иммунного ответа — преобладание активности лимфоцитов ТИ2-типа и снижение активности ТМ-лимфоцитов, что приводит к дефициту интерферона (ИФН) у, увеличению содержания общего количества В-лимфоцитов и всех форм дифференцировки этих клеток, нарушению их дифференцировки в плазматические клетки и изменению выработки антител. В период обострения у больных АД наблюдается достоверное снижение относительного количества Т-лимфоци-тов (CD3+) за счет уменьшения цитотоксических лимфоцитов (CD8+). Также отмечается изменение цитокиновой секреции (увеличение уровня ИЛ1р,

ИЛ2 и ИЛ4) активированными клетками иммунной системы, что способствует поддержанию хронической воспалительной реакции.

При изучении иммунных реакций при АД было показано, что при развитии аллергического воспаления взаимодействие клеточных компонентов иммунитета опосредуется высвобождением ци-токинов ИЛ3, ИЛ4, ИЛ5, ИЛ13, GM-KSF, которые координируют активацию тучных клеток, базофи-лов, эозинофилов и индуцируют продукцию IgE В-лимфоцитами, происходит дисбаланс работы лимфоцитов ТМ/ТИ2-типа и снижение выработки эндогенного ИФН, что может увеличивать синтез IgE, а также опосредованно приводит к значительному снижению общего иммунитета, что проявляется значительно большей частотой сопутствующих вирусных и бактериальных заболеваний, более длительному их течению, колонизации патогенными микроорганизмами. Однако вторичное инфицирование при АД может быть связано и с приобретенной иммунной недостаточностью, при которой определяется снижение защитных механизмов, фагоцитарной способности нейтрофилов, функциональной активности NK-клеток, секреторная недостаточность ИФНу [4].

Изменения иммунитета не только способствуют большей частоте инфекционных заболеваний, но также проявляются колонизацией поверхности кожи и слизистых оболочек условно-патогенными и патогенными микроорганизмами, что в значительной мере обусловливает поддержание местной воспалительной реакции, аллергенной настроенности организма. Так, по разным данным, более чем у 25-35% больных течение АД осложняется стафило- и стрептостафилодермией, не менее часто выявляются вирусные поражения кожи (до 25%), кандидоз слизистых оболочек и складок кожи обнаруживается в 7-15% случаев [3].

В настоящее время показано, что S. aureus и продуцируемые ими энтеротоксины являются одними из важных факторов риска, которые участвуют в развитии и поддержании АД. Известно, что у 90% больных преобладающим микроорганизмом на пораженных участках поверхности кожи является именно S. aureus, обнаруживаясь до 107 КОЕ на 1 см2 [5], как уже упоминалось выше, вызывая более чем у 25% больных стафилодермию. В многочисленных исследованиях была показана не только этиологическая, но и патогенетическая роль S. aureus в развитии аллергических заболеваний, таких как аллергический ринит, крапивница, бронхиальная астма, поллиноз. Важное патогенетическое значение S. aureus в развитии АД у детей связано с имеющимся нарушением микробиоценоза кишечника, обусловленным дефицитом бифидобактерий, увеличением проницаемости кишечника, воздействием на иммунитет энтероток-синов, продуцируемых стафилококками, колонизировавшими слизистую оболочку кишечника.

Механизмы, ведущие к повышению колонизации стафилококками кожи у больных АД, обусловлены несколькими причинами: во-первых, снижением барьерной функции кожи, связанным с нарушением сальной и потовой секреции [6], а, во-вторых, описываемым выше нарушением местного иммунитета (снижением уровня sIgA на поверхности кожи) [7], и также связаны с влиянием провоспалительных цитокинов, которые действуют как адгезины для стафилококков [8]. Установлена важная роль ИЛ4 в повышении связывания стафилококков с кожей [8], большое значение для колонизации кожи стафилококками имеет снижение pH кожи в сторону защелачивания [8].

Отмечено, что стафилококковые энтеротоксины (СЭ) сами по себе могут играть роль в поддержании АД, так как, обладая суперантигенными свойствами, могут вызывать дисбаланс ТЫ/ТИ2-клеток.

Стафилококки продуцируют 18 иммунологи-чески различных типов энтеротоксинов от А до V [9]. Энтеротоксины A (SEA), B (SEB), TSST-1, продуцируемые стафилококками, способны индуцировать продукцию специфических к ним IgE-ан-тител, которые имеют большое значение при АД. Известно, что у 57% больных детей и подростков с АД имеются IgE к SEA, SEB, SEC, TSST-1, что косвенно указывает на этиологическую роль СЭ в возникновении АД [10].

Способностью вырабатывать СЭ обладают также некоторые коагулазоотрицательные штаммы стафилококков [11, 12], поэтому нельзя не учитывать и их роли в возникновении АД. Известно также, что тяжесть течения АД зависит от присутствия в коже СЭ [10], однако до сих пор не установлена частота распространения энтеротоксигенных штаммов S. aureus у больных АД и недостаточно изучен вклад представителей энтеротоксигенных стафилококков в развитие и особенности течения АД, в связи с чем целью нашей работы было определить частоту встречаемости штаммов S. aureus и S. epidermidis, продуцирующих СЭ, при АД у детей.

Материалы и методы исследования

В исследовании, проводимом с 2006 по 2007 гг., приняли участие 47 детей в возрасте от 4 мес до 16 лет с АД, из них мальчиков 52% и девочек 48%. Длительность заболевания составила в среднем 8-9 лет (от 4 мес до 13 лет). Критерием отбора в данное исследование было выявление носитель-ства S. aureus на поверхности кожных покровов, либо сочетание носительства S. aureus на поверхности кожи и колонизации S. aureus кишечного эпителия.

Обследование детей состояло из осмотра и сбора данных анамнеза, клинических исследований, в том числе лабораторных (иммунологические: проточная цитофлуорометрия и иммуноферментный анализ; мик-

робиологические: бактериологическое исследование мазков и соскобов с поверхности кожи и кала), функциональных методов (УЗИ, ЭКГ).

Для оценки степени тяжести АД использовали рекомендации Европейской оперативной группы по разработке метода оценки АД по шкале SCORAD (эритема, отек/папула, корки/мокнутие, эскориации, лихонифи-кация, сухость кожи). При величине индекса SCORAD от 0 до 20 баллов течение АД расценивали как легкое, от 20 до 40 баллов — как среднетяжелое, более 60 баллов — как тяжелое.

Определение общих IgE проводили иммунофермент-ным методом с использованием стандартных наборов для определения фирмы Beringer, Германия.

Также было проведено исследование носительства штаммов S. aureus на поверхности кожи и в составе кишечного микробиоценоза и определение энтеротокси-генности данных штаммов, для чего были исследованы 29 штаммов S. aureus, выделенных с кожных покровов у больных АД, а также 6 штаммов S. aureus, выделенных из кала больных АД, 18 штаммов S. epidermidis, выделенных с поверхности кожи, и 10 штаммов — из кала детей с АД. Проводили исследование энтеротоксигенности штаммов S. aureus, выделенных из кала при исследовании кишечного микробиоценоза. Видовую идентификацию штаммов проводили по общепринятой методике. Все исследованные штаммы S. aureus образовывали ле-цитиназу и коагулазу, а также ферментировали лактозу. Выращивание штаммов стафилококков проводили на жидкой питательной среде Casman E.P. (1958) в нашей модификации при встряхивании на шуттель-аппарате со скоростью 210 об/мин в течение 24-30 ч при 37°С. Микробные клетки удаляли центрифугированием при 10 тыс об/мин в течение 15 мин. В работе использовали надосадочную жидкость. Выявление СЭ типов А и В (SEA и SEB) производили методом реакции непрямой ге-магглютинации (РНГА) с использованием лиофилизиро-ванных эритроцитарных диагностикумов. Чувствительность эритроцитарных диагностикумов — 125 нг/мл [13]. Для постановки РНГА использовали аппарат Така-чи (Венгрия). Результаты учитывали по общепринятой методике. Определение TSST-1 у штаммов стафилококков проводили иммуноферментным методом (ИФА) с использованием иммуноферментных тест-систем [14].

Данные исследования обрабатывали с применением программы статистического анализа Biostat в среде Windows XP и стандартного приложения Excel для Microsoft Office 2005. Использовали метод %2 Пирсона с

поправкой Йетса, корреляционный анализ (оценивали коэффициент Пирсона), критерий статистической значимости считали достоверным при р

При сравнении полученных нами результатов о встречаемости штаммов, продуцирующих СЭ типов SEA и SEB при АД, с данными литературы, было отмечено, что данная частота аналогична частоте встречаемости энтеротоксигенных штаммов стафилококков, продуцирующих SEA и SEB, выделенных при аллергических заболеваниях ЛОР-органов [15].

Нами также было проведено сравнение частоты продукции СЭ типов SEA и SEB у больных детей с АД в зависимости от возраста (табл. 2).

Как видно из табл. 2, частота продукции СЭ типов SEA и SEB у больных АД незначительно

Частота продукции СЭ штаммами S. aureus и S. epidermidis, выделенных с поверхности кожи у детей с атопическим дерматитом

Вид стафилококка Кол-во штаммов Кол-во штаммов, не продуцирущих токсины Кол-во штаммов, продуцирующих токсины

S. aureus 29 11 (36,7%) 14 (48,2 %) 17 (58,6 %) 16 (55,1%)

S. epidermidis 18 16 (77,6%) 3 (16,6%) 1 (5,8 %) —

уменьшается с возрастом, как это происходит и при дисбактериозе кишечника.

Также было проведено сравнительное исследование содержания IgE, баллов SCORAD и тяжести течения АД в зависимости от наличия у штаммов стафилококков способности продуцировать стафилококковые токсины вообще и, в частности, типов SEA, SEB и TSST-1 и продолжительности течения заболевания (табл. 3). Как видно из табл. 3, для больных с выделенными с поверхности кожных покровов штаммами S. aureus, которые не обладали способностью продуцировать токсин, были характерны меньшие значения IgE и суммы баллов по шкале SCORAD, указывающие на менее выраженную тяжесть течения АД, несмотря на то, что заболевание имело наибольшую длительность. Дети, у которых были выделены штаммы, продуцирующие токсины, отличались более тяжелым течением АД, высокими показателями IgE, большей выраженностью клинических проявлений (сумма баллов по шкале SCORAD), несмотря на меньшую длительность заболевания.

При сравнительном анализе клинико-лабо-раторных показателей при выделении штаммов S. aureus, продуцирующих различные токсины, было отмечено, что наиболее отрицательное влияние оказывали штаммы, способные продуцировать SEB и особенно TSST-1. Так, показатели корреляционного анализа свидетельствуют, что при наличии продукции данных токсинов у больных увеличиваются значения шкалы SCORAD и IgE (коэффициент г Пирсона в диапазоне от 0,3 до 0,69 свидетельствует о средней степени связи). Таким образом, нами установлено отрицательное влияние энтеротоксинообразования штаммов S. aureus на течение АД.

Также было отмечено, что тяжесть течения АД зависит от количества продуцируемого СЭ и количества продуцируемых типов СЭ, более тя-

Частота продукции СЭ типов SEA и SEB S. aureus у детей с АД в зависимости от возраста

Возраст детей Кол-во исследованных штаммов SEA SEB

4 мес — 5 лет 6 4 (66,6%) 5 (83,3%)

Старше 10 лет 16 8 (50%) 10 (62,5%)

желое течение АД наблюдалось у детей, у которых были выделены штаммы S. aureus, продуцирующие более 3 типов токсинов. Штаммы S. aureus, выделенные от больных АД с длительным сроком заболевания, как правило, имеющих высокие значения суммы баллов по шкале SCORAD (85-97 баллов), продуцировали 3 типа СЭ: SEA, SEB и TSST-1.

При исследовании распространенности энтеро-токсинобразующих штаммов и их роли при АД у детей нами был исследован микробиоценоз кишечника у детей. Было выявлено, что у 33,3% детей имеется также колонизация кишечника S. aureus, при этом в большинстве случаев выделяемые штаммы с поверхности кожи и из кала характеризовались продукцией СЭ.

Известно, что вегетирующие на поверхности кожных покровов штаммы S. epidermidis обладают способностью продуцировать СЭ. В связи с этим нами было проведено исследование выделяемых штаммов на способность к продукции энтероток-синов и их влияние на особенности течения АД у детей (табл. 4).

Надо отметить, что лишь незначительное количество штаммов S. epidermidis, выделенных с поверхности кожи больных детей, обладали способностью продуцировать СЭ типов SEA и SEB (p>0,05).

Средние показатели IgE, шкалы SCORAD и тяжести течения АД у детей в зависимости от обнаружения у них штаммов S. aureus, продуцирующих различные токсины

Штамм St. aureus IgE, МЕ/мл г (p) Шкала SCORAD, баллы г (p) Длительность АД, годы г (р) Тяжесть течения г (p)

Штамм не выделяет СЭ 360,8±320 н/п 62,5±6,4 н/п 12,7±3,0 н/п Средне-тяжелое 0,02 0,03

SEA 509±350 0,12 (p=0,03) 80,2±11,3 -0,27 (p>0,05) 7,8±5,3 -0,3 (p=0,04) Средне-тяжелое 0,02 0,03

SEB 550±365 0,28 (p=0,01) 90,2±12,0 0,64 (p=0,01) 8,0±5,4 -0,28 (p=0,02) Тяжелое 0,13 0,03

TSST-1 693,3±400 0,5 (p=0,001) 91,2±7,0 0,48 (p=0,001) 10,0±5,0 0,12 (p=0,02) Тяжелое 0,13 (p>0,05)

СЭ 3-го типа 686,8±450 н/п 89,5±8,0 н/п 11,4±3,0 н/п Тяжелое н/п

Здесь и в табл. 4: н/п — не проводили.

Средние показатели IgE, шкалы SCORAD у детей с АД в зависимости от обнаружения у них штаммов ер1йетш1й1в с различной способностью к токсинообразованию

Штамм S. epidermidis IgE, МЕ/мл r (p) Шкала SCORAD, баллы r (p) Длительность АД, годы r (p)

Штамм не выделяет СЭ 396,0±320 н/п 53,1±24,4 н/п 7,9±4,3 н/п

SEA 250±55 0,96 (p>0,08) 42,2±13,8 -0,28 (p>0,08) 6,9±3,2 н/п

SEB 260±86,6 -0,2 (p>0,05) 52,2±12,0 0,33 (p>0,05) 8,0±2,4 н/п

Таким образом, при проведении исследования было обнаружено, что штаммы S. aureus, вегетиру-ющие на коже больных АД детей, более чем в 60% случаев способны продуцировать СЭ, при этом не было выявлено доминирующего СЭ, так как количество S. aureus, продуцирующих SEA и SEB, значимо не отличалось. Также было отмечено, что значительное количество штаммов (55,1%) обладали способностью продуцировать TSST-1. Было отмечено, что с возрастом детей незначительно уменьшается частота выявления штаммов, обладающих способностью к продукции СЭ.

При проведении сопоставлений клинических данных с носительством энтеротоксигенных штаммов S. aureus было выявлено, что способность к токсинообразованию оказывает отрицательное влияние на течение АД, что проявляется увеличением суммы баллов по шкале SCORAD, указывающим на тяжесть течения АД, а также высокой продукцией IgE у больных. При этом было отмечено наиболее значимое отрицательное влияние СЭ типа В и TSST-1, в особенности последнего на указанные показатели. Также было выявлено, что штаммы S. epidermidis в значительно меньшей степени характеризовались способностью продуцировать эн-теротоксины, степень влияния которых на патологический процесс в связи с малочисленностью наблюдений проследить оказалось невозможным.

Лучшая статья за этот месяц:  Атопический дерматит у взрослых лечение мазями

Выявленное значительное отрицательное влияние СЭ на течение АД обусловлено, вероятно, их

значимым патологическим воздействием на иммунную систему человека, а именно СЭ считаются факторами, которые приводят к значительной стимуляции выработки цитокинов и факторов воспаления : ИЛ1, ИЛ2, ИЛ4, ИЛ6, ИЛ10, ИЛ12, TNFa, TNFy и недифференцированных форм Т-лимфоци-тов, не обладающих способностью к распознаванию чужих пептидов, при этом известно, что ИЛ1 и ИЛ12 и фактор некроза опухоли поддерживают кожный зуд и воспаление, а ИЛ12 вызывает активацию В-клеток и синтез ими специфических IgE, которые при фиксации на тучных клетках при повторном контакте с антигенами вызывают выброс гистамина, серотонина и медиаторов воспаления. Также считается, что СЭ в качестве суперантигенов могут воздействовать на интерферонообразую-щую функцию лейкоцитов, приводя к угнетению синтеза ИФНу, который играет существенную роль в подавлении синтеза IgE, таким образом способствуя гиперпродукции IgE у больных АД и, следовательно, к более тяжелому течению АД [12], что подтверждают полученные нами данные об отрицательном воздействии SEB и TSST-1 на течение АД у детей. Таким образом, выявление энтероток-синпродуцирующих штаммов S. aureus у детей с АД может расцениваться как фактор, усугубляющий течение заболевания, что требует своевременной медикаментозной коррекции и проведения профилактических мероприятий для предотвращения колонизации поверхности кожи и кишечника энтеротоксинпродуцирующими штаммами S. aureus.

1. Балаболкин И.И., Гребенюк В.Н. Атопический дерматит у детей. М.: Медицина, 1999.

2. Смирнова Г.И. Аллергодерматозы у детей. М.: БУК лтд, 1998.

3. Сидороенко О А. Патогенетическое обоснование комплексной терапии атопического дерматита у детей. Автореф. дисс. . докт. мед. наук. М., 2007.

4. Долгина Е.Н., Беляев Д.Л. Оценка терапевтической эффективности человеческого лейкоцитарного интерферона альфа для инъекций и комплексного препарата цитокинов лей-кинферона в лечении детей, больных бронхиальной астмой. Пульмонология. 2006; 6: 92-98.

5. Hauser C, Wuetrhrich B, Matter L et al. Staphylococcus

aureus skin colonization in atopic dermatitis patients. Dermatologica. 1985; 170: 35-39.

6. Mempel M, Schmidt T, Weidinger S et al. Role of Staphylococcus aureus surface-associated proteins in the attachment to cultured HaCaT keratinocytes in a new adhesion assay. J. Invest. Dermatol. 1998; 111: 452-456.

7. Imayama S, Shimozono Y, Hoashi M et al. Produced secretion of IgA to skin suface of patients with atopic dermatitis. J. Allergy Clin. Immunolog. 1994; 94: 195-200.

8. Cho SH, Strickland I, Tomkinson A еt al. Preferential bin ding of Staphylococcus aureus to skin sites of Th2 mediated inflammation in a murine model. J. Invest Dermatol. 2001; 116: 658-663.

9. Dinges MM, Orwin PM, Schlievert PM. Exotoxins of Staphylococcus aureus. Clin. Microbiol Rev. 2000; 13 (1): 16-34.

10. Akijama H, Toi. Y, Kanzaki H et al. Prevalence of Producers of Enterotoxins and Toxic Shock Syndrome Toxin-1 Among Staphylococcus aureus Strains isolated from Atopic Dermatitis Lesions. Arch. Dermat. Research. 1996; 288 (7): 418-420.

11. Bautista L, Gaya H, Medina M, Nunez MA. Quantative study of enterotoxin production by sheep milk staphylococci. Appl. Environ. Microbiol. 1988; 54: 566-569.

12. Leung DYM, Travers JB, Noris DA The Role of Superan-tigens in Skin Disease J. Invest Dermatology. 1995; 105 (1): 37-42.

13. Флуер Ф.С., Михеева Г.В., Акатов A.K. Создание эрит-

© Ибрагимова Н.И., Гаджиев Е.М., 2008

роцитарных диагностикумов для определения стафилококковых энтеротоксинов. В сб. МНИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи. М.: 1990: 89-99.

14. Флуер Ф.С., Михеева Г.В., Пожар П.Ф., Акатов А.К. Тест-система иммуноферментная для определения стафилококкового экзотоксина токсического шока. Ж. микробиол., эпидемиол., и иммунобиол. 1990: 70-73.

15. Флуер Ф.С., Батуро А.П., Прохоров В.Я. и др. Энтеро-токсигенность Staphylococcus aureus, выделенных у JIOP-боль-ных, как фактор развития и поддержания аллергической патологии. Рос. научно-практ. конф. «Инфекции, вызываемые условно-патогенными микроорганизмами». М., 2007: 104-105.

Аллерген o72 — энтеротоксин А (Staphylococcus aureus), IgE

Записаться на анализ «Аллерген o72 — энтеротоксин А (Staphylococcus aureus), IgE» вы можете заполнив форму ниже или заказав бесплатный звонок администратора!

Подготовка к сдаче анализа происходит следующим образом:

Общий анализ крови, гормоны, биохимический анализ крови, светрываемость (коагулология), изосерология, онкомаркеры, аллергология, иммунология, ПЦР

Исследование проводится утром натощак. Негазированную воду можно пить в обычном режиме. В случае необходимости можно сдать кровь через 2-4 часа после необильного приема пищи. Накануне перед исследованием исключить физические нагрузки, эмоциональное перенапряжение, приём алкоголя, УФО, воздействие рентгеновских лучей. За 30 мин. до исследования не курить, не производить внутривенные и внутримышечные инъекции.

ВАЖНО: исследование на онкомаркер простатоспецифический антиген (ПСА) рекомендовано проводить не ранее, чем через 10 дней после цистоскопии, колоноскопии, тепловых процедур, пальцевого ректального исследования, трансуретральной биопсии, лазерной терапии, физиопроцедур, трансректального узи простаты. Гормональные исследования рекомендовано сдавать утром, до 10.00 – 11.00.

Где сделать анализ «Аллерген o72 — энтеротоксин А (Staphylococcus aureus), IgE»?

Обратитесь в медицинский центр «Рождение». Сотрудники возьмут у Вас биологический материал. Эта процедура полностью безопасна, проводится с использованием стерильных инструментов.

Через несколько дней после того, как сделали анализ крови, результаты проведенных исследований будут у Вас на руках. Если аллергия на грибы подтвердилась, следует обратиться к врачу.

Сдать анализ «Аллерген o72 — энтеротоксин А (Staphylococcus aureus), IgE» можно по адресу Варфоломеева 239 -Медицинский центр рождение.

Энтеротоксин А (Staphylococcus aureus), IgE

Извините, по вашему запросу услуг не найдено. Попробуйте изменить параметры запроса.

Энтеротоксин А (Staphylococcus aureus), IgE

ОБЩИЕ ПРАВИЛА ПОДГОТОВКИ К АНАЛИЗАМ КРОВИ

Для большинства исследований кровь рекомендуется сдавать утром натощак, это особенно важно, если проводится динамическое наблюдение за определенным показателем. Прием пищи может непосредственно влиять как на концентрацию исследуемых показателей, так и на физические свойства образца (повышенная мутность – липемия – после приема жирной пищи). В случае необходимости можно сдать кровь в течение дня после 2-4-часового голодания. Рекомендуется незадолго до взятия крови выпить 1-2 стакана негазированной воды, это поможет набрать необходимый для исследования объем крови, уменьшит вязкость крови и снизит вероятность образования сгустков в пробирке. Необходимо исключить физическое и эмоциональное перенапряжение, курение за 30 минут до исследования. Кровь для исследования берется из вены.

Энтеротоксин А (Staphylococcus aureus) IgE, O72

Сроки выполнения: 1р.д(КДЛ)

Группа анализов: Специфические антитела класса IgE к индивидуальным аллергенам. Токсины

Описание: Можно сдавать кровь в течение дня, не ранее, чем через 3 часа после приема пищи или утром натощак. Чистую воду можно пить в обычном режиме.

Популярные анализы

о клинике

пациентам

Данный интернет-сайт носит информационный характер, не является публичной офертой.

Информацию уточнять в call-центре клиники по тел.: 65-51-51

© ООО «Больница для всей семьи», 2011-2020

  • ИМЕЮТСЯ ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ.
  • НЕОБХОДИМА КОНСУЛЬТАЦИЯ СПЕЦИАЛИСТА

Аллерген o72 энтеротоксин а staphylococcus aureus ige

м. Полежаевская, Проспект Маршала Жукова, д.38 к.1

  • Главная страница
  • Лаборатория

ВЫЕЗД ВРАЧА
НА ДОМ

Анализ крови на определение аллерген-специфического иммуноглобулина Е (IgE) в сыворотке крови проводится, чтобы проверить, есть ли у человека аллергия на конкретное вещество, в частности, на шоколад.

Кому необходимо проводить исследование крови

Аллергическая реакция на шоколад (какао) может протекать в легкой и более тяжелой степени. Заподозрить наличие аллергии можно по следующим симптомам: зуд и жжение в полости рта, сопровождающиеся отеком слизистой оболочки полости рта, губ, языка; зудящие высыпания на коже по типу крапивницы; симптомы бронхиальной астмы; тошнота, рвота, диарея, боли и спазмы в животе. Появление первых симптомов аллергии начинаются уже, как правило, во время приема шоколада. Иногда первые симптомы могут появиться спустя 2-3 часа.

При появлении вышеперечисленных симптомов необходимо пройти комплексное медицинское обследование у врача-аллерголога и сдать анализ на определение в сыворотке крови специфических антител IgE.

Определение IgE

В норме у любого человека в сыворотке крови определяется низкий уровень иммуноглобулина Е (следовые количества). Уровень IgE повышается пропорционально степени аллергии. Т.е. чем тяжелее протекает аллергическая реакция на банан, тем выше будет показатель IgE в крови.

Заключение анализа крови выдается в классах от 0 до 6 класса включительно.

Отсутствие аллергии или наличие следовых количеств специфических IgE в сыворотке крови человека определяют, как 0 класс. Первый класс характеризуется низкой концентрацией антител в крови и не дает клинических симптомов аллергии. Второй и третий классы имеют более высокие показатели титра антител и дают более выраженную клиническую симптоматику аллергии. Четвертый, пятый и шестой классы включительно характеризуются высоким и очень высоким значением антител в крови человека. Это говорит о возможном возникновении смертельно опасной реакции на аллерген — анафилактического шока.

Это основная расшифровка результатов анализа крови на аллергены, по которой врачи определяют диагноз и назначают соответствующее лечение в индивидуальном порядке.

Анализ на аллерген o72 — энтеротоксин А (Staphylococcus aureus), IgE

  • пн-пт 8:00-20:00.
  • сб, вс 9:00-18:00.
  • праздники 10:00-18:00.

Местоположение наших медицинских центров:

Филиалы сети расположены по адресам: ул.Куйбышева д.107 (Центр, метро Геологическая), ул.Циолковского д.27 (Район Южного Автовокзала, метро Чкаловская).

График: пн-пт: 8:00-20:00, сб-вс: 9:00-18:00, праздники: 10:00-18:00.

До 4 суток. Указанный срок не включает день взятия биоматериала.

Чтобы записаться на Аллерген o72 — энтеротоксин А (Staphylococcus aureus), IgE, позвоните нам по телефону или оставьте заявку на сайте. Консультация по телефону бесплатна.

Имеются противопоказания. Необходимо проконсультироваться со специалистом.

Энтеротоксин А (Staphylococcus aureus) IgE, O72

  • пн-пт 7:00-20:00.
  • сб, вс 7:00-16:00.

Вы можете записаться в медицинский центер ВРАЧ Ъ ​ через онлайн-форму записи, или по телефону.

Имеются противопоказания. Необходимо проконсультироваться со специалистом.

Мы располагаем современным диагностическим и лабораторным оборудованием, которое позволяет поставить диагноз в самые кратчайшие сроки, а значит своевременно и быстро начать лечение, выбирая самые эффективные методики.

Всем, кто обращается в нашу клинику, мы оказываем качественную медицинскую помощь.

В своей работе мы опираемся только на проверенные, доказавшие свою эффективность, научно обоснованные технологии.

Мы открыты для инноваций — наши сотрудники постоянно повышают свой профессиональный уровень.

Мы гарантируем бережное, заботливое отношение к каждому пациенту, профессионализм и высокое качество обслуживания.

Анализ на аллерген, энтеротоксин А (Staphylococcus aureus) IgE, O72

  • пн-пт 7:30-19:30.
  • сб 8:00-16:00.
  • вс 9:00-15:00.

Срок готовности анализа (календ. дней): 2.

Можно сдавать кровь в течение дня, не ранее, чем через 3 часа после приема пищи или утром натощак. Чистую воду можно пить в обычном режиме.

Выявление антител класса Е, отвечающих за быстрый ответ на введение аллергена. Если организм не имел контакта с данным аллергеном, тест будет отрицательным. Назначается для диагностики IgE-зависимой аллергии (атопии).

14 лет на рынке лабораторной диагностики.

Широкий перечень диагностических исследований.

— Возможность сдать, как отдельные лабораторные анализы (общий анализ крови, анализ биохимический, все виды анализов мочи и др.), так и комплексные исследования (например, полный анализ для выявления онкологических заболеваний или болезней почек, ИППП или кардиологических отклонений).

— Накопительная «Карте здоровья»: начальная скидка — 5 % (действует сразу, при оформлении карты). Можно объединить до 10 карт в семью для скорейшего накопления скидок.

— Услуга «Выезд на дом» (при заказе от 2 500 руб. бесплатно).

Получение смс о готовности результатов.

— В вашем «Личном кабинете» на сайте доступны все результаты анализов, которые вы когда-либо сдавали в KDL.

Поддержка call-центра в режиме 24/7.

Энтеротоксин А (Staphylococcus aureus), IgE

КЛАСС МЕ/мл Реактивность на аллерген Класс 0: =100 Очень высокая

Подготовка к исследованию (информация для пациента):

Рекомендуется сдавать кровь утром натощак. По назначению врача, допускается сдать кровь в течение дня, через 2-4 часа после необильного приема пищи. Рекомендовано исключить прием гормональных противоаллергических препаратов. О приеме антигистаминных препаратов необходимо информировать лечащего врача.

Преаналитика, влияние различных факторов на результат:

На результат может повлиять противоаллергическая терапия (гормоны и некоторые антигистаминные препараты)

Выявление антител класса Е, отвечающих за быстрый ответ на введение аллергена. Если организм не имел контакта с данным аллергеном, тест будет отрицательным. Назначается для диагностики IgE-зависимой аллергии (атопии).

Энтеротоксин А (Staphylococcus aureus), IgE

Извините, по вашему запросу услуг не найдено. Попробуйте изменить параметры запроса.

Энтеротоксин А (Staphylococcus aureus), IgE

ОБЩИЕ ПРАВИЛА ПОДГОТОВКИ К АНАЛИЗАМ КРОВИ

Для большинства исследований кровь рекомендуется сдавать утром натощак, это особенно важно, если проводится динамическое наблюдение за определенным показателем. Прием пищи может непосредственно влиять как на концентрацию исследуемых показателей, так и на физические свойства образца (повышенная мутность – липемия – после приема жирной пищи). В случае необходимости можно сдать кровь в течение дня после 2-4-часового голодания. Рекомендуется незадолго до взятия крови выпить 1-2 стакана негазированной воды, это поможет набрать необходимый для исследования объем крови, уменьшит вязкость крови и снизит вероятность образования сгустков в пробирке. Необходимо исключить физическое и эмоциональное перенапряжение, курение за 30 минут до исследования. Кровь для исследования берется из вены.

Аллерген o72 — энтеротоксин А (Stafilococcus aureus), IgE

Стоимость: 340 руб.

Стафилококковый энтеротоксин А по природе своей является протеином с молекулярным весом 24-30 Kd, который и выступает в качестве аллергена. Проявлениями аллергических реакций на стафилококковый энтеротоксин А могут являться атопический дерматит, аллергический ринит, аллергический конъюнктивит, заболевания пищеварительной системы (аллергический стоматит, хейлит, гастрит, колит, гастроэнтерит). Определение специфического иммуноглобулина Е к данному аллергену в повышенном количестве указывает на наличие сенсибилизации организма к этому аллергену.

способ определения специфических ige-антител к стафилококку в сыворотке крови больного аллергическими заболеваниями, имеющего гиперчувствительность к аллергенам стафилококка, с применением тест-системы для определения специфических ige-антител к стафилококку, выделенная из стафилококка активная аллергенная субстанция (аас) и способ диагностики стафилококковой аллергии

Изобретение относится к области медицины, а именно к иммунологии и аллергологии. Изобретение обеспечивает тест-систему ИФА для определения специфических IgE-антител к стафилококку в сыворотке крови больного аллергическими заболеваниями, имеющего гиперчувствительность к аллергенам стафилококка; способ определения специфических IgE-антител к стафилококку в сыворотке крови больного аллергическими заболеваниями, имеющего гиперчувствительность к аллергенам стафилококка, с применением указанной тест-системы; и способ диагностики стафилококковой аллергии. Применение заявленного изобретения позволяет выявить аллергию на стафилококк. 4 н. и 8 з.п. ф-лы, 1 ил., 2 табл.

Рисунки к патенту РФ 2436100

Изобретение относится к области медицины, а именно к аллергологии, иммунологии и клинической лабораторной диагностике.

В России аллергическими заболеваниями страдает от 10 до 30% населения [1]. Инфекционно-зависимые формы в структуре аллергических болезней составляют до 75% всех аллергопатологий, в числе которых следует отметить тяжело протекающие болезни: бронхиальную астму, хронические бронхиты, риниты, аллергодерматозы, осложненные инфекцией, нередко приводящие больных к инвалидности [2]. Экономический ущерб от аллергических заболеваний, осложненных инфекцией, чрезвычайно высок из-за многократных ежегодных обострений хронических инфекций у больных.

В основе инфекционно-зависимых форм аллергии лежит гиперреактивность сенсибилизированного организма больного к аллергенам микробов, обитающих на коже и слизистых оболочках носа, зева, бронхов больных [3, 4, 5, 6, 7]. Аллергенные свойства микроба зависят от природы его метаболитов, путей их трансформации внутри организма человека, от специфики взаимосвязей живой микробной клетки с организмом хозяина.

Многообразие способов воздействия микроба на макроорганизм обусловливает сложность решения проблемы аллергенности бактерий и их метаболитов [8]. Ранее исследованиями многочисленных авторов [9, 10], в частности сотрудниками ГНЦ-Института иммунологии ФМБА А.Д.Адо, В.Н.Федосеевой и соавт. 1997-2003 гг., было показано, что стафилококки играют важную роль в патогенезе инфекционно-зависимых форм аллергии. Была доказана возможность формирования гиперчувствительности немедленного типа у больных респираторно-аллергическими заболеваниями, атопическими дерматитами на аллергены стафилококка. Последнее является важным критерием назначения больным аллерген-специфической иммунотерапии аллерговакцинами из стафилококка [11] и последующей тактики ведения больных с немедленным типом аллергии к стафилококку.

Предлагаемая тест-система ИФА позволяет в условиях «ин витро» выявлять специфическое связывание IgE-антител в сыворотках крови пациентов, сенсибилизированных аллергенами стафилококка, и является необходимым дополнением как при клинико-лабораторной диагностике стафилококковой аллергии, так и при разработке стратегии ее аллерген-специфической иммунотерапии.

Существующие коммерческие тест-системы ИФА стафилококковой специфичности позволяют лишь определить наличие в организме человека стафилококковой инфекции, не выявляя специфического IgE-ответа на стафилококковые аллергены. В связи с этим в настоящее время в современной «ин витро»-диагностике стафилококковой аллергии указанный тест ИФА отсутствует. Возможно это объясняется тем, что длительный период времени основное внимание исследователей уделялось изучению механизмов иммунотоксических эффектов при действии на организм стафилококковых энтеротоксинов, а стафилококк — в качестве источника аллергенов, стимулирующих специфический IgE-ответ, рассматривался в качестве теоретических разработок лишь в единичных работах [9, 4, 12].

В последние годы появилась серия работ, подтверждающих участие стафилококковых суперантигенов в патогенезе аллергических заболеваний, в частности в стимуляции синтеза IgE-антител. При этом доказана связь аллергии к стафилококку с I (немедленным) типом аллергических реакций [13]. Это, в свою очередь, свидетельствует о необходимости применения рассматриваемой тест-системы ИФА при ин витро -диагностике аллергии немедленного типа к стафилококку [14, 4, 6, 15, 16].

Авторы не обнаружили в уровне техники аналог-прототип, наиболее близкий к заявленному изобретению, поскольку нами впервые была поставлена задача разработки технологии получения тест-системы ИФА для определения специфических IgE-антител к стафилококку в сыворотках крови больных аллергическими заболеваниями, имеющих гиперчувствительность к аллергенам стафилококка, и диагностики аллергии к стафилококку с использованием указанной тест-системы.

Использование настоящего изобретения позволяет определить специфические IgE-антитела к стафилококку в сыворотке крови больного аллергическими заболеваниями с помощью заявляемой тест-системы, обладающей высокой чувствительностью, и повысить эффективность диагностики аллергии к стафилококку.

В соответствии с настоящим изобретением тест-система ИФА для определения специфических IgE-антител к стафилококку в сыворотке крови больного аллергическими заболеваниями, имеющего гиперчувствительность к аллергенам стафилококка, включает планшеты одноразового применения с иммобилизованной активной аллергенной субстанцией (AAC), выделенной из стафилококка, на стрипах; AAC St. aureus; положительный и отрицательный контроли (сыворотки); конъюгат анти-IgE-антител; твин-20; буфер с добавлением Твина (pH 7,0-7,2) для приготовления раствора для отмывок; цитратный буфер (pH 4,7) для приготовления рабочего раствора; ортофенилендиамин (ОФД) в виде таблеток 0,0002 г и пергидроль H 2 O 2 — 37% — для приготовления красящего раствора; H 2 SO 4 в качестве стоп-раствора; и инструкцию по использованию набора. При этом AAC состоит из трех активных фракций с молекулярными массами 50, 130 и 170 кДа.

Вторым объектом изобретения является способ определения специфических IgE-антител к стафилококку в сыворотке крови больного аллергическими заболеваниями, имеющего гиперчувствительность к аллергенам стафилококка. Указанный способ включает следующие стадии: подготовку твердой фазы (планшет) для сорбции AAC с использованием КББ — карбонатно-бикарбонатного буфера (pH 9,5); нанесение раствора AAC в лунки планшета; инкубацию AAC на твердой фазе в холоде при 2-4°C в течение 2 суток; отмывание буфером (pH 7,0-7,2) трижды, подсушивание; нанесение контрольных и испытуемых сывороток в лунки соответствующих стрипов с 50 мкл буфера (pH 7,0-7,2); инкубацию в термостате при 37°C в течение 2,5 часов; отмывание буфером (pH 7,0-7,2) трижды, подсушивание стрипов; нанесение раствора конъюгата во все лунки стрипов; инкубацию в холоде при 2-4°C в течение 18-20 часов; нанесение красителя ОФД в цитратном буфере (pH 4,7) во все лунки стрипов; нанесение во все лунки стоп-раствора; контроль реакции ИФА по оптической плотности во всех образцах при длине волны 492 нм на Мультискане.

Следующим объектом изобретения является способ диагностики стафилококковой аллергии, включающий определение специфических IgE-антител к стафилококку в сыворотке крови больного с использованием вышеуказанного способа, причем позитивная реакция оценивается 2-4 классом.

1. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

1. Подбор и паспортизация опытных штаммов стафилококка для получения аллергенной субстанции осуществлялась на основе идентификации видовых признаков штаммов стафилококка, выделенных от больных бронхиальной астмой и атопическим дерматитом стафилококкового генеза, на базе бактериологической лаборатории ГФБУ Институт иммунологии ФМБА, Отдела живых культур ГИСКа им Л.А.Тарасевича Роспотребнадзора с учетом морфологических, культуральных и биохимических характеристик.

1.2 Создание банка специфических сывороток с высокой IgE-связывающей активностью с аллергенами стафилококка осуществлялось на основе клинико-лабораторного обследования больных респираторно-аллергическими заболеваниями и атопическим дерматитом (АД), осложненными стафилококковой инфекцией отделения НКО (зав. проф. Л.В.Лусс) и отд. аллергологии и иммунопатологии кожи (зав. проф. Феденко Е.С.). Обследовано 47 больных с бронхиальной астмой и 12 чел. с АД, осложненными стафилококковой инфекцией (всего 59 чел.). Банк специфических сывороток составил 15 образцов с интенсивностью ИФА в специфическом IgE-связывании со стафилококковым аллергеном 2-4 класса.

1.3 Получение аллергенной фракции производили по методу выращивания культур на питательных средах, покрытых целлофановыми дисками [9] с последующей обработкой суспензии клеток стафилококка в ультразвуковом дезинтеграторе. Дробление стафилококковых клеток проводили с помощью ультразвукового дезинтегратора UD-20 фирмы Techpan (Польша) при рабочей частоте 22±1,65 кГц и выходной мощности 180 Вт. Дезинтегрирование проходило в течение 45 мин. Неразрушенные фрагменты микробных клеток осаждали центрифугированием, осадок удаляли. Определяли чистоту и однородность декантата, содержание белка по Кьельдалю, которое составило 0,5 мг/мл. Разделение белковых фракций в надосадочной жидкости проводили методом электрофореза в полиамилакридном геле с использованием камеры для электрофореза SE 300 mini VE фирмы Hoefer (США). Фракции с молекулярной массой 170, 130 и 50 кДа показали наивысшую степень специфического IgE-связывания в иммуноблоте. Выделение указанных фракций осуществляли методом гель-фильтрации с использованием Сефадекса G-100 фирмы Pharmacia (Швеция) на колонке фирмы LKB (Швеция) размером 3>

Классы МПК: G01N33/53 иммунологический анализ, анализ биоспецифического связывания, материалы для этого
A61P37/08 противоаллергические средства
Автор(ы): Федосеева Вера Николаевна (RU) , Камышева Валерия Алексеевна (RU) , Миславский Олег Владимирович (RU) , Федоскова Татьяна Германовна (RU) , Лункина Елена Владимировна (RU) , Мартынов Александр Игоревич (RU)
Патентообладатель(и): Федеральное государственное бюджетное учреждение «Государственный научный центр «Институт иммунологии» Федерального медико-биологического агентства (ФГБУ «Институт иммунологии» ФМБА России) (RU),
Федосеева Вера Николаевна (RU),
Мартынов Александр Игоревич (RU),
Камышева Валерия Алексеевна (RU)
Приоритеты:
Таблица 1
Показатели специфической IgE-связывающей активности AAC Staphylococcus aureus с сыворотками крови больных в «in vitro»-тесте ИФА для выявления аллергии немедленного типа по специфическому IgE-связыванию с аллергенами St
Форма аллергена Изготовитель IgE-антитела
Класс реакции (M±m)
Число экспериментов
AAC Staphylococcus aureus Институт иммунологии 3,2±0,2 7
Аллерген Рузам Брынцалов-А (Россия) 2,1±0,2 7
Контроль (сыворотка) Отрицат. 3
сыворотка, не содержащая специфических антител против Staphylococcus aureus.

Из таблицы 1 видно, что образец AAC St. aureus, полученный в Институте иммунологии, обладает специфической активностью.

Уровни связывания специфических IgE-антител в сыворотках крови больных с гиперчувствительностью к Staphylococcus aureus с испытуемой AAC из Staphylococcus aureus составили 3,2±0,2 (класс ИФА), что подтверждает специфическую активность AAC. Препарат Рузам — менее активен.

2.5 Разработка экспериментального технологического процесса изготовления на основе ЛАС тест-системы ИФА для определения IgE-антител в сыворотках крови больных с гиперчувствительностью к аллергенам стафилококка

Для определения аллерген-специфических IgE-антител был отработан оптимизированный метод твердофазного ИФА на основе конъюгатов, меченных пероксидазой хрена (ООО Полигност , Санкт-Петербург) с тестированием планшет сборных, одноразового применения, различной сорбции для иммунологических исследований. Тест-система модифицирована для определения IgE-антител на стрипах с иммобилизованными аллергенами (1 стрип — 8 ячеек) ЗАО «БиоХимМак».

Были выявлены оптимальные условия связывания AAC Staphylococcus aureus на планшетах разной степени сорбции аллергенов. Найдены критерии оптимальной фиксации препарата и максимальной интенсивности специфического IgE-связывания, что использовано на разных этапах выполнения работ.

Проведена оценка специфической активности разработанной тест-системы ИФА.

Сформулированы требования к тест-системе ИФА на основе AAC:

— AAC должна обладать способностью взаимодействовать со специфическими к St. aureus IgE -антителами контрольной положительной сыворотки (положительный контроль). Образуемый комплекс выявляется пероксидазным конъюгатом моноклональных анти-IgE-антител, образующих цветное окрашивание с субстратной смесью. Определение проводят твердофазным иммуноферментным анализом (ИФА) [23].

Определение считают удовлетворительным, если положительная контрольная сыворотка при взаимодействии с испытуемыми образцами Staphylococcus aureus дает цветное окрашивание, оптическая плотность которого выше оптической плотности контрольной отрицательной сыворотки

Пример технологического процесса (ТП)

ТП-1 — подготовка твердой фазы (планшет) для сорбции AAC с использованием КББ (pH — 9,25);

ТП-2 — нанесение раствора AAC в лунки планшета;

ТП-3 — инкубация AAC на твердой фазе в холоде при 2-4°C в течение 2 суток;

ТП-4 — отмывание буфером (pH 7,0-7,2), подсушивание;

ТП-5 — нанесение контрольных и испытуемых сывороток в лунки соответствующих стрипов с 50 мкл буфера (pH 7,0-7,2);

ТП-6 — инкубация в термостате при 37°C в течение 2,5 часов;

ТП-7 — отмывание буфером (pH 7,0-7,2), подсушивание стрипов;

ТП-8 — нанесение раствора конъюгата во все лунки стрипов;

ТП-9 — инкубация в холоде при 2-4°C в течение 18-20 часов;

ТП-10 — отмывание буфером (pH 7,0-7,2), подсушивание стрипов;

ТП-11 — нанесение красителя ОФД в цитратном буфере (pH 4,7) во все лунки стрипов;

ТП-12 — нанесение во все лунки стоп-раствора;

ТП-13 — контроль реакции ИФА по оптической плотности во всех образцах при длине волны 492 в Мультискане.

2.6 Апробация разработанной тест-системы ИФА в клинико-лабораторных исследованиях

Было собрано 26 сывороток крови больных с респираторно-аллергическими заболеваниями и атопическим дерматитом, осложненными стафилококковой инфекцией. Показано, что сыворотки 81% пациентов с гиперчувствительностью к St.aureus показали положительную реакцию с AAC в тест-системе ИФА (2-4 класс реакции) при сравнении с позитивным и негативным контролями.

На основании проведенной работы разработана Инструкция по применению тест-системы ИФА для диагностики аллергии к стафилококку и макет тест-системы (см. иллюстрации).

ИНСТРУКЦИЯ ПО ПРИМЕНЕНИЮ ТЕСТ-СИСТЕМЫ ИФА ДЛЯ ДИАГНОСТИКИ АЛЛЕРГИИ К СТАФИЛОКОККУ

Назначение: тест-система ИФА на основе AAC St.aureus предназначена для выявления специфических к стафилококку IgE-антител в сыворотках крови больных аллергическими заболеваниями, осложненными стафилококковой инфекцией.

Область применения: данная диагностическая система может быть использована для выявления аллергии к стафилококку.

Принцип определения: на основе активной аллергенной субстанции стафилококка (AAC) проводится скрининговый ИФА для выявления специфических IgE-антител к стафилококку у больных аллергическими заболеваниями, осложненными стафилококковой инфекцией.

Комплект тест-системы включает:

— планшеты одноразового применения (тест-система модифицирована для определения IgE-антител на стрипах с иммобилизованной AAC (1 стрип — 8 ячеек) ЗАО «БиоХимМак»),

— положительный контроль (сыворотка),

— отрицательный контроль (сыворотка),

— буфер с добавлением Твина (pH 7,2) (для отмывания, рабочий раствор),

— цитратный буфер (pH 4,7) — рабочий раствор,

— ортофенилендиамин (ОФД), таблетки 0,002 г,

— пергидроль H 2 O 2 — 37%,

— H 2 SO 4 — 50% (стоп-раствор),

— Инструкция по использованию набора.

Таблица 2.
Приготовление растворов
Рабочие растворы Состав и приготовление Хранение
1 Промывочный раствор Буфер (натриевая соль-твин 20) pH 7,0-7,2: Хранить при 5±3°C — 7 дней
Натрия хлорид, чда 9,0 г
Твин-20 0,5 мл
Дистиллированная вода до 1 л
Коррекцию pH проводить 0,2 М раствором натрия фосфорнокислого двузамещенного
2 Рабочий раствор конъюгата 12 мкл конъюгата (моноклональные антитела против эпсилон-цепи IgE человека) поместить в 12 мл буфер натриевой соли-твина 20 (на 1 планшет) Использовать в день приготовления
3 Цитратный буфер рабочий раствор Цитратный буфер pH 4,7±0,2: Хранить при 5±3°C — 7 дней
Лимонная кислота 0,1М 3 мл
Натрий фосфорнокислый однозамещенный 0,2 М 1 мл
Натрий фосфорнокислый двузамещенный 0,2 М 2 мл
Дистиллированная вода 6,5 мл
Из расчета на 1 планшет
Коррекцию pH проводить 0,2 М раствором натрия фосфорнокислого двузамещенного
4 Красящий раствор ОФД В цитратном буфере полностью растворить 1 таб. ортофенилендиамина, после этого внести водорода перекись 37% (пергидроль) 5 мкл (на 1 планшет) Использовать в течение 1 часа после приготовления
5 H 2 SO 4 — 50% (стоп-раствор) Серная кислота — H 2 SO 4 50% В течение 1 года

1. Набор автоматических дозаторов переменного объема «Biohit».

2. Холодильник с морозильной камерой на -20°C.

3. Стерильные наконечники.

4. Пробирки типа «Эппендорф» на 1,5 мл.

5. Центрифуга ЦЛ1/3.

6. Мультискан (Multiskan EX, Thermo Labsystems).

7. Термостат TC-80M-2.

8. Мешалка Titertek.

9. Иономер универсальный ЭВ-74.

10. Планшеты разборные, одноразовые, модифицированные, высокой сорбции (производства ГУП ГОС НИИ «Биомедикал»).

— В лунки планшета вносят по 100 мкл карбонатного буфера.

— В каждую лунку добавляют 20 мкл AAC.

— Планшет помещают на 2 суток в холодильник.

— Отмывание несвязавшегося AAC проводят 3 раза буфером (pH 7,2).

— Во все лунки стрипов вносят по 50 мкл буфера pH 7,2, а затем:

— в стрип № 1 — 50 мкл положительного контроля — позитивная сыворотка, содержащая IgE-антитела к стафилококку, с реакцией в ИФА — 2-4 класса.

— В стрип № 2 — 50 мкл исследуемых сывороток крови, содержащих IgE-антитела к стафилококку.

— В стрип № 3 — 50 мкл сывороток крови, не содержащих IgE-антитела к стафилококку,

— отрицательный контроль, на 2-3 часа все стрипы, прикрыв крышкой, помещают в термостат при t=37°C.

— Планшет вынимают, отмывают буфером (pH=7,2) 3 раза.

— Заливают во все лунки каждого стрипа по 100 мкл рабочего раствора конъюгата и выдерживают в холодильнике 18-20 часов.

— Вынимают из холодильника и отмывают 3-4 раза буфером (pH 7,2), просушивают.

— Добавляют во все лунки стрипов по 100 мкл краски ОФД (рабочий субстрат), выдерживают в темноте 10-15 минут.

— Реакцию останавливают добавлением во все лунки стрипов по 100 мкл 50% р-ра H 2 SO 4 .

— Результаты считывают на Мультискане (при длине волны 492 нм).

Результаты измерений сравнивают с показателями в позитивном и негативном контролях, позитивная реакция оценивается 2-4 классом.

Примеры осуществления способа диагностики

1. Пациентка Максимова И.В., 33 г. На протяжении 4 лет принимает противоаллергическую терапию без эффекта. Пациентке провели определение специфических IgE-антител к стафилококку в сыворотке крови заявленным способом. Определился 4 класс реакции, что явилось показанием к назначению специфической иммунотерапии стафилококковой иммуновакциной.

2. Пациентка Худуева Е.Ю., 47 л. Практически всю жизнь страдает от аллергии. Принимает лечение, часто без эффекта. Заявленным способом определили 4 класс реакции, что явилось показанием к назначению специфической иммунотерапии стафилококковой иммуновакциной.

3. Пациент Кларк М., 13 лет. Определили 3 класс реакции, что явилось показанием к назначению специфической иммунотерапии стафилококковой иммуновакциной.

4. Пациент Киреев C., 2 года. Определили 2 класс реакции, что явилось показанием к назначению специфической иммунотерапии стафилококковой иммуновакциной.

СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННЫХ ИСТОЧНИКОВ.

1. Адо А.Д. Общая аллергология , М., 1978, 464 с.

2. Фрадкин В.В. «Диагностические и лечебные аллергены», М., Мед., 1990, 256 с.

3. Беклемишев Н.Д., Суходоева Г.С.«Аллергия к микробам в клинике и эксперименте», М., Мед., 1990, 262 с.

4. Елисютина О.Г., Феденко Е.С.Staphylococcus aureus в патогенезе атопического дерматита. Рос., аллергологический ж., 2004, № 1, с.17-21.

5. Мокроносова М.А. «Влияние золотистого стафилококка и дрожжеподобных грибов на течение атопического дерматита». Дисс. докт. мед. наук. М., 1999 г.

6. Федосеева В.Н., Молотилов Б.А., Ларина О.Н., Федоскова Т.Г. «Бактериальная аллергия», Пенза, ЧТ Тугушева, 2004, 214 с.

7. Хутуева С.Х. Бронхиальная астма. Нальчик, 1988, с.127.

8. Государственная Фармакопея СССР, XI, 1, 2, М., 1998.

9. Федосеева В.Н., Камышева В.А., Ларина О.Н. «Способ получения бактериальных аллергенов», Рос. Гос. Регистрация № 2183970 от 27.06.2002 г.

10. A.Oehling, Бактериальная инфекция в этиологии бронхиальной астмы , Патофиз. и эксп. терапия, 1999, № 1, стр.6-11.

11. Reha CM, Ebru А Specific immunotherapy is effective in the prevention of new sensitivities. Allergol Immunopathol (Madr) 2007; v35; N 2, p.44-51.

12. Gould H J et al. The allergic march from St. aureus superantigens to IgE , Allergy, 2007, 93, 106-136.

13. Gisch K, Gehrke N. Formalin-fixed Staphylococcus aureus et al particles preven allergic sensitization of type I allergy . Int Arch allergy Immunol, 2007, v 144 (3) p.183-196.

14. Taskapan M.J., Kumar P. «Role о staphylococcal superantigens in atopic dermatitis, Ann Allergy Asthma Immunol, 2000, V. 84(1) p 3-10; p.11-2.

15. Cardona I.D., et al. Role of bacterial superantigens in atopic dermatis. Am J. Clin Dermatol. 2006, 7(5), p.273-79.

16 Lin YT, Wang C.T. et al «Role bacterial pathogens in atopic Dermatitis»/ Clin Rev Allergy Immunol., 2007 v 33 (3) p.167-177.

17. Guerin В Purification ana standatdization of allergens. Rev. Med Suisse Romande, 1994, v 114, N 3, p.251-254.

18. Правила доклинической оценки безопасности фармакологических средств (GLP), Москва, 1992 г.

19. Siegel LM., Monty K J. Determination of molecular weights and frictional ration of proteins in impure systems by use of gel filtration and dtnsity gradient centrifugation. Application to crude preparations of sulfite and hidroxylamine reductases. Biochim. et biophis. acta, 1966, 112, p.346-362.

20. В.Н.Федосеева, Г.В.Порядин и др. Руководство по иммунологическим и аллергологическим методам в гигиенических исследованиях , М., «Промедек», 1993, 319 с.

21. «Методические рекомендации по контролю иммунобиологических препаратов. Фармакопейная статья» — ФС-42., М., МЗ РФ, 2005 г.

22. «Программа EAACI по стандартизации аллергенов», ALLERGI, 2004, 59, 571-574.

23. Федосеева В.Н., Кудрина Г.П.(ред). Методические рекомендации по оценке аллергенных свойств фармакологических средств. М.: МЗ, 1988, 22 с.

ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

1. Тест-система ИФА для определения специфических IgE-антител к стафилококку в сыворотке крови больного аллергическими заболеваниями, имеющего гиперчувствительность к аллергенам стафилококка, включающая планшеты одноразового применения с иммобилизованной активной аллергенной субстанцией (ААС), выделенной из стафилококка, на стрипах; ААС St. aureus; положительный и отрицательный контроли (сыворотки); конъюгат анти-IgE-антител; твин-20; буфер с добавлением Твина (рН 7,0-7,2) для приготовления раствора для отмывок; цтратный бефер (рН 4,7) для приготовления рабочего раствора; ортофенилендиамин (ОФД) в виде таблеток 0,0002 г и пергидроль H 2 O 2 — 37% — для приготовления красящего раствора; H 2 SO 4 в качестве стоп-раствора; и инструкцию по использованию набора.

2. Активная аллергенная субстанция (ААС), выделенная из стафилококка, которая состоит из трех активных фракций с молекулярными массами 50, 130 и 170 кДа.

3. Способ определения специфических IgE-антител к стафилококку в сыворотке крови больного аллергическими заболеваниями, имеющего гиперчувствительность к аллергенам стафилококка, с применением тест-системы по п.1, включающий подготовку твердой фазы (планшет) для сорбции ААС с использованием КББ (рН 9,5); нанесение раствора ААС в лунки планшета; инкубацию ААС на твердой фазе в холоде при 2-4°С в течение 2 суток; отмывание буфером (рН 7,0-7,2) трижды, подсушивание; нанесение контрольных и испытуемых сывороток в лунки соответствующих стрипов с 50 мкл буфера (рН 7,0-7,2); инкубацию в термостате при 37°С в течение 2,5 ч; отмывание буфером (рН 7,0-7,2) трижды, подсушивание стрипов; нанесение раствора конъюгата во все лунки стрипов; инкубацию в холоде при 2-4°С в течение 18-20 ч; нанесение красителя ОФД в цитратном буфере (рН 4,7) во все лунки стрипов; нанесение во все лунки стоп-раствора; контроль реакции ИФА по оптической плотности во всех образцах при длине волны 492 нм на Мультискане.

4. Способ по п.3, в котором планшетом является одноразовый планшет с высокой сорбцией.

5. Способ по п.3, в котором ААС является AAC St. aureus.

6. Способ по п.3, в котором промывочный раствор содержит натрия хлорид, Твин 20, дистиллированную воду.

7. Способ по п.3, в котором раствор конъюгата получают путем помещения конъюгата, представляющего собой моноклональные антитела против эпсилон-цепи IgE человека, в буфер натриевой соли — Твин 20.

8. Способ по п.3, в котором цитратный буфер содержит лимонную кислоту 0,1 М, натрий фосфорнокислый однозамещенный 0,2 М, натрий фосфорнокислый двузамещенный 0,2 М, дистиллированную воду.

9. Способ по п.3, в котором красящий раствор получают путем растворения в цитратном буфере 1 таблетки ортофенилендиамина, с последующим внесением пергидроля 37%.

10. Способ по п.3, в котором стоп раствором является серная кислота (H 2 SO 4 ) 50%.

11. Способ диагностики стафилококковой аллергии, включающий определение специфических IgE-антител к стафилококку в сыворотке крови больного с использованием способа по п.2, причем позитивная реакция оценивается 2-4 классом.

12. Способ по п.11, в котором стафилококковой аллергией является аллергия немедленного типа.

Энтеротоксин А (Staphylococcus aureus) IgE, O72

Сроки выполнения: 1р.д(КДЛ)

Группа анализов: Специфические антитела класса IgE к индивидуальным аллергенам. Токсины

Описание: Можно сдавать кровь в течение дня, не ранее, чем через 3 часа после приема пищи или утром натощак. Чистую воду можно пить в обычном режиме.

Популярные анализы

о клинике

пациентам

Данный интернет-сайт носит информационный характер, не является публичной офертой.

Информацию уточнять в call-центре клиники по тел.: 65-51-51

© ООО «Больница для всей семьи», 2011-2020

  • ИМЕЮТСЯ ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ.
  • НЕОБХОДИМА КОНСУЛЬТАЦИЯ СПЕЦИАЛИСТА

Энтеротоксин А (Staphylococcus aureus) IgE, O72

  • пн-пт 7:00-20:00.
  • сб, вс 7:00-16:00.

Вы можете записаться в медицинский центер ВРАЧ Ъ ​ через онлайн-форму записи, или по телефону.

Имеются противопоказания. Необходимо проконсультироваться со специалистом.

Мы располагаем современным диагностическим и лабораторным оборудованием, которое позволяет поставить диагноз в самые кратчайшие сроки, а значит своевременно и быстро начать лечение, выбирая самые эффективные методики.

Всем, кто обращается в нашу клинику, мы оказываем качественную медицинскую помощь.

В своей работе мы опираемся только на проверенные, доказавшие свою эффективность, научно обоснованные технологии.

Мы открыты для инноваций — наши сотрудники постоянно повышают свой профессиональный уровень.

Мы гарантируем бережное, заботливое отношение к каждому пациенту, профессионализм и высокое качество обслуживания.

Анализ: Энтеротоксин А (Staphylococcus aureus) IgE, O72

  • пн-пт 8:00-20:00.
  • сб-вс 9:00-18:00.

Бланк: 9. Биоматериал: сыворотка. Контейнер: ПЖК. Результат: количественно. Срок: 2 календарных дня.

Мы находимся в Академическом районе г. Екатеринбурга на ул.Рябинина, д. 29 (900 м. от ТРЦ «Академический»). Работаем для Вас 7 дней в неделю: с понедельника по пятницу с 8:00 до 20:00 и с 9:00 до 18:00 в субботу и воскресенье.

ИМЕЮТСЯ ПРОТИВОПОКАЗАНИЯ. НЕОБХОДИМО ПРОКОНСУЛЬТИРОВАТЬСЯ СО СПЕЦИАЛИСТОМ.

Чтобы записаться на услугу Анализ: Энтеротоксин А (Staphylococcus aureus) IgE, O72, позвоните нам по телефону или оставьте свою заявку на сайте.

Энтеротоксин А (Staphylococcus aureus), IgE

КЛАСС МЕ/мл Реактивность на аллерген Класс 0: =100 Очень высокая

Подготовка к исследованию (информация для пациента):

Рекомендуется сдавать кровь утром натощак. По назначению врача, допускается сдать кровь в течение дня, через 2-4 часа после необильного приема пищи. Рекомендовано исключить прием гормональных противоаллергических препаратов. О приеме антигистаминных препаратов необходимо информировать лечащего врача.

Преаналитика, влияние различных факторов на результат:

На результат может повлиять противоаллергическая терапия (гормоны и некоторые антигистаминные препараты)

Выявление антител класса Е, отвечающих за быстрый ответ на введение аллергена. Если организм не имел контакта с данным аллергеном, тест будет отрицательным. Назначается для диагностики IgE-зависимой аллергии (атопии).

Лучшая статья за этот месяц:  Череда от аллергии
Добавить комментарий